Patrocine/Anuncie & Ligue-nos & Contate-nos & Sobre nós & Ajude-nos

Biologia Molecular Blog

Bornes Recentes Do Forum

 

Membranas Ocidentais Descascando Do Borrão

Informação do achado em como descascar aqui as membranas ocidentais do borrão.

Índice descascando da membrana ocidental do borrão

• Que a membrana está descascando?
• Fundo
• Aplicações
• Materiais
• Amortecedores
  
• Preparação
• Protocolo
• Visualization
• Análise Do Gel
• Borrão Ocidental Que Descasca Videos - Vindo Logo!
• Outros Protocolos Descascando Do Borrão Ocidental
• Descascar de pesquisa de defeitos da membrana
• Tópicos da discussão para borrões descascando
• Comece a ajuda em seu descascar da membrana

Que a membrana está descascando?

Descascar da membrana é a remoção dos antibodies (preliminar e secundário including) de uma membrana ocidental do borrão, para permitir o incubation de antibodies preliminares e secundários novos para o assay de uma proteína nova borrar ocidental.

 

 

Aplicações de descascar ocidental do borrão

O electrophoresis do gel do agarose é usado principalmente na análise ou na separação de moléculas do DNA e do RNA (embora as proteínas podem também ser separadas em gels do agarose), porém a separação permite também o purification de tamanhos específicos de DNAs após a digestão do enzyme da limitação. Isto é usado geralmente em cloning para obter os plasmids do corte, em que o electrophoresis do gel do agarose separa vetores do corte dos uncut.

Assim descascar reserva:

1. Reusar das membranas ocidentais do borrão a assay para a expressão de uma outra proteína
2. Ao assay para a proteína total
3. Para assay para a proteína non-non-phosphorylated (após assaying para proteína phosphorylated).

 

 

Amortecedores Descascando Da Membrana

Descascar requer amortecedores e o incubation especiais em um forno.

Amortecedores Usados:

Amortecedor Descascando

• 62.5 milímetros Tris-HCl (pH 6.8)
• 2% SDS. (adicione ul 280 do merceptoethanol 2-beta ou de uma concentração final de 0.1 M 2-Mecaptoethanol).

Protocolo Descascando

• adicione 280 μlitros de 2-beta-mercaptoethanol por 40 mL do amortecedor descascando (a uma concentração final de 100 milímetros)
• 1. Lave a membrana em TBST (1 x 5 minutos)
  2. Incubate a membrana no amortecedor descascando por 30 minutos em 50-60°C (use um forno do heating para este - e mantenha o fechado porta do forno devido ao cheiro)
  3. Lave em TBST (2 x 5 minutos)
  4. Obstrua a membrana para 1 h no leite de obstrução de 5%
  5. Siga o protocolo normal para desenvolver borrões ocidentais.

 

 

 

Aviso: main(/home/molec2/public_html/includes/western-borre-protocols.php) [function.main]: não abriu o córrego: Nenhum tal lima ou diretório em /home/molec2/public_html/protein/western-blot/stripping-western-blot-membranes/includes/body.php na linha 83

Aviso: main() [function.include]: ' falhado da abertura/home/molec2/public_html/includes/western-blot-protocols.php ' para o inclusion (include_path='.:/usr/lib/php:/usr/local/lib/php ') em /home/molec2/public_html/protein/western-blot/stripping-western-blot-membranes/includes/body.php na linha 83