Protocolos in situ da hibridação

Escolhendo o método de rotulagem direito para sua experiência da hibridação. Inclui: Métodos de rotulagem homogêneos para o ADN; Métodos de rotulagem homogêneos para o RNA; Estabilidade da interação do sondar-alvo; Rotulagem Nonradioactive dos oligonucleotides; Double-stranded contra pontas de prova single-stranded. - [Lido escolhendo o método de rotulagem direito para sua experiência da hibridação]

Protocolo para a hibridação in situ combinada do ADN e immunocytochemistry para a deteção simultânea de seqüências do ácido nucleico, de proteínas, e de BrdU incorporado em preparações da pilha. Inclui: Preparações da pilha e rotulagem de BrdU; Deteção do antígeno por immunocytochemistry (ICC); Visualização ICC do antígeno; - Reação Galão-BCIG (para produzir uma microscopia inferior visível do brightfield do precipitate azul); Pilha que processa para a hibridação in situ; Hibridação in situ (ISH); etc… - [hibridação do ADN e protocolo in situ combinados lidos de Immunocytochemistry]

Protocolo para estimar o rendimento de ácidos nucleicos Escavar-etiquetados. Inclui: Estimando o rendimento em um teste de ponto com um controle Escavar-etiquetado. - [Lido estimando o rendimento do protocolo Escavar-etiquetado dos ácidos nucleicos]

Descreve os princípios básicos de hibridação e vantagens e desvantagens in situ das metodologias diferentes que podem ser usadas. Inclui: Seleção da ponta de prova; Geração da ponta de prova; Etiquetas da ponta de prova; Fixação do tecido; Hibridação e lavagem; Procedimentos de controle. - [Hibridação in situ lida]

Métodos in situ para visualizar os transgenes (que incluem genes da única cópia) e os seus transcritos durante a interfase dos tecidos diferentes e da espécie da planta. Estas técnicas reduzem o tempo necessário para a caracterização da integração do transgene eliminando a necessidade para análise demorada da segregação, e estendem a caracterização ao núcleo da interfase, assim aumentando a probabilidade da predição exata da atividade do transgene. - [Métodos in situ lidos para localizar Transgenes e transcritos em núcleos da interfase]

Protocolo para a hibridação in situ multiple-target do ADN com sistemas de deteção cytochemical enzima-baseados. Inclui: Preparações da pilha; Processamento da pilha; Preparação da ponta de prova; Hibridação in situ Multiple-target (ISH); ISH com desnaturação separada da ponta de prova e do alvo [para pontas de prova com (elementos repetitivos por exemplo, de Alu)]; lavagens da Borne-hibridação; deteção cytochemical Enzima-baseada; etc… - [hibridação in situ Multiple-Target lida do ADN com protocolo Cytochemical Enzima-Baseado dos sistemas de deteção]

Discute os efeitos de vários componentes da solução da hibridação na taxa de renaturation e na estabilidade térmica de híbrido do ADN livre na solução. Inclui: Os parâmetros principais que influenciam a hibridação; Variáveis adicionais da hibridação; Hibridação in situ da competição; Hibridação do Oligonucleotide; Condições in situ da hibridação do padrão. - [Aspectos gerais lidos da hibridação do ácido nucleico]

Protocolo para o controle da qualidade de preparações do cromossoma. - [Controle lido da qualidade do protocolo das preparações do cromossoma]

Este protocolo descreve um método para o PCR in situ reverso do transcriptase (RT). O PCR in situ difere da hibridação in situ do PCR na inclusão de uma molécula do repórter na etapa da amplificação. As duas etapas do PCR in situ do RT que diferem do PCR in situ são digestão de noite no DNase RNase-livre que é executado após a digestão do protease, e uma etapa do RT, antes do PCR in situ. - [Protocolo in situ reverso lido do PCR de Transcriptase]

Este protocolo repara e prepara embriões para que a hibridação in situ visualize testes padrões da expressão do transcrito. É uma modificação do método desenvolvido por Tautz e Pfeifle para inteiro-monta a análise in situ dos embriões. O uso do protocolo padrão da hibridação em embriões RNAi-tratados conduz ao fundo elevado que mancha, que faz o visualização de testes padrões da expressão do transcrito praticamente impossível. As seguintes modificações eliminam este problema e permitem o visualização do transcrito. - [A hibridação in situ lida do transcrito de Inteiro-Monta embriões para a análise do Phenotype do RNAi-Tratado]