Welcome to Molecular Station! Zapraszamy do Molekularnej Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Musisz się zarejestrować zanim będziesz mógł umieścić na naszym forum lub skorzystać z zaawansowanych funkcji. Register Now! Zarejestruj się teraz! Its Free and Fast! Jego Darmowy i Fast!

Already registered? Już zarejestrowany? Login now below. Zaloguj się poniżej.

User Name: Nazwa użytkownika:

Password: Hasło:

Remember Me? Remember Me?

Already registered and Forgot your password? Już zarejestrowany i Zapomniałeś hasła? Click below to recover it. Kliknij poniżej, aby ją odzyskać.

Recover Lost Password Odzyskaj Nie pamiętam hasła

Join now - it's fast and free! Dołącz teraz - szybko i za darmo!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molekularnej Station to największa sieć badaczy, naukowców i miłośników nauki w dowolnym miejscu!

Recent Forum Posts Recent Forum Posts

PCR Protocols PCR Protocols	PCR Bioinformatics and Databases PCR bioinformatyki i bazy danych	Learn about PCR Dowiedz się więcej na temat PCR	PCR Kits and Products Zestawy i produkty PCR	PCR Forum PCR Forum	PCR Books PCR Książki

PCR Samples and Template DNA PCR oraz próbki DNA Szablon

Template DNA and Samples for PCR Szablon dla Próbki DNA i PCR

Guidelines for template DNA and samples for PCR: Wytyczne dla szablonu próbek DNA i PCR dla:

PCR Samples:  Types, Amount and Purity Próbki PCR: Rodzaje, ilość i czystość

Types of Samples for PCR Rodzaje próbek do PCR

Single- or double-stranded DNA of any origin may be a PCR sample. Pojedyncze lub podwójne-stranded DNA jakiegokolwiek pochodzenia może być PCR próby. Templates that can be used for amplification include animal, bacterial, plant, or viral. Szablony, które mogą zostać wykorzystane do wzmocnienia obejmują zwierząt, bakterii, roślin lub wirusowe. Conversion of RNA molecules, including total RNA, poly (A+) RNA, viral RNA, tRNA, or rRNA must occur prior to amplification when using these as templates to so-called complementary DNA (cDNA) by the enzyme reverse transcriptase (either MuLV or recombinant, rTth DNA polymerase). Konwersja cząsteczek RNA, w tym całkowite RNA, poli (A +) RNA, wirusowego RNA, tRNA, rRNA lub muszą wystąpić przed amplifikacji przy użyciu tych jako szablony do tzw komplementarny DNA (cDNA) przez enzym odwrotnej transkryptazy (albo MuLV lub rekombinacji, rTth polimeraza DNA).

Amount of Material for PCR Ilość materiału do PCR

Starting material amount, required for PCR can be as little as a single molecule.  As a basis, up to nanogram amounts of DNA cloned template, up to microgram amounts of genomic DNA, or up to 105 DNA target molecules are best for initial PCR testing. Materiał wyjściowy kwoty wymaganej do PCR może być trochę za jednym cząsteczki. Jako podstawę do nanogramach ilości DNA imitacja szablonu, do kwoty mikrogram genomowego DNA, lub do 105 docelowej cząsteczki DNA są najlepsze do testowania wstępnej PCR .

Purity of Template and Sample for PCR Czystość szablonów i próbki do PCR

Purity of the DNA sample that will be used for PCR amplification does not need not be high. Czystość DNA próbki, które zostaną wykorzystane do wzmocnienia PCR nie nie muszą być wysokie. A single cell, a crude cell lysate, or even a small sample of degraded DNA template is usually adequate for successful amplification. Pojedyncza komórka, komórki lysate ropy, a nawet małe próbki DNA zdegradowanych szablon jest zazwyczaj wystarczające dla skutecznego amplifikacji. The requirements of sample purity must be that the target contains at least one intact DNA strand encompassing the amplified region and that the impurities associated with the target be dilute so as to not inhibit enzyme activity. Wymagania czystości próbki muszą być, że cel zawiera co najmniej jeden nienaruszone DNA strand regionie obejmującym amplifikowany i zanieczyszczeń związanych z docelowym należy rozcieńczyć tak, aby nie hamować aktywność enzymu. Be that as it may, for some amplifications, such as long PCR, it may be necessary to consider the quality and quantity of the DNA sample. Bądź tym, jak mogą, dla niektórych amplifications, jak długo PCR, konieczne może być rozważenie jakości i ilości DNA próbki. For example: 1. Na przykład: 1. When more template molecules are available, there is less occurrences of false positives caused by either cross-contamination between samples or “carryover” contamination from previous PCR amplifications. Gdy więcej cząsteczek szablonu są dostępne, jest mniej zdarzeń fałszywych alarmów spowodowanych przez każdą ze współzależności między zanieczyszczenia próbki lub "przeniesienie" zanieczyszczenia z poprzednich PCR amplifications.

2. When the PCR amplifications lacks specificity or efficiency, or when the target sequences are limited, there is a greater chance of inadequate product yield. Kiedy PCR amplifications brakuje specyficzności lub skuteczności, lub gdy docelowe sekwencje są ograniczone, istnieje większa szansa na nieodpowiednie wydajność produktu.

3. When the fraction of starting DNA available to PCR is uncertain, it is increasingly difficult to determine the target DNA content. Po początkowych frakcji DNA dostępne dla PCR jest pewne, coraz trudniej jest określić docelowe DNA.