Welcome to Molecular Station! Velkommen til Molecular Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Du må registrere deg før du kan poste på vårt forum eller bruke vår avanserte funksjoner. Register Now! Registrer deg nå! Its Free and Fast! Its Gratis og rask!

Already registered? Allerede registrert? Login now below. Logg inn nå nedenfor.

User Name: User Name:

Password: Passord:

Remember Me? Husk meg?

Already registered and Forgot your password? Allerede registrert og Glemt passord? Click below to recover it. Klikk nedenfor for å gjenopprette den.

Recover Lost Password Recover Lost Password

Join now - it's fast and free! Bli medlem nå - det er raskt og gratis!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molecular Station er den største nettverk av forskere, vitenskapsmenn og vitenskap elskere overalt!

Recent Forum Posts Recent Forum Posts

Phosphorimaging

Phosphorimaging

This technique has several advantages over standard autoradiography, but the most important is that it is much more accurate in quantifying the amount of radioactivity in a substance.  This is because its response to radioactivity is far more linear than that of an x-ray film.  With standard autoradiography, a band with 50,000 radioactive disintegrations per minute (dpm) may look no darker than one with 10,000 dpm because the emulsion in the film is already saturated at 10,000 dpm.  But the phosphorimager collects radioactive emissions and analyzes them electronically, so the difference between 10,000 dpm and 50,000 dpm would be obvious.  Here is how the technique works:  We start with a radioactive sample- a blot with DNA bands that have hybridized with a labeled probe, for example.  We place this sample in contact with a phosphorimager plate, which absorbs B-rays.  These rays excite molecules on the plate, and these molecules remain in an excited state until the phosphoimager scans the plate with a laser.  At that point, the B-ray energy trapped by the plate is released and monitored by a computerized detector.  The computer converts the energy it detects to an image.  This is a false color image, where the different colors represent different of radioactivity, from the lowest (yellow) to the highest (black). Denne teknikken har flere fordeler i forhold til standard autoradiography, men det viktigste er at det er mye mer nøyaktig i kvantifisere mengden radioaktivitet i et stoff. Dette er fordi svar på radioaktivitet er mye mer lineær enn som en x-ray film. Med standard autoradiography, et band med 50.000 radioaktive disintegrations per minutt (dpm) kan se ikke mørkere enn en med 10.000 dpm fordi emulsjon i filmen er allerede mettet på 10.000 dpm. Men phosphorimager samler radioaktive utslipp og analyserer dem elektronisk, så Forskjellen mellom 10000 dpm og 50000 dpm ville være åpenbare. Her er hvordan teknikken fungerer: Vi starter med en radioaktiv prøve-en klatt med DNA-band som har hybridized med en merket probe, for eksempel. Vi plasserer denne prøven i kontakt med en phosphorimager plate som absorberer B-stråler. Disse strålene opphisse molekyler på plate, og disse molekyler liggende i en opphisset tilstand før phosphoimager skanner plate med en laser. På dette punktet, B-ray energi fanget av platen er gitt ut og overvåkes av en datastyrt detektoren. datamaskinen konverterer energi det oppdager til et bilde. Dette er en falsk farge bilde, hvor de forskjellige fargene representerer forskjellige av radioaktivitet, fra den laveste (gul) til høyeste (svart).