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Fluxo Cytometry

No fluxo cytometry, você encontrará a informação e os artigos de fundo no método cytometry do fluxo, nos protocolos detalhados, nas ferramentas bioinformatic da análise e em um forum cytometry do fluxo para todas suas perguntas e discussões da pesquisa da biologia da pilha.

Fundo De Cytometry Do Fluxo

O fluxo cytometry (chamado também FCM) é um método molecular da biologia que seja usado geralmente contar, as pilhas rapidamente examina, analisa e do sorte ou mesmo as partículas microscópicas suspendidas no líquido. Os cytometers do fluxo permitem uma análise multiparametric simultânea das características físicas e/ou químicas das únicas pilhas ou partículas que fluem após um instrumento ótico e/ou eletrônico da deteção, em um córrego fluido usando um feixe da luz de laser.

O termo cytometry deriva-se das palavras gregas para a medida (metry), e da pilha (cyto) que dá a "fluxo cytometry" a medida de únicas pilhas enquanto fluem após um detetor.

O fluxo ou a classificação da pilha são uma potencialidade funcional mais adicional do fluxo cytometry permitindo a separação dos tipos de pilhas com o uso de forças elétricas ou mecânicas coletar populações das pilhas com um ou mais característica física ou do produto químico ajustada pelo usuário.

Aplicações De Cytometry Do Fluxo

O fluxo cytometry é usado geralmente na análise do ciclo da pilha, deteção e análise do apoptosis ou o necrosis, classificação da pilha, a deteção de superfície do antígeno da pilha para o immunology, e a análise da pilha de haste.

Medidas De Cytometry Do Fluxo

O fluxo Cytomers pode ser usado medir os seguintes parâmetros, dependendo da máquina, do fluorophore e do outro:

• volume das pilhas
• características morphological das pilhas
• antígenos de superfície da pilha (conjunto de marcadores do differentiation (CD))
• deteção de pigments da pilha (isto é chlorophyll ou phycoerythrin)
• apoptosis (quantificação, medida da degradação do DNA, potencial mitochondrial da membrana, mudanças da permeabilidade, atividade do caspase)
• assays do viability da pilha
• avalie o DNA (por exemplo na análise do ciclo da pilha, no kinetics da pilha, no proliferation)
• avalie o RNA
• análise e classificação chromosomal (para a construção da biblioteca do DNA ou a pintura do chromosome)
• avalie para a expressão e o localization da proteína
• produtos transgenic em vivo, particularmente na proteína fluorescente verde ou nas proteínas fluorescentes relacionadas
• atividade enzymatic
• e muitos outros parâmetros

Como Trabalho De Cytometers Do Fluxo?

Um feixe de luz (geralmente luz de laser) de um único wavelength é dirigido em um córrego hydro-dynamically focalizado do líquido. Um número de detetores são visados o ponto onde o córrego passa através do feixe luminoso; um na linha com o feixe luminoso (scatter para diante ou FSC) e diverso perpendicular a ela (scatter lateral (SSC) e um ou mais detetores fluorescentes). Cada partícula suspendida que passa através do feixe dispersa a luz em alguma maneira, e os produtos químicos fluorescentes encontrados na partícula ou unidos à partícula podem ser excitados em emitir-se a luz em uma freqüência mais baixa do que a fonte clara. Esta combinação da luz dispersada e fluorescente é escolhida acima pelos detetores, e analisando flutuações no brilho em cada detetor (um para cada pico fluorescente da emissão) é então possível extrapolate vários tipos de informação sobre a estrutura física e química de cada partícula individual. FSC correlaciona com o volume da pilha e SSC depende da complexidade interna da partícula (isto é forma do núcleo, da quantidade e do tipo de granules cytoplasmic ou da aspereza da membrana). Alguns fluem cytometers no mercado eliminaram a necessidade para o fluorescence e usam somente o scatter claro para a medida. Outro flui imagens do formulário dos cytometers do fluorescence de cada pilha, da luz dispersada, e da luz transmitida.