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Tópicos da pesquisa de defeitos e do fórum da esterilização
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A esterilização é definida como a destruição de todos os formulários da vida. Pode ser efetuada por vários agentes. Para as exigências práticas do laboratório bacteriológico muitos daqueles agentes tais como a eletricidade, a luz solar, etc., são de pouco valor e são limitados em suas aplicações; outro são tão bem - serido às finalidades particulares que seu uso está restringido quase inteiramente a tais aplicações. Os métodos do princípio usados o mais frequentemente estão esterilizando (calor, vapor e pressão - uma combinação) e produtos químicos, porém esterilizar é a mais eficaz se executado corretamente
Há dois métodos principais da esterilização.
A)
1) As soluções concentradas destroem micro-organismos retirando a água de suas pilhas (plasmólise), por exemplo, na preservação do alimento por soluções concentradas de sal ou de açúcar. Os micro-organismos acostumados a uma carcaça nutriente concentrada podem sofrer o plasmoplysis (estouro da pilha) se coloc em um media menos concentrado. Em um ou outro caso, se são sujeitados gradualmente às condições de mudança, a morte é atrasada ou impedida.
2) A dessecação é destrutiva a muitos micróbios, espe cially aqueles que não dão forma aos spores. Por exemplo, picosegundo. Radicicola é muito sensível à dessecação no cobrir-vidro ordinário ou no algodão.
3).
Isto é usado geralmente como um queimador de bunsen no laboratório, porém há diversos métodos de aquecimento:
1. Na esterilização em uma chama a descoberto,
(a) Os meios os mais simples de sterilizing um instrumento do metal são aquecê-lo ao ness vermelho em uma flama. Este método é adotado sempre para a platina do ster, cobre, etc., fios e ferro e spatulas niquelar, fórceps, etc. ilizing.
Uma agulha da platina deve sempre com cuidado ser secada antes da esterilização, prendendo a perto da flama. Isto evita sputtering, que dispersa micro-organismos, especial se o material húmido, por exemplo, gordura ou proteína, na agulha é empurrado imediatamente na flama.
(b) Um instrumento pode sterilized inflamando o, isto é, passando o ràpida através de uma flama quente. Este método é útil para os instrumentos, etc., lustrando as superfícies desprovidos dos vincos em que os micro-organismos puderam escapar a destruição, por exemplo, facas, hastes de vidro, punhos de agulhas da platina, bocas dos tubos de teste, garrafas, pipeta, etc.
(c) As feridas profundas sterilized pelo cautery com um instrumento aquecido a um calor vermelho maçante.
2.
Em uma emergência, em uns instrumentos pequenos, agulhas, etc., pode sterilized mergulhando os no éter ou no álcool absoluto e após a remoção que ilumina o líquido aderente e que permite que consuma a superfície dos instrumentos. Repita o processo. Pode-se então com segurança supr que o instrumento assim que tratado é estéril.
3.
As velas de filtro da porcelana sterilized aquecendo os ao calor branco no forno de mufla. Este método da esterilização não pode ser aplicado aos filtros da porcelana com encaixes do metal, tais como filtros de Berkefeld.
A destruição de animais autopsiados e de desperdícios acumulados do laboratório é realizada igualmente melhor desse modo.
4.
A exposição ao ar quente é o método usual de sterilizing todos os produtos vidreiros, instrumentos com punhos do metal, etc., mas não é apropriado para posições secundárias orgânicas, à excecpção das lãs, do algodão e do papel.
Para segurar a esterilização eficiente, os produtos vidreiros preparados, etc., deve ser coloc em um gás ou em um forno eletricamente aquecido (que contêm um termômetro que regista sobre 200 C.) cuja a temperatura é mantida em aproximadamente 150 C. para uma hora, ou em uns 180 C. por dez minutos. O forno deve ser permitido refrigerar para baixo a 60 C. antes de abrir a porta para evitar a quebra dos produtos vidreiros por correntes do ar frio. O algodão, as lãs, e o papel são chamuscados ligeiramente nesta temperatura,
O instrumento deve estar absolutamente limpo e seco antes de sterilized.
4.
A esterilização pelo calor húmido pode ser efetuada em uma de quatro maneiras:
1.
Algumas substâncias usadas como media de cultura, sendo ricas no volátil ou em substâncias de outra maneira quimicamente instáveis, não podem ser aquecidas a 100 C. sem uma alteração marcada (por exemplo, coagulação) e em certa medida um tion do destruc de suas propriedades; soro de sangue, por exemplo.
Pasteur mostrou que tais media podem ser melhor ster ilized aquecendo os em uma baixa temperatura (55-60 C.) por muito tempo do que em uma alta temperatura (70 C. ou mesmo 100 C.) por um curto período de tempo. Neste processo, o calor não é aplicado 'diretamente, em regra geral. O controle da temperatura é ordinariamente realizado por meio da água aquecida ao grau desejado.
O aquecimento prolongado em uma baixa temperatura constitui a pasteurização. Na prática, entretanto, encontra-se que a fim matar toda a pasteurização dos organismos deve ser COM bined com o método do aquecimento descontínuo planejado por Tyndall. Os media albuminosos sujeitados ao método de Tyndall devem ser incubados finalmente em 37 C. por quarenta e oito horas para eliminar todos os espécimes que mostram a contaminação.
2.
(a) Aquecimento contínuo. A água em 100 C. destrói os formulários vegetative das bactérias quase instantaneamente, e os spores dentro cinco a quinze minutos ordinariamente, embora muitos spores de espécies resistentes não sejam matados pelo aquecimento de diversas horas na água de 100 C. suspeitada da contaminação da água de esgoto podem assim ser tornados seguros para finalidades bebendo simplesmente fervendo por alguns minutos.
Este método é aplicável aos instrumentos do metal, as seringas, os bujões de borracha, a tubulação da borracha e do vidro, e o outro instrumento pequeno.
(b) Aquecimento descontínuo. (Método de Tyndall.) Tyndall observou que determinados formulários resistentes encontrados em uma infusão feita do feno não estiveram destruídos aquecendo a infusão em 100 C., uma vez que, mesmo quando a temperatura foi sustentada por um período prolongado, contudo fervendo a por um curto período de tempo em três dias sucessivos todos os organismos vivos foram destruídos. Sua teoria era aquela aquecendo em 100 C., os formulários tative do vege mas não os spores foram matados. Os últimos germinam como o líquido esfria e são matados durante o segundo aquecimento. Alguns spores, entretanto, escapam de struction no segundo aquecimento;
estes terão germinado antes que o terceiro aquecimento fosse devido. Após a terceira esterilização de aquecimento é realizado.
A explanação dada agora, entretanto, é que o ance da oposição dos micro-organismos está abaixado gradualmente sob a influência de aquecimentos repetidos. Este princípio de aquecimento em três dias sucessivos, um media a sterilized é sabido agora como o método de Tyndall da esterilização. Na prática geral do laboratório, o vapor é usado em vez da água em 100. , mas isto necessita o instrumento especial, visto que a água se empresta prontamente aos meios à mão.
A natureza física do media, a resistência extraordinária dos spores de determinadas espécies de bactérias ou ambos na combinação, podem exigir que este aquecimento intermitente esteja continuado durante um período mais longo do tempo, isto é, quatro, cinco, seis, etc., dias na sucessão para o mesmos ou um período mais longo cada vez, ou que o período entre aquecimentos mittent inter esteja alongado twenty-four horas a quarenta e oito horas.
O método de Tyndall é valioso que os media da composição delicada podem sterilized sem produzir mudanças indesejáveis, como é produzido frequentemente pelo ture elevado do tempera do autoclav.
3. Esterilização no vapor de fluxo em 100 C. contínuos ou descontínuos, (a) aquecimento contínuo. A ebulição ou a exposição simples ao vapor em 100 C., mesmo que a exposição seja prolongada, não são um método de confiança da esterilização. Quando os micro-organismos foram secados, sua resistência aos efeitos de calor está realçada muito, e é especial esta o caso quando são misturados com as substâncias de uma natureza colloidal. Determinados formulários resistentes do protoplasma conhecidos como os spores não podem ser destruídos por um aquecimento a 100 C., mesmo quando a temperatura foi mantida por minutos eral do sev.
(b) Aquecimento descontínuo. Uso geral para o ilization do ster dos media.
Este princípio de esterilização avançou por achados de Tyndall sua aplicação mais larga no trabalho bacteriológico com o uso do vapor de fluxo. O vapor de alta pressão pode ser utilizado à vantagem do bom se uma estação do aquecimento central está disponível. O sterilizer de Arnold empreg o vapor para o processo da esterilização e empresta-se prontamente ao método contínuo e descontínuo.
4. Esterilização pelo vapor Superheated (sob a pressão e conseqüentemente acima de 100 C.). A água, as seringas, as limpezas cirúrgicas, fundamento, instrumento da india-borracha, filtros, cultivos velhos, media de cultura, etc., não feridos por termperatures elevados, podem mais rapidamente sterilized aquecendo no vapor sob a pressão.
A exposição ao vapor em uma temperatura de 115 C. por vinte minutos é na maioria dos casos suficiente para segurar a esterilização,
Mas alguns media, batata por exemplo, exigem uma temperatura de 120 C. por dez a quinze minutos. Realiza-se agora que os media sujeitados a esta alta temperatura se submetem às mudanças hydrolytic que as tornam inoportunas para o cultivo de uns micro-organismos mais delicados. A esterilização no vapor superheated é continuada em um instrumento especial chamado uma autoclave, que possa ser assim que construído a respeito do funcionamento pelo vapor direto ou indireto. O último é o mais desejável para a esterilização dos media.
5)
A luz parece actuar produzindo os germicida químicos poderosos, provavelmente orgânicos por óxidos, no médio cercando as bactérias. Determinados raios de luz, do azul, do violeta e ultravioleta são em particular destrutivos às pilhas vivas. É a estes raios que a luz do sol deve sua ação de desinfecção. O uso prático foi feito dos raios ultravioletas na esterilização da água empregando a lâmpada de vapor do mercúrio do Tanoeiro-Hewitt que tem um quartzo em vez de um tubo de vidro, porque estes raios não passam através do vidro.
6)
A esterilização pode ser efetuada pela filtragem dos gás ou dos líquidos através dos materiais que reterão micro-organismos.
O melhor exemplo da filtragem dos gás é o uso do algodão obstrui dentro as garrafas e os tubos que contêm micro-organismos. O algodão é poroso bastante permitir o intercâmbio necessário dos gás mas permitirá que nem a poeira nem os micro-organismos extrangeiros entrem. A esterilização do ar ou dos outros gás se 3d dianteiro através do algodão dependeria em cima da espessura da camada do algodão e igualmente em cima da força que foi exercida.
Determinados líquidos usados no trabalho bacteriológico não podem ser sujeitados mesmo a uma quantidade moderada de calor sem profunda alterar sua natureza. A fim fazer um estéril tão fluido, é passada através de uma embarcação cilíndrica, fechado em uma extremidade como um tubo de teste, e fêz da porcelana porosa do “biscoito”, queimado duramente e unglazed (filtro da terra da câmara) ou do kieselguhr, de uma terra diatomaceous fina (filtro de Berkefeld) e denominado uma vela ou uma vela.
Os pores dos filtros mais finos são tão pequenos que quando os líquidos, e os sólidos na solução passarem completamente, os micro-organismos estão retidos e as passagens do líquido completamente em uma condição germ-free.
Pasteur em suas primeiras obras utilizou placas do emplastro como o media de filtração, mas em conseqüência de Chamberland pesquisa, porcelana porosa substitui agora o emplastro. O asbesto finamente shredded embalado firmemente em um cadinho de Gooch serirá como um filtro bacteriano forneceu a camada de asbesto é suficientemente grosso. A taxa de filtragem é geralmente muito lenta porque os pores do filtro são tão muito minuciosos; conseqüentemente para superar esta aspiração ou pressão da desvantagem é empregado geralmente para acelerar o processo. Este método não pode excluir organismos filtráveis.
7)
Em um dos métodos mais recentes planejou para a preparação de vacinas que anti-rábicas a vacina é preparada coloc o vírus (medula espinal de um coelho irracional) em um saco do colódio e dializando o em água destilada running. O vírus vivo é destruído, contudo suas propriedades de imunização são não enfraquecidas retido. Completamente o efeito oposto pode ser obtido sob o algum que circunstâncias diferentes. Se um saco do colódio que contem uma suspensão de um organismo patogénico for coloc na cavidade de corpo de um animal suscetível os organismos dentro do saco prosperam, sendo nutrido pelos líquidos de corpo que difundem através da membrana semi-permeable.
GOMANDO, J.G.: Raiva Hydrophobia. Um estudo de vírus fixo, determinação do M.L.D., tratamento vacinal (Hogyes, Pasteur, e vacina dializada), e testes da imunidade. Jornal das doenças infecciosas, Vol. XIV (1914), pp. 33-52.
8)
A pulverização ou o esmagamento real das pilhas microbianas são recorridos para a demonstrar enzimas intracellular.
B.
1)
A esterilização por infectants do dis tem mas uso limitado no trabalho bacteriológico. A quantidade de desinfectante necessária destruir organismos existentes em um media nutriente é maior do que a quantidade necessária inibir a multiplicação de um organismo que possa subseqüentemente ser usado como uma inoculação; o media é tornado conseqüentemente inútil.
Porque um exemplo, um formalin 1-1000 o cloreto mercuric, 1.5%, um fenol de 5%, uma solução composta de 2% de cresol, etc., seja barato e adaptável em muitos casos. O Tincture do iodin é valioso para feridas da pintura.
Os sabões da terra comum, e mais sabão particular verde, têm um valor germicidal da situação, e este conjuntamente com sua ação solvente em cima das gorduras e da proteína, e a limpeza mecânica que acompanha seu uso, justifica atribuir-lhes um lugar importante entre os desinfectantes químicos.
Os desinfectantes usados sterilizing a pele antes do pus da coluna, do sangue, etc. lecting, do assunto vivo devem com cuidado ser removidos lavando a peça bem com o álcool antes de coletar o material, se não a presença do desinfectante interferiria materialmente com o crescimento subseqüente dos organismos na cultura.
3. Os desinfectantes são adicionados igualmente aos filtrado estéreis que são exigidos já não como media de cultura. Uma quantidade pequena de algum desinfectante (tal como o thymol ou a cânfora) que é sem ação química nos componentes do líquido é selecionada com esta finalidade.
Uma quantidade do ácido carbólico (0.5%) ou do outro produto químico é adicionada freqüentemente às vacinas, aos termos do CCB, aos soros, etc., para finalidades preservativas.
4. Os desinfectantes estão usados às vezes para sterilize uma cultura quando os produtos dos microorgansims estão sob o tigation dos inves. O clorofórmio, o éter, o toluol, o óleo do alho ou da mostarda, etc., que podem ser expelidos mais tarde pela evaporação, estão entre o mais útil com respeito a isto.
2)
Os reagentes químicos como pertencem à classe conhecida como anti-sépticos, isto é, as substâncias de que iniba o crescimento, mas não destroem a vida bacteriana, são obviamente inúteis.
As bocas dos tubos de teste, dos tubos da fermentação, das pipeta, etc., são obstruídas ordinariamente com algodão antes da esterilização. Com esta finalidade o algodão é ideal como é barato e adaptável, sere para filtrar para fora micro-organismos do ar, quando permita a ing a difusão pronta dos gás, e em seguida usado uma vez lhe pode ser queimado.
O papel (jornal ordinário) pode ser usado para envolver os mercadorias de vidro como pratos de Petri, pratos da profundo-cultura, pipeta, etc., qual desejam armazenar em uma condição estéril e para o que algodão não é adaptável.
Os produtos vidreiros sterilized com a finalidade dos micro-organismos de destruição atuais em sua superfície e ou no algodão ou no papel usado respectivamente obstruindo ou envolvendo. Depois que a esterilização o algodão e o papel sere para impedir que os micro organismos entrem e contaminem nos utensílios estéreis.
Seque o calor, embora não como eficaz um contratorpedeiro do germe como o calor húmido, seja mais adaptável à esterilização de garrafas de cultura vazias, de pipeta e de outros produtos vidreiros. O ization Hot-air do steril realiza não somente a esterilização dos mercadorias de vidro, dos plugues do algodão, etc., mas “ajusta” os plugues de modo que possam ser segurados com maior facilidade.
Todos os produtos vidreiros devem estar absolutamente limpos e secos ou conter traços de álcool somente antes de preparar para a esterilização; se não a esterilização não pode ser realizada. Se considere a umidade capaz está atual nos tubos de teste, nas garrafas, etc., não evaporará durante o processo hot-air da esterilização, e é muito evidente que a temperatura de tais parcelas húmidas dos produtos vidreiros não alcangará ou no leastwill não exceder 100 C.
Sentidos. Os tubos e as garrafas de teste são obstruídos com algodão. Os fórceps ordinários são usados com esta finalidade. (A haste de vidro de A pode igualmente ser usada.) Uma parte pequena de algodão é agarrada na borda com o fórceps e introduzida na boca do tubo de teste. Os plugues devem projetar-se nos tubos de teste de 3 a cms 4., e cms 3 a 5. Na garganta das garrafas, de acordo com o tamanho da garrafa. Somente uma quantidade de algodão deve projetar-se fora da boca que é suficiente para proteger a parcela girada externa (bordo) dos tubos ou das garrafas de teste da poeira.
Um efeito da “Natal-árvore” deve ser evitada. Os plugues não devem ser assim que a respeito de seja removido firmemente com a dificuldade, nem tão frouxamente a respeito da oferta nenhuma resistência à remoção. Pouca experiência bastará demonstrar a quantidade de algodão ao uso e à consistência com que o plugue deve caber.
O algodão obstrui para os tubos de teste, garrafas, etc., pode ser rolado. Este tipo do plugue é mais estável e pode ser usado diversas vezes. Mande o instrutor demonstrar o método do rolamento.
Para a esterilização hot-air, os tubos de teste obstruídos com algodão podem ser amarrados em grandes pacotes ou coloc em cestas de fio (nunca em uns copos da ágata), o algodão obstrui acima. Alguns tubos de teste não devem ser coloc em uma grande fio-cesta ou em uma cremalheira do teste-tubo do fio, porque é necessário economizar espaço no sterilizer hot-air.
Os pratos de Petri são envolvidos separada no papel e amarrados junto nos jogos de três, uma folha do jornal faz quatro papéis do tamanho apropriado para envolver pratos de Petri e é barata.
Três ou mais pratos de Petri podem ser envolvidos junto se todos devem ser usada ao mesmo tempo. Identifique cada um claramente por meio do número da mesa.
Pipeta. Coloc uma parte de algodão na parte inferior de um tubo de teste, obstrua a parte superior somente da pipeta com algodão (não demasiado firmemente}, sair mas pouco do algodão que projeta-se para fora. Envolva uma parcela pequena de algodão em torno do terço mais baixo da pipeta, introduza a pipeta no tubo de teste até os descansos da ponta no algodão, fazendo o algodão que envolve o saque como um plugue para o tubo.
Envolva as pipeta assim que preparado no papel (uma camada) e amarre-as e identifique- claramente por meio do número da mesa.
Uma caixa coberta do metal é usada frequentemente para que as pipeta da terra arrendada sterilized. A extremidade superior das pipeta é obstruída com algodão, a pipeta são introduzidas no caso, a extremidade aberta do caso obstruído com algodão, e a tampa substituída. (Este último método não é recomendado para o estudante novo, como a necessidade da técnica cuidadosa em remover uma pipeta estéril do caso sem contaminar aquela permanecer é difícil de imprimir em cima dele).
Os tubos da fermentação são obstruídos com algodão como dirigido para os tubos de teste; o plugue do algodão não deve projetar-se no bulbo.
Os pratos de cultura profundos são envolvidos única no papel como dirigido para pratos de Petri.
As corrediças e os cobrir-vidros sterilized geralmente inflamando, mas somente como necessários.
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| 09-06-2006 11:02 AM | 3 | 1416 | |
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