Protocolos da cultura de pilha

Protocolo para a cultura de pilhas da CURVATURA (pilhas Endometrial bovinas). Inclui: Media de cultura, pilhas Thawing, Trypsinazation/que racha e que congela-se. - [Cultura lida do protocolo das pilhas da CURVATURA (pilhas Endometrial bovinas)]

Protocolo usado para estudar o secretion das proteínas e dos prostaglandins pelo endométrio da vaca, da ovelha, da égua, da cadela e da outra espécie. A técnica é igualmente útil para a cultura de conceptuses da peri-implantação e de tecidos placental para estudos de rotulagem metabólicos e para obter proteínas secretory do conceptus para estudos biológicos. O media usado é chamado Porco MEM, que é um media essencial modificado do mínimo suplementado com os ácidos aminados non-essential, as vitaminas, o insulin e a glicose adicional. - [Cultura lida de Explants Endometrial e de Peri-implantação Conceptuses para monitorar a síntese e o Secretion]

O protocolo descreve um método para a avaliação do número da pilha mamífera em um volume definido de media usando um hemocytometer. Os métodos automatizados que usam dispositivos da contagem de células tais como aquelas produzidas por Relha são desejáveis quando um grande número amostras individuais devem ser contada. - [Avaliação lida do número da pilha pelo protocolo de Hemocytometry Counting]

Para o trabalho low-resolution, as pilhas a ser usadas manchando podem ser crescidas diretamente em pratos regulares da tecido-cultura. É um método conveniente que não exija muito trabalho preparatório. - [As pilhas aderentes crescentes lidas diretamente no tecido tornam côncavo o protocolo]

O vidro é uma carcaça excelente para a maioria de pilhas tecido-cultura-adaptadas e é compatível com toda a fixação e soluções da mancha. As lamelas de vidro em pratos da tecido-cultura ou em 24 placas boas do multiwell são portadores apropriados, como são as corrediças do multiwell. Para estudos high-resolution, escolha as lamelas de vidro da classe disponível a mais elevada; as lamelas #1 ou #1.5 são a espessura apropriada. - [Pilhas aderentes crescentes lidas em lamelas ou em protocolo das corrediças do Multiwell]

Informação nos métodos usados para cultivar grandes quantidades de pilhas com a finalidade de obter um produto endógeno ou de recombinação. - [Protocolo em grande escala lido da cultura de pilha]

O protocolo descreve um método para chapear pilhas para o microinjection em lamelas gravadas. As lamelas para o microinjection devem ser marcadas de modo que as pilhas microinjected possam ser identificadas em pontos do tempo após a injeção. - [Lido chapeando pilhas para o protocolo de Microinjection]

O protocolo descreve a cultura de estática de embriões do postimplantation, uma alternativa ao método do rolo. O método de estática é serido melhor a 6.0 a 7.0 embriões do coitum do borne dos dias (dpc) seguidos por 24 horas (7.0 embriões do dpc) a 48 horas (6.0 embriões do dpc) do desenvolvimento. Permite a observação tempo real repetitiva com manipulação mínima do embrião. É especial útil se os únicos ou grupos pequenos de embriões precisam de ser distinguidos de se. - [Cultura de estática lida do protocolo dos embriões de Postimplantation]

Inclui a informação sobre: Teoria da isolação da pilha (tipos do tecido: Tecido Epithelial, tecido conexivo); Separando enzimas (Collagenase, Trypsin, Elastase, Hyaluronidase, Papain, quimotripsina, Deoxyribonuclease mim, Protease neutro (Dispase), inibidor do Trypsin (feijão de soja)); Técnicas da isolação da pilha: Trabalhando com enzimas, isolação básica da pilha preliminar, equilibração com 95%O2: 5%CO2, Trituration, pilha Enzymatic que colhe, colheita da pilha adesão e, Trypsin para a pilha que colhe, etc… - [guia lido da dissociação do tecido de Worthington]

Protocolo na rotulagem do Thymidine [3H]. O protocolo inclui: Media de cultura de Explant; Thymidine 100X (frio); Colaborador de Dektol; Fixador - [protocolo de rotulagem lido do Thymidine [3H]]