Welcome to Molecular Station! Zapraszamy do Molekularnej Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Musisz się zarejestrować zanim będziesz mógł umieścić na naszym forum lub skorzystać z zaawansowanych funkcji. Register Now! Zarejestruj się teraz! Its Free and Fast! Jego Darmowy i Fast!

Already registered? Już zarejestrowany? Login now below. Zaloguj się poniżej.

User Name: Nazwa użytkownika:

Password: Hasło:

Remember Me? Remember Me?

Already registered and Forgot your password? Już zarejestrowany i Zapomniałeś hasła? Click below to recover it. Kliknij poniżej, aby ją odzyskać.

Recover Lost Password Odzyskaj Nie pamiętam hasła

Join now - it's fast and free! Dołącz teraz - szybko i za darmo!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molekularnej Station to największa sieć badaczy, naukowców i miłośników nauki w dowolnym miejscu!

Recent Forum Posts Recent Forum Posts

PCR Protocols PCR Protocols	PCR Bioinformatics and Databases PCR bioinformatyki i bazy danych	Learn about PCR Dowiedz się więcej na temat PCR	PCR Kits and Products Zestawy i produkty PCR	PCR Forum PCR Forum	PCR Books PCR Książki

Analysis of PCR Products Analiza produktów PCR

Agarose Gel Electrophoresis Analysis of PCR Products Elektroforezy na żelu agarozowym Analiza produktów PCR

To quickly and easily analyze and resolve PCR products, a 3% NuSieve can be used GTG agarose (FMC Bioproducts, Rockland, ME) and 1% Seakem GTG agarose (FMC Bioproducts) gel run in either TBE (89 mM Tris-borate, 2 mM EDTA) or TAE (40 mM Tris-acetate, 2 mM EDTA, pH approx 8.5). Aby szybko i łatwo analizować i rozwiązać produktów PCR, 3% NuSieve mogą być wykorzystane GTG agarozy (FMC Bioproducts, Rockland, ME) i 1% agarozy Seakem GTG (FMC Bioproducts) uruchomić w żelu albo TBE (89 mM Tris-borate, 2 mM EDTA) lub TAE (40 mM Tris-octan, 2 mM EDTA, pH ok. 8,5). The resolved DNA bands are detected by staining the gels with either approx 0.5 μg/mL of ethidium bromide, followed by destaining with water or SYBR® Green 1 (Molecular Probes Inc., Eugene, OR) and finally photographed under UV illumination. W rozwiązany pasm DNA są wykrywane przez barwienia żelu albo ok. 0,5 μ g / ml bromku etydyny, a następnie przez destaining z wodą lub SYBR ® Green 1 (Molekularnej wystawał Inc, Eugene, OR) i wreszcie fotografowane pod oświetlenie UV. Use a 123-basepair (bp) or 1-kilobasepair (kbp) ladder as a convenient marker for size estimates of the products. Użyj basepair-123 (BP) lub 1-kilobasepair (KBP) drabiny jako wygodny marker wielkości szacunkowych danych produktów.

Other Analytical Methods to Analyze PCR Products Inne metody analityczne do analizy produktów PCR

There are a variety of other detection methods available for PCR product analysis, such as ethidium bromide-stained 8–10% polyacrylamide gels run in TBE buffer, Southern gels or dot/blots, subcloning and direct sequencing, HPLC analysis, and the use of 96-well microplates, to name a few. Istnieje wiele innych metod wykrywania dostępnych produktów PCR do analizy, takie jak bromku etydyny-stained 8-10% żelu poliakrylamidowym uruchomić w bufor TBE, Południowy żele lub kropki / blots, subcloning i bezpośredniego sekwencjonowania, analizy HPLC, a wykorzystanie 96-studzienkowej microplates, aby wymienić tylko kilka. The reverse dot-blot method combines PCR amplification with nonradioactive detection. Na odwrocie dot-blot metodą PCR amplifikacji łączy z nonradioactive wykrywania. The introduction of fluorescent dyes to PCR, together with a suitable instrument for real-time, online quantification of PCR products during amplification has led to the development of kinetic PCR or quantitative PCR. Wprowadzenie barwników fluorescencyjnych do PCR, wraz z odpowiednim instrumentem w czasie rzeczywistym, on-line ilościowego PCR w czasie produktów amplifikacji doprowadziło do rozwoju kinetycznej PCR lub ilościowy PCR. Quantitative PCR (QPC) measures PCR product accumulation during the exponential phase of the reaction and before amplification becomes vulnerable, ie, when reagents become limited. Ilościowe PCR (QPC) gromadzenia środków produktu PCR w czasie gwałtownego etap reakcji i staje się podatny przed amplifikacji, czyli odczynniki, kiedy stają się ograniczone. The ABI Prism 7700 (Applied Biosystems) and the LightCycler (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Germany) are integrated fluorescent detection devices that allow fluorescence monitoring either continuously or once per cycle. ABI Prism 7700 (Applied Biosystems) i LightCycler (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Niemcy) są zintegrowane fluorescencyjny wykrywania urządzeń, które umożliwiają monitorowanie fluorescencji w sposób ciągły lub raz na cykl. These instruments can also characterize PCR products by their melting characteristics, eg, to discriminate singlebase mutations from a wild-type sequence. Instrumenty te mogą również charakteryzować PCR produktów przez ich topnienia cechy, np. do dyskryminowania singlebase mutacji z dzikiego typu sekwencji. The recently designed Mx4000™ Multiplex Quantitative PCR System (Strategene, La Jolla, CA) can generate and analyze data for multiple fluorescent real-time QPCR assays. Niedawno zaprojektowane Mx4000 ™ Multipleks ilościowe PCR System (Strategene, La Jolla, CA) może generować i analizować dane w wielu fluorescencyjny czasie rzeczywistym QPCR analiz.