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Limitações De Microarray Do Antibody

Proteína e antibody Microarrays

Problemas e soluções possíveis para o antibody Microarrays

Disponibilidade dos antibodies
            Um outro desafio às disposições do antibody deve obter antibodies de encontro ≥ às 100.000 proteínas que compreendem o proteome humano.  Há atualmente uma fração muito pequena dos antibodies disponíveis do proteome.  Além, o specificity de muitos destes antibodies é documentado deficientemente e os antibodies adicionais podem ser requeridos a
permita a deteção de modificações borne-post-translational.  A deteção das proteínas por interações–do antígeno do antibody é caracterizada também por uma escala larga do specificity e da afinidade.  Também, é difícil obter um jogo grande do antibody altamente específico
moléculas. Conseqüentemente, a maioria de disposições do antibody são limitadas em seu uso e contêm alguns agentes well-defined da captação dirigidos em uma classe particular dos marcadores da proteína (9.17) 
- para não agir glycosylation similar

Outros problemas que enfrentam o antibody Microarrays e soluções possíveis
As estratégias classical da geração do antibody pelo immunization animal parecem ser pouco práticas. As bibliotecas recombinant do indicador do antibody são mais prometedoras (59-61). Recentemente, muitos métodos recombinant de gerar antibodies foram investigados.
Estes incluem phage antibody-indicam, indicador do ribosome, SELEX (evolução sistemática dos ligands pelo enriquecimento exponencial), indicador do mRNA, e indicador affibody, que foram desenvolvidos para avançar a produção dos antibodies e/ou dos imitadores do antibody (16.54.56.62).  Estes métodos todos envolvem a construção de repertoires grandes das regiões viable com a atividade obrigatória potencial, que são selecionadas então por círculos múltiplos de purifications da afinidade. O candidato clones pode mais mais ser selecionado usando a seleção do maturation que melhora afinidaoes obrigatórias.  Entretanto, um sistema ideal da seleção, que seja custo rápido, robust, sensível, baixo, automatizado, e minimizado, deve ser tornado ainda inteiramente (16.54).  Estes fragmentos menores do antibody geralmente diminuíram o cross-reactivity e propriedades similares em cima do acessório (7.8.9.27).
O também porque os antibodies recombinant têm uma afinidade potencial elevada, specificity elevado, e seu peso molecular menor, que é geralmente o kDa aproximadamente 30 quando os antibodies non-non-recombinant forem o kDa aproximadamente 150, acessório denso e orientado às superfícies da sustentação é facilitado (63.64).
            Os antibodies não são as únicas moléculas que podem ligar proteínas.  Aptamers é os oligonucleotids curtos que podem ligar e crosslink proteínas covalent do alvo.  Isto facilita
condições mais elevadas da lavagem do stringency que promove a deteção do emperramento específico.  Além disso, estas moléculas fàcilmente são selecionadas, postas, e synthesized.  O alvo purified da proteína é uma exigência para seu uso entretanto, e os aptamers podem exibir emperramento inclinado enquanto RNAs tende a ser carregado altamente negativamente (9). Um grupo (Somalogic) usou recentemente o aptamer anti-humano immobilized do immunodeficiency virus-gp120 detectar concentrações subnanomolar da proteína do alvo no serum humano de 5% (65). 

Em seguida: Métodos e análise de deteção de Microarray da proteína

Referências para a proteína e o antibody Microarrays

Para trás a:

Introdução e fundo às microplaquetas da proteína e às microplaquetas do antibody.

Tipos de microplaquetas do antibody e da proteína