Onthaal aan Moleculaire Post!

U moet registreren alvorens u op onze forums kunt posten of onze geavanceerde eigenschappen gebruiken. Register nu! Zijn Vrij en Snel!

Reeds geregistreerd? Login nu hieronder.

Vergat reeds geregistreerd en uw wachtwoord? Klik hieronder om het terug te krijgen.

De moleculaire Post is overal het grootste netwerk van onderzoekers, wetenschappers en wetenschapsminnaars!

Moleculaire Biologie - de Citaten van de Wetenschap

Geef me maar één vaste vlek op wie om zich te bevinden, en ik zal de aarde bewegen. ~Archimedes c.287 - 212 V.CHR.


siRNA en Protocollen RNAi	siRNA en Bio-informatica RNAi	siRNA en RNAi FAQ	siRNA en Uitrustingen RNAi en Producten	siRNA en Forum RNAi	siRNA en Nieuws RNAi

siRNA transfectieprotocol: Transfect 6 goed platen

pas siRNA eerst behandeling toe wanneer de cellen samenvloeiende 60% zijn (maatregelenconfluency met voltmeter); plateer cellen 1.5x10^6 op Vrijdag, transfect op Woensdag. Voor elk goed:

Verdun 2.5 ug siRNA (20uM is ongeveer 0.26ug/ul. 9.62 ul per goed van een goed plaat 6) met cultuurmedia aan een definitief volume van ul 100. De uiteinden van de de barrièrepipet van het gebruik. U kunt een hoofdmengeling maken als alle putten transfected met zelfde siRNA zullen zijn. Doe dit in een steriele gesteriliseerde met autoclaaf plastic buis.
Voeg zacht toe 12 ul RNAiFect (Qiagen - of een andere de transfectiereagens van RNA, ziet het protocol van de fabrikant) per siRNA mastermix buis en mengeling.
Broed 15 minuten uit bij kamertemperatuur om complexe vorming tussen siRNA en lipiden toe te staan.
Zuig media van cellen op en voeg verse media 900ul goed aan elk toe.
Voeg siRNA druppelsgewijze mengsel (ul 112 per goed) toe terwijl zacht wervelende plaat.

Pas tweede siRNA behandeling 2 later dagen, na de hierboven geschetste stappen toe. De tweede transfectie zal aan dalingsuitdrukking van het gen van belang toevoegen.

Ja! Ik wil Recentst in Moleculair Biologie en Onderzoek leren! Gelieve te maken tot me een Deskundige in Mijn Werk van het Laboratorium! Ook wil ik Mijn Vrienden vertellen om Mijn Vrij PCR Hoofdstuk alstublieft te worden! Me maak niet ongerust Uw E-mail met ons Veilig is. Wij haten zo veel Spam zoals u.
Voornaam:
E-mail: