Ensaio da proteína de Lowry

Determinação da proteína pelo ensaio de Lowry

O método de ensaio da proteína de Lowry para a determinação da concentração da proteína é um dos ensaios os mais veneralvelmente e os mais amplamente utilizados da proteína. O método de Lowry foi descrito primeiramente em 1951 por Lowry e outros (Lowry e outros, 1951).

A hidrólise é provavelmente o método o mais exato de determinar a concentração da proteína seguida pela análise do ácido aminado. A maioria outros de métodos são sensíveis ao
a composição de ácido aminado da proteína, e as concentrações absolutas não podem ser obtidas. O procedimento de Lowry é sensível, e é moderada constante da proteína à proteína. A avaliação da proteína de Lowry foi tão amplamente utilizada que é uma alternativa completamente aceitável a uma determinação absoluta rigorosa em quase todas as circunstâncias em que as misturas da proteína ou os extratos crus são involvidas.

O método é baseado em ambos a reação do biureto, em que as ligações de peptide das proteínas reagem com o cobre sob circunstâncias alcalinas para produzir Cu+, que reage com
o reagente do Folin, e a reação do Folin-Ciocalteau, que é compreendida deficientemente mas phosphomolybdotungstate são reduzidos essencialmente ao azul do heteropolymolybdenum pela oxidação cobre-catalisada de ácidos aminados aromáticos. As reações conduzem a uma cor azul forte, que dependa em parte do índice do tyrosine e do tryptophan. O método é pena sensível a aproximadamente 0.01 magnésio de protein/mL, e é usado melhor em soluções com concentrações na escala 0.01-1.0 mg/mL da proteína.

Produtos químicos e substâncias que interferem com o ensaio de Lowry

O método de Lowry para a determinação da concentração da proteína é amplamente utilizado, porém pode ser sujeito à interferência por muitos substâncias e produtos químicos.

Produtos químicos que são sabidos ao interefere com o ensaio de Lowry:

• Barbital
• TAMPÕES
• Cloreto do césio
• Citrato
• Cysteine
• Diethanolamine
• Dithiothreitol
• O EDTA
• EGTA
• HEPES
• mercaptoethanol
• Nonidet P-40
• Fenol
• Pyrrolidone do Polyvinyl
• Deoxycholate do sódio
• Salicylate de sódio
• Thimerosol
• Tricine
• TRIS
• Triton X-100

Referências do método de Lowry

Biol de Lowry e outros J. Chem. 193:265 - 275 (1951)

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