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Fixation

Os fixatives e os preservativos são usados preservar tecidos para seu estudo. Os fixatives comuns tais como o formalin protegido neutro (formaldehyde de 10% em saline protegido phosphate (PBS)) são usados também estudar as estruturas da pilha, e os organelles da pilha encontrados nas pilhas individuais (por exemplo, núcleo, reticulum endoplasmic áspero, e mitochondria). Os tecidos devem primeiros para estabilizar-se mecanicamente e biochemically em um fixative. É importante considerar que um fixative não deve ser demasiado tóxico a seu alimentador, e não deve danificar o tecido que está sendo preservado.

Índice do fixation

Introdução ao fixation e ao histology do tecido

Quando um tecido é removido de uma circunstância viva, diversas mudanças estão iniciadas em suas pilhas. As bactérias começam a mtiltiply e destroem-nos. Também o autolysis (self-digestão), um lysis ou uma dissolução das pilhas por enzymes contidos, ajustam-se dentro. Os enzymes parecem inverter sua ação; em vez de synthesizing aminos-ácido em proteínas da pilha, começam a rachar proteínas em aminos-ácido. Estes aminos-ácido difundem fora das pilhas, e porque as proteínas de um sult dos re são não mais por muito tempo coagulable por reagents químicos. As mudanças acima conduzem às circunstâncias pós-morte so-called. Que as finalidades da examinação do oratory do laboratório é necessário trate o tecido para impedir estes efeitos pós-morte; é também necessário converter as peças da pilha nos materiais que remanescerão insoluble durante o tratamento subseqüente, e proteger as pilhas da distorção e do encolhimento quando sujeitado aos líquidos tais como álcoois e a parafina quente. Uns objetivos importantes mais adicionais da preparação do tecido são melhorar o potencial manchando das peças do tecido e mudar seus deslocamentos predeterminados refractive para a visibilidade melhorada. O procedimento usou-se encontrar-se com as exigências acima é chamado fixation e os líquidos são chamados fixatives ou soluções reparando. As soluções reparando devem encontrar-se com os seguintes objetivos principais:

 

Finalidade Do Fixation:

A finalidade do fixation é:

 

Fixatives

Em alguns casos o fixative pode ter (que combina insolubly) um efeito mordanting no tecido, trazendo desse modo os dois junto em uma ação manchando e ajudando no acessório das tinturas e das proteínas a se.

Os tecidos devem ser colocados nos fixatives o mais cedo possível após a morte. Se, entretanto, atrasa é unavoidable, eles deve ser colocado em um refrigerador, assim reduzindo o autolysis e o putrefaction a um mínimo até que o fixa tive possa ser aplicado. Um único produto químico possui raramente todas as qualidades requisite de um fixative bom; uma solução reparando conseqüentemente é composta raramente de somente um produto químico. Uma exceção familiar é formalin. Outros fixatives de confiança con o tain um ou mais produto químico para coagulate as proteínas das pilhas, e um ou os mais produto químico para render as proteínas insoluble sem actu alía coagulating as.

Os fixatives do coagulant mudam o spongework das proteínas nos engranzamentos através de que a parafina pode fàcilmente passar, assim ing do formulário um tecido da consistência apropriada para secionar. Além, os enlaces pro do tein strengthened por coagulants de encontro a quebrar para baixo durante uns procedimentos mais atrasados. Usado sozinho, entretanto, coagulants tenha tages disadvan que podem dar forma a uma rede demasiado grosseira para o mais melhor detalhe cytological. Também, o coagulation tende a induzir a formação de estruturas artificiais (artifacts). Os fixatives de Noncoagulant produzem poucos artifacts mas se usado sozinho têm a desvantagem de dar ao tecido um sistency con deficiente para encaixar.

Segue conseqüentemente que o líquido reparando ideal é uma combinação um ou mais coagulants da proteína e de um ou mais non coagulants. As soluções as mais eficientes são desta natureza, e combinam se possível todos os tipos de ação. Isto exclui aqueles projetados para o fixation de algum componente específico da pilha, tal como chromosomes, glycogen, mitochondria.

Protocolos Do Fixation

Porque contêm os ingredientes que agem em cima de se, muitas misturas forem as mais eficientes quando fresco composto.

Entretanto, as peças individuais geralmente podem ser compostas como as soluções conservadas em estoque e ser misturadas junto imediatamente antes do uso. Entre os produtos químicos freqüentemente usados são o aldeído do formulário, o álcool ethyl, o ácido acetic, o ácido picric, o dichromate do potassium, o cloreto mercuric, o ácido chromic e o tetroxide do ósmio.

Desde que cada produto químico possui seu próprio jogo das vantagens e das desvantagens, cada componente da solução deve, sempre que possível, para compensar para um defeito em algum outro componente. Para o exemplo, no exemplo do fixative extensamente usado, solução de Bouin: 1. O formaldehyde repara o cytoplasm mas em tal maneira que retarda a penetração da parafina. Repara o chromatin deficientemente e faz o cytoplasm basiphilic. 2. O ácido de Picric coagulates o plasm do cyto de modo que admita a parafina, saa do tecido macio, repare o chromatin e faça o cytoplasm acidophilic, mas encolhe e faz os produtos químicos do chroma usados geralmente na lata reparando das soluções 5 acidophilic. 3. O ácido acetic compensa para ambos os últimos defeitos. Nenhuma régua dura e rápida existe a respeito da escolha de um fixative; a seleção do gen ' é determinada erally pelo tipo de investigação.

Se houver qualquer pergunta a respeito das plantas futuras para um tecido, o formalin é uma escolha segura; permite secundário ou o borne-post-fixation. Algumas sugestões podem ser incluídas. Se o anatomy total do tisstie for satisfatório, os fixatives do rotitine podem ser usados: formalin, Siisa, Zenker, Helly, ou Bouin. Os fixatives especiais para inckisions da pilha são Carnoy, Flemming, Champy, Helly, Schaudinn, Regand, e outro. Para o histochemistry o investigador é limitado ao formalin, à acetona, ou ao álcool ethyl. A maioria de soluções reparando são nomeadas após a pessoa que origina os; Zenker e Bouin são exemplos. Se o mesmo homem originar mais de uma combinação dos produtos químicos, os meios adicionais de designá-los foram usados. Soluções fracas e fortes de Flemming, série de B3 de Allen, de Ely, etc.. O líquido de Susa foi nomeado por Heidenhain após as primeiras duas letras de duas palavras: sublimate e fazem saltar.

 

 

 

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