home > elisa > index.php Strona główna> elisa> index.php
You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Musisz się zarejestrować zanim będziesz mógł umieścić na naszym forum lub skorzystać z zaawansowanych funkcji. Register Now! Zarejestruj się teraz! Its Free and Fast! Jego Darmowy i Fast!
Already registered? Już zarejestrowany? Login now below. Zaloguj się poniżej.
Already registered and Forgot your password? Już zarejestrowany i Zapomniałeś hasła? Click below to recover it. Kliknij poniżej, aby ją odzyskać.
Recover Lost Password Odzyskaj Nie pamiętam hasła
Join now - it's fast and free! Dołącz teraz - szybko i za darmo!
Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molekularnej Station to największa sieć badaczy, naukowców i miłośników nauki w dowolnym miejscu!
There are in fact two things, science and opinion; the former begets knowledge, the latter ignorance. Istnieją bowiem dwie rzeczy, nauki i opinią; byłego begets wiedzy, ostatnie niewiedzy. ~Hippocrates (c460-c.377 BCE) Greek physician. ~ Hipokrates (c460-c.377 pne) Grecki lekarz.
Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, or ELISA, is a biochemical technique used mainly in immunology to detect the presence of an antibody or an antigen in a sample. Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, lub ELISA, jest biochemiczne techniki wykorzystywane głównie w immunologii w celu wykrycia obecności przeciwciał do antygenów lub w próbce. The ELISA has been used as a diagnostic tool in medicine and plant pathology, as well as a quality control check in various industries. W ELISA został wykorzystany jako narzędzie diagnostyczne w dziedzinie medycyny i patologii roślin, jak również kontroli jakości w różnych branżach. In simple terms, in ELISA an unknown amount of antigen is affixed to a surface, and then a specific antibody is washed over the surface so that it can bind to the antigen. W prostych słowach, w nieznanej wysokości ELISA antygenu jest umieszczony na powierzchni, a następnie specyficzne przeciwciała są myte na powierzchni, tak aby mógł on wiążą się z antygenem. This antibody is linked to an enzyme, and in the final step a substance is added that the enzyme can convert to some detectable signal. To przeciwciało jest związane z enzymu, oraz w ostatnim kroku substancji dodaje się, że enzym może przekonwertować sygnał do niektórych wykrywalne. Thus in the case of fluorescence ELISA, when light is shone upon the sample, any antigen/antibody complexes will fluoresce so that the amount of antigen in the sample can be measured. Tak więc w przypadku fluorescencji ELISA, gdy światło jest zajaśniała na próby, każdy antygen / przeciwciało kompleksów fluoresce tak będzie, że kwota antygenu w próbce może być zmierzony.
Performing an ELISA involves at least one antibody with specificity for a particular antigen. Performing ELISA obejmuje co najmniej jeden z swoistość przeciwciał dla określonego antygenu. The sample with an unknown amount of antigen is immobilized on a solid support (usually a polystyrene microtiter plate) either non-specifically (via adsorption to the surface) or specifically (via capture by another antibody specific to the same antigen, in a "sandwich" ELISA). Próbka z nieznanego antygenu kwota jest unieruchomiony na solidne wsparcie (zwykle polistyrenu microtiter tablicy) albo nie specjalnie (za pomocą adsorpcji na powierzchni) lub specjalnie (poprzez wychwytywanie przez inne przeciwciała specyficzne dla tego samego antygenu, w "sandwich "ELISA). After the antigen is immobilized the detection antibody is added, forming a complex with the antigen. Po antygenu jest unieruchomiony na wykrywanie przeciwciał dodaje się, tworząc kompleks z antygenem. The detection antibody can be covalently linked to an enzyme, or can itself be detected by a secondary antibody which is linked to an enzyme through bioconjugation. Wykrywanie przeciwciała mogą być związane kowalencyjnie związane z enzymu, lub może sam zostać wykryte przez przeciwciało wtórne, które jest związane z enzymu poprzez bioconjugation. Between each step the plate is typically washed with a mild detergent solution to remove any proteins or antibodies that are not specifically bound. Między każdym kroku tablicy jest zwykle myte w roztworze łagodnego detergentu w celu usunięcia wszelkich białka lub przeciwciała, które nie są szczególnie związani. After the final wash step the plate is developed by adding an enzymatic substrate to produce a visible signal, which indicates the quantity of antigen in the sample. Po ostatecznej umyć krok tablicy jest rozwijany przez dodanie enzymatycznej substrat do produkcji widoczny sygnał, który wskazuje ilości antygenu w próbce. Older ELISAs utilize chromogenic substrates, though newer assays employ fluorogenic substrates with much higher sensitivity. Starsze ELISAs wykorzystywać chromogenic substratów, ale nowsze testy zatrudniają fluorescencyjnych substratów o wiele wyższa czułość.
Because the ELISA can be performed to evaluate either the presence of antigen or the presence of antibody in a sample, it is a useful tool both for determining serum antibody concentrations (such as with the HIV test[1] or West Nile Virus) and also for detecting the presence of antigen. Ponieważ ELISA może być przeprowadzony w celu oceny albo obecność antygenu lub obecność przeciwciał w próbce, jest to użyteczne narzędzie zarówno dla oznaczania stężenia w surowicy (np. z HIV test [1] lub West Nile Virus), a także do wykrywania obecności antygenu. It has also found applications in the food industry in detecting potential food allergens such as milk, peanuts, walnuts, almonds, and eggs.[2] ELISA can also be used in toxicology as a rapid presumptive screen for certain classes of drugs. Ma również znaleźć zastosowania w przemyśle spożywczym w wykrywaniu potencjalnych alergenów pokarmowych, takich jak mleko, orzeszki ziemne, orzechy włoskie, migdały i jaj [2]. ELISA może być również stosowany w toksykologii jako ekran szybkiego domniemanych w odniesieniu do niektórych klas leków.
The ELISA test, or the enzyme immunoassay (EIA), was the first screening test commonly employed for HIV. W test ELISA, lub enzymatycznego immunologiczny (EIA), był pierwszym powszechnie zatrudnionych test na HIV. It has a high sensitivity. Posiada wysoką czułość. In an ELISA test, a person's serum is diluted 400-fold and applied to a plate to which HIV antigens have been attached. W test ELISA, osoby surowicy jest rozcieńczyć 400-krotnie i stosowane do tablicy antygenów wirusa HIV, do których zostały dołączone. If antibodies to HIV are present in the serum, they may bind to these HIV antigens. Jeżeli przeciwciała HIV są obecne w surowicy, mogą one wiążące dla tych antygenów wirusa HIV. The plate is then washed to remove all other components of the serum. Na tablicy jest następnie płukany w celu usunięcia wszystkich pozostałych składników surowicy. A specially prepared "secondary antibody" — an antibody that binds to human antibodies — is then applied to the plate, followed by another wash. A specjalnie przygotowany "przeciwciało wtórne" - przeciwciało, które wiąże się z ludzkich przeciwciał - jest następnie stosowana do tablicy, a następnie przez innego umyć. This secondary antibody is chemically linked in advance to an enzyme. To przeciwciało wtórne jest chemicznie związany z wyprzedzeniem do enzymu. Thus the plate will contain enzyme in proportion to the amount of secondary antibody bound to the plate. Tak tablicy zawiera enzym proporcjonalnie do ilości przeciwciała wtórne związane z płytą. A substrate for the enzyme is applied, and catalysis by the enzyme leads to a change in color or fluorescence. Substratem dla enzymu jest stosowane, i kataliza przez enzymu prowadzi do zmiany koloru lub fluorescencji. ELISA results are reported as a number; the most controversial aspect of this test is determining the "cut-off" point between a positive and negative result. ELISA wyniki są zgłaszane jako liczba; najbardziej kontrowersyjny aspekt tego testu jest określenia "odcięcia" punkt między pozytywnych i negatywnych wyników.
One method of determining a cut-off point is by comparison with a known standard. Jedną z metod ustalenia punktu odcięcia jest przez porównanie ze znanym standardzie. For example, if an ELISA test will be used in workplace drug screening, a cut-off concentration (eg, 50 ng/mL of drug) will be established and a sample will be prepared that contains that concentration of analyte. Na przykład, jeśli test ELISA zostaną wykorzystane w pracy narkotyki pokaz, odcięcia koncentracji (np. 50 ng / ml narkotyków) zostanie ustanowiony i będzie przygotowana próbka, która zawiera, że stężenie analitu. Unknowns that generate a signal that is more positive than the known sample are called "positive" and those that generate a signal less positive than the known sample are called "negative. Unknowns które generują sygnał, że jest więcej niż pozytywne próbki są znane pod nazwą "pozytywne" i tych, które generują sygnał mniej niż pozytywne próbki są znane pod nazwą "ujemne.
Prior to the development of the EIA/ELISA, the only option for conducting an immunoassay was radioimmunoassay, a technique using radioactively-labeled antigens or antibodies. Przed rozwoju EIA / ELISA, jedyną opcją dla prowadzenia immunologiczny był radioimmunoassay, przy użyciu techniki radioaktywnie-oznaczone antygeny lub przeciwciała. In radioimmunoassay, the radioactivity provides the signal which indicates whether a specific antigen or antibody is present in the sample. W radioimmunoassay, radioaktywność stanowi sygnał, który wskazuje, czy określony antygen lub przeciwciało jest obecny w próbce. Radioimmunoassay was first described in a paper by Rosalyn Sussman Yalow and Solomon Berson published in 1960[3]. Radioimmunoassay został po raz pierwszy opisane w dokumencie przez Rosalyn Sussman Yalow i Solomon Berson opublikowane w 1960 roku [3].
Because radioactivity poses a health threat, a safer alternative was sought. Ponieważ radioaktywności stwarza zagrożenie dla zdrowia, bezpieczniejsze alternatywne wniesiono. A suitable alternative to radioimmunoassay would substitute a non-radioactive signal in place of the radioactive signal. Odpowiedni byłby alternatywą dla radioimmunoassay zastąpić bez sygnału radioaktywnych w miejscu radioaktywnego sygnału. When certain enzymes (such as peroxidase) react with appropriate substrates (such as ABTS or 3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine), they can result in changes in color, which can be used as a signal. Przy niektórych enzymów (np. peroksydazy) reaguje z odpowiednimi substratami (takich jak aBTS lub 3,3 ', 5,5'-Tetramethylbenzidine), mogą one doprowadzić do zmiany koloru, który może być wykorzystywany jako sygnał. However, the signal has to be associated with the presence of antibody or antigen, which is why the enzyme has to be linked to an appropriate antibody. Jednakże, sygnał musi być związane z obecnością przeciwciał lub antygenów, który jest dlaczego enzymu musi być powiązany z odpowiednim przeciwciałem. This linking process was independently developed by Stratis Avrameas and GB Pierce[4]. To powiązanie procesu niezależnie opracowane przez Stratis Avrameas GB i Pierce [4]. Since it is necessary to remove any unbound antibody or antigen by washing, the antibody or antigen has to be fixed to the surface of the container, ie the immunosorbent has to be prepared. Ponieważ konieczne jest usunięcie wszelkich niezwiązanego przeciwciała i antygenu przez mycie, przeciwciało lub antygen musi być ustalona na powierzchni pojemnika, tj. immunosorbent musi być przygotowany. A technique to accomplish this was published by Wide and Porath in 1966[5] A do tego technika została opublikowana przez Szeroki i Porath w 1966 r. [5]
In 1971, Peter Perlmann and Eva Engvall at Stockholm University in Sweden, as well as Anton Schuurs and Bauke van Weemen in The Netherlands, independently published papers which synthesized this knowledge into methods to perform EIA/ELISA[6][7] W 1971 roku, Peter Perlmann i Eva Engvall na Uniwersytecie w Sztokholm Szwecja, jak również Schuurs i Bauke Anton van Weemen w Holandia, niezależnie opublikowanych dokumentów, które syntezy tej wiedzy do metod wykonywania OOŚ / ELISA [6] [7]
Disclaimer / Terms of Service | Privacy Policy | ©2005-2007 Molecular Station.com, All rights reserved. Zastrzeżenie / Terms of Service | Privacy Policy | © 2005-2007 Molekularnej Station.com, Wszelkie prawa zastrzeżone.