Welcome to Molecular Station! Zapraszamy do Molekularnej Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Musisz się zarejestrować zanim będziesz mógł umieścić na naszym forum lub skorzystać z zaawansowanych funkcji. Register Now! Zarejestruj się teraz! Its Free and Fast! Jego Darmowy i Fast!

Already registered? Już zarejestrowany? Login now below. Zaloguj się poniżej.

User Name: Nazwa użytkownika:

Password: Hasło:

Remember Me? Remember Me?

Already registered and Forgot your password? Już zarejestrowany i Zapomniałeś hasła? Click below to recover it. Kliknij poniżej, aby ją odzyskać.

Recover Lost Password Odzyskaj Nie pamiętam hasła

Join now - it's fast and free! Dołącz teraz - szybko i za darmo!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molekularnej Station to największa sieć badaczy, naukowców i miłośników nauki w dowolnym miejscu!

Recent Forum Posts Recent Forum Posts

siRNA and RNAi Protocols siRNA i RNAi Protokoły	siRNA and RNAi Bioinformatics siRNA i bioinformatyki RNAi	siRNA and RNAi FAQ siRNA i RNAi FAQ	siRNA and RNAi Kits and Products siRNA i RNAi Zestawy i produkty	siRNA and RNAi Forum siRNA i RNAi Forum	siRNA and RNAi News siRNA i RNAi Aktualności

siRNA Protocols and RNAi Protocols siRNA protokoły i protokoły RNAi

siRNA Transfection Protocol Protokół siRNA Transfekcja

siRNA transfection protocol : Transfect 6 well plates siRNA Transfekcja protokołu: Transfect 6 oraz tablic

1. apply first siRNA treatment when cells are 60% confluent (measure confluency with voltmeter); plate 1.5x10^6 cells on Friday, transfect on Wednesday. pierwsze zastosowanie siRNA leczenia, gdy komórki są 60% confluent (środek confluency z Voltmeter); tablicy 1.5x10 ^ 6 komórek w piątek, transfect w środę. For each well: Do każdego dołka:

1. Dilute 2.5 ug siRNA (20uM is approximately 0.26ug/ul. 9.62 ul per well of a 6-well plate) with culture media to a final volume of 100 ul. U se barrier pipette tips. You can make a master mix if all the wells will be transfected with the same siRNA. Rozcieńczyć 2,5 ug siRNA (20uM jest około 0.26ug/ul. 9,62 na ul również z 6-dobrze płytkę) z kulturą mediów do końcowej objętości 100 ul. U se barierę końcówki pipet. Można dokonać kapitan wymieszać, jeśli wszystkie studnie będą transfected z tej samej siRNA. Do this in a sterile autoclaved plastic tube. Czy to w sterylnym plastikowym autoklawizowanego.
2. Add 12 ul RNAiFect (Qiagen - or any other RNA transfection reagent, see manufacturer's protocol) per siRNA mastermix tube and mix gently. Dodaj 12 ul RNAiFect (Qiagen - lub jakiegokolwiek innego odczynnika Transfekcja RNA, patrz protokół producenta) na siRNA głównej rurki i delikatnie mieszać.
3. Incubate for 15 minutes at room temperature to allow complex formation between siRNA and lipids. Inkubować przez 15 minut w temperaturze pokojowej w celu umożliwienia tworzenia złożonych między siRNA i lipidów.
4. Aspirate media from cells and add 900ul fresh media to each well. Aspirate mediów z komórek i dodaj 900ul świeże mediów do każdej studzienki.
5. Add siRNA mixture (112 ul per well) drop-wise while gently swirling plate. Dodaj siRNA mieszaniny (112 na ul również) kroplami jednocześnie delikatnie swirling tablicy.
• Apply second siRNA treatment 2 days later, following the steps outlined above. Zastosuj sekund siRNA traktowania 2 dni później, zgodnie z procedurą opisaną powyżej. The second transfection will add to decrease expression of the gene of interest. Drugi Transfekcja będzie dodać do zmniejszenia ekspresji genów zainteresowania.

Other siRNA protocols Inne protokoły siRNA

Also see our siRNA and RNAi page Zobacz również nasz siRNA i RNAi stronę


Disclaimer / Terms of Service | Privacy Policy | ©2005-2007 Molecular Station.com, All rights reserved. Zastrzeżenie / Terms of Service | Privacy Policy | © 2005-2007 Molekularnej Station.com, Wszelkie prawa zastrzeżone.

Send this page to a friend Wyślij tę stronę znajomemu