Speciale Eigenschap

Het Gebruikerspanel van

Mijn Comité

Mijn Comité

De Artikelen van de Wetenschap van de referentie

Recent Nieuws
De referentie/deelt Deze Plaats van Wetenschap

siRNA Transfectie

siRNA het Protocol van de Transfectie

 siRNA transfectieprotocol: Transfect 6 goed platen

  1. pas siRNA eerst behandeling toe wanneer de cellen samenvloeiende 60% (maatregelenconfluency met voltmeter) zijn; plateer cellen 1.5x10^6 op Vrijdag, transfect op Woensdag. Voor elk goed:
  1. Verdun 2.5 ug siRNA (20uM is ongeveer 0.26ug/ul. 9.62 ul per goed van een goed plaat 6) met cultuurmedia aan een definitief volume van ul 100. De uiteinden van de de barrièrepipet van het gebruik. U kunt een hoofdmengeling maken als alle putten transfected met zelfde siRNA zullen zijn. Doe dit in een steriele gesteriliseerde met autoclaaf plastic buis.
  2. Voeg zacht toe 12 ul RNAiFect (Qiagen - of een andere de transfectiereagens van RNA, ziet het protocol van de fabrikant) per siRNA mastermix buis en mengeling.
  3. Broed 15 minuten uit bij kamertemperatuur om complexe vorming tussen siRNA en lipiden toe te staan.
  4. Zuig media van cellen op en voeg verse media 900ul goed aan elk toe.
  5. Voeg siRNA druppelsgewijze mengsel (ul 112 per goed) toe terwijl zacht wervelende plaat.
  • Pas tweede siRNA behandeling 2 later dagen, na de hierboven geschetste stappen toe. De tweede transfectie zal aan dalingsuitdrukking van het gen van belang toevoegen.

Andere siRNAprotocollen

Zie ook onze siRNA en pagina RNAi


 

Het Menu van RNAi

RNAi
SiRNA
Het Forum van RNAi
Het Forum van SiRNA

De Artikelen van de Interferentie van RNA

De Interferentie van RNA

De Transfectie van RNAi

De Protocollen van SiRNA

De Transfectie van SiRNA

Verwante Methodes RNAi en SiRNA & Artikelen

siRNA

De Protocollen van RNAi

Het Forum van Proteomics

Het Bulletin van het Onderzoek van RNAi

SLUIT me aan bij het Bulletin RNAi en SiRNA om een meester te worden RNAi! Leer het recentste onderzoeknieuws, de de interferentiemethodes van RNA en de protocollen, bespreek met andere deskundigen, en los nu uw problemen problemen op!
FirstName:
E-mail:
U zult slechts verzonden worden specifieke informatie RNAi/SiRNA en u kunt op elk ogenblik afmelden. Uw e-mail zal privé worden gehouden.  Wij haten spam zo veel zoals u.