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Biologia Molecular - Citações Da Ciência

Os erros que usam dados inadequados são muito menos do que aqueles que não usam nenhum dados em todos ~Charles Babbage (1792-1871)

Funcione o DNA "no gel do agarose do derretimento baixo".
Para fragmentos do DNA 600bp a 5kb use1%; Para 300- 700bp o agarose do uso 2%. Se você necessitar funcionar os fragmentos menores usam 2% "Nusieve" + 1% "baixo derretem".
Depois que as faixas separaram, visualize a faixa em uma caixa UV (minimize a exposição do DNA a UV)
Corte a faixa para fora (não risque o filtro UV na caixa clara!).
Adicione ul 100 do amortecedor de T.E. (10mM Tris-HCl pH EDTA de 7.6, de 1mM) à faixa, esmagamento, calor a 65oC para approx. 5 minutos, adicionam 200l do phenol, vortex, calor 65°C por 3 min., vortex.
Microfuge 5 minutos, remove supernant
Adicione 100 litros de T.E. ao phenol, vortex, calor 65°C 3 min. de vortex
Microfuge, supernants do pool.
Extrato do clorofórmio (approx. 400 ul), microfuge 3 minutos.
Precipitate EtOH, adicionando 1/10 de vol. 3M Na0Ac, 2.5 vol. EtOH.
-20°C 1-2+hrs; a rotação 30 min., seca para baixo, traz acima em vol apropriado 0.1X T.E.

Ajuste o transporte-iluminador ao wavelength UV longo (ou ao low-power). Esta é uma maneira grande minimizar a quantidade de época e de energia da exposição UV do DNA. Isto minimizará o mutagenesis UV do DNA.
Guarnição fora tanto quanto do agarose da faixa como possível sem remover o DNA. Isto ajuda na contaminação minimizando do agarose que realçará o purification do DNA.
Se você estiver começando os jogos comerciais do uso dos problemas tais como spin-columns.There são alguns jogos excelentes para extrair o DNA se você puder o ter recursos para. Estes incluem jogos de Qiagen, de sigma, e de outras companhias.

Sim! Eu quero aprender o mais atrasado na biologia e na pesquisa molecular! Faça-me por favor um perito em meu trabalho do laboratório! Também eu quero dizer meus amigos para começar por favor meu capítulo livre de PCR! Não preocupe seu email é seguro com nós. Nós odiamos o Spam tanto quanto você .
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