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Técnicas de separação da proteína

As proteínas podem ser separadas por Gel Electroforese e ser indicadas

Uma molécula com uma carga líquida mover-se-á em um campo elétrico.  Este fenômeno, denominado electroforese oferece meios poderosos de separar proteínas e outras macromoléculas tais como o ADN e o RNA.  A velocidade da migração de uma proteína (ou de alguma molécula) em um campo elétrico depende da força de campo elétrico, da carga líquida na proteína e do coeficiente de fricção.

A força elétrica que conduz a molécula carregada para o elétrodo oposta carregado é opor pelo arrasto vicioso que elevara da fricção entre a molécula movente e o media.  O coeficiente de fricção depende da massa e da forma da molécula da migração e da viscosidade do media.

A separação da electroforese é realizada quase sempre nos geles (ou em sustentações contínuas tais como o papel) um pouco do que na solução livre para duas razões.  Os primeiros geles suprimem as correntes conexivas produzidas por inclinações de temperatura pequenos, uma exigência para a separação eficaz.  Os segundos geles serem como as peneiras moleculars que realçam a separação.  Moléculas que são pequenas comparadas com os pores no movimento do gel prontamente através do gel, visto que as moléculas muito maiores do que os pores são quase immobile.  as moléculas do Intermediário-tamanho movem-se através do gel com vários graus de facilidade.  Os geles de Polyacrylamide são media de apoio da escolha para o elelectrophoresis porque são quimicamente inertes e são dados forma prontamente pela polimerização do acrilamido.  Além disso, seus tamanhos do pore podem ser controlados escolhendo várias concentrações de acrilamido e de methylenebisacrylamide (um reagente do cross-linking) na altura da polimerização.

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