Protocolos Etiquetando Do Antibody

Uma vez que os tecidos são fixos e permeabilized, os antibodies estão adicionados. Estes antibodies podem ser etiquetados diretamente ou detectado por um reagent secundário etiquetado. Para a deteção indireta, todo o reagent que ligar especificamente ao antibody preliminar pode "ser etiquetado" e usado encontrar o antibody. Os reagents possíveis incluem antibodies do anti-anti-immunoglobulin, proteína A ou G, ou, se o primeiro antibody for etiquetado com biotin, streptavidin. Podem ser etiquetados com enzymes ou ouro. - [os antibodies obrigatórios lidos ao tecido secionam o protocolo]

Protocole para a deteção dos autoantibodies com os tetramers radiolabeled demontagem do antígeno. - [deteção lida dos autoantibodies com protocolo radiolabeled deMontagem dos tetramers do antígeno]

Este protocolo descreve o acoplamento covalent dos antibodies ao biotin. Os grupos do biotin ligam com afinidade extremamente elevada ao streptavidin e ao avidin, ambos que estão disponíveis acoplados comercialmente com enzymes, as tinturas fluorescentes, ou o iodo. A biotinylated o antibody preliminar, pode conseqüentemente ser detectado com alguma de uma variedade larga de etiquetas diferentes. A reação do biotinylation é simples e suave, e inactivates raramente o antibody. - [antibodies etiquetando lidos com protocolo do biotin]

Etiquetar direto de antibodies purified é o método da escolha ao simultaneamente visualizar dois ou mais antibodies da mesmo espécie, classe, ou subclass. Isto permite que o localization de antígenos múltiplos seja comparado na mesma pilha, tecido, ou amostra. Os antibodies preliminares etiquetados são também úteis para melhorar relações do fundo-à-background-to-readout, e podem ser essenciais para os immunoassays em que a quantificação boa é needed. - [antibodies etiquetando lidos com protocolo dos fluorochromes]

Este protocolo descreve um método químico simples da oxidação para etiquetar antibodies com iodo. Iodide-125 (fornecido como o NaI) é oxidado para dar forma a iodine-125 (I2), que ataca correntes laterais do tyrosyl e do histidyl. Os antibodies iodinated fàcilmente são detectados e quantitated usando contadores ou a película gamma. São usados primeiramente nos immunoassays, mas outras técnicas podem ser adaptadas convenientemente ao método de deteção do iodo. - [antibodies etiquetando lidos com protocolo do iodo]

Este método para etiquetar antibodies monoclonal envolve crescer hybridomas na presença de aminos-ácido radioativos. Este protocolo puder ser particularmente útil quando causa etiquetando convencional das técnicas o antibody perder a atividade. Os antibodies etiquetados que resultam são essencialmente idênticos aos antibodies unlabeled. - [antibodies monoclonal etiquetando lidos por Biosynthesis Protocolo]