Boa vinda à estação molecular!

Você tem que registar antes que você possa afixar em nossos forums ou usar nossas características avançadas. Registo Agora! Seus livre e rápido!

Registado já? Início de uma sessão agora abaixo.

Nome Do Usuário:

Senha:

Recorde-me?

Registado já e esqueceu-se de sua senha? Clique abaixo para recuperá-la.

Recupere Senha Perdida

Junte agora - está rápida e livre!

A estação molecular é a rede a maior dos investigadores, dos cientistas e dos amantes da ciência em qualquer lugar!

Bornes Recentes Do Forum

Proteomics

Informação em como o proteome ou o jogo das proteínas em uma pilha são estudados.

Métodos De Proteomoics

O índice de proteína de uma pilha é estimado para consistir em milhares de tipos diferentes de proteínas com uma escala dinâmica da expressão. A tecnologia que está sendo usada atualmente envolve a recuperação dos componentes de proteína, o fractionation desta mistura muito complexa, o proteolysis enzymatic de cada espécie separada e isolada, a análise spectrometric maciça extensiva e finalmente combinar os dados estruturais gerados de encontro a uma base de dados de proteínas sabidas ou de produtos antecipados da expressão do genome.

Este procedimento envolve uma etapa inicial usando 1 ou o electrophoresis 2-dimensional (DE). Usando 1-DE, as proteínas são separadas na base da massa molecular; a técnica é reproducible e pode ser usada para proteínas na escala maciça do kDa–10 300, mas limitou a definição. Para a separação de umas misturas mais complexas da proteína, 2-DE é o método preferido. Isto envolve separar as proteínas primeiramente de acordo com sua carga líquida por uma etapa focalizar isoelectric e então, na segunda dimensão, de acordo com sua massa molecular que emprega o electrophoresis dodecyl do gel do sulfate-sulfate-polyacrylamide do sodium (SDS-PAGE) que dá um eciency elevado da separação.

 O spectrometry maciço (MS) é o método da escolha para a identificação das proteínas separadas, e spectrometry de 2-DE e maciço representa agora uma tecnologia por que diverso mil proteínas podem ser separadas, detectado e identificado em uma forma automatizada.

A metodologia de Proteomics é feita inicialmente pela separação e pela posição da proteína por 2-DE seguido pelo excision das proteínas do interesse que se submetem então à digestão proteolytic para render uma mistura de fragmentos do peptide. Os peptides são analisados pelo spectrometry maciço, usando inicialmente MALDI-MS para a determinação e a geração maciças molecular de uma impressão digital da massa do peptide. Se a base de dados que procurara neste estágio render resultados ambiguous, uma análise spectrometric da segunda massa, ESI-MS/MS, está usada gerar a informação da seqüência que é usada para procurarar mais estrito da base de dados.

Do spectrum da massa obtido na análise da mistura do sumário da proteína, o mapa da massa do peptide ou a impressão digital maciça do peptide isto é as massas molecular dos fragmentos do peptide, podem ser verificados. Frequentemente, se a seqüência do amino-ácido for suficientemente original e a exatidão maciça suficientemente altamente, o mapa maciço pode ser usado procurarar bases de dados 12–15 para identificar com sucesso a proteína sem a necessidade para umas análises mais adicionais. Se, entretanto, procurarar da base de dados conduz aos resultados ambiguous, a seguir umas análises mais adicionais do MS, envolvendo o uso do spectrometry maciço em tandem (MS/MS), são empreendidas sequencialmente em cada peptide na mistura gerar uma seqüência, ou na seqüência parcial, sabida como um Tag da seqüência, para estes peptides. Isto é conseguido freqüentemente pelo uso de ESI-MS/MS19 e geralmente uma etapa adicional do purification deve ser executada para separar os peptides dos sais e dos detergentes que podem ser presente que causam a atenuação do sinal do peptide.

Uma base de dados mais adicional que procurara com a massa molecular do peptide e a informação do Tag da seqüência deve conduzir à identificação unambiguous da proteína.

Informação Relacionada De Proteomics:

Proteomics

Estação De Proteomics

Estação Molecular 2006 Do Copyright