De Protocollen van de transfectie

Het protocol van de de celtransfectie van COS. Omvat oplossingen: DEAE Dextran en Chloroquine 1000X - [Gelezen het Protocol van de Transfectie van de Cel van COS.]

Het protocol van de transfectie dat in het neerhalen Dlgh1 in de primaire lymfocyten van ot-1 T wordt gebruikt. - [Gelezen Neerhalen Dlgh1 in de Primaire Lymfocyten van ot-1 T: Het Protocol van de transfectie]

Het protocol zou als uitgangspunt voor systematische optimalisering van transfectie moeten worden bekeken die door agenten wordt bemiddeld lipofecting. Zodra een positief signaal is verkregen uit a transfected plasmide die een standaardverslaggeversgen draagt, kunnen de optimale voorwaarden voor transfectie door systematische variatie van parameters zoals de aanvankelijke celdichtheid, de hoeveelheid en de zuiverheid van DNA, de media en het serum, en de tijd van blootstelling worden duidelijk gemaakt van de cellen aan complexe van kationen-lipide-DNA. - [Gelezen de Transfectie van DNA die door Lipofection Protocol wordt bemiddeld]

Polybrene en DMSO kunnen om stabiele transformatie van verscheidene types van cellen te bereiken door plasmideDNA worden gebruikt. De opbrengst van transformants is tot 15 vouwen groter met Polybrene dan met coprecipitation van calcium fosfaat-DNA. Nochtans, is er geen verschil tussen de twee methodes in de efficiency van transformatie van cellen door high-molecular-weight DNA. - [Gelezen de Transfectie die van DNA Protocol Polybrene gebruikt]

Het protocol beschrijft transfectie van plasmideDNA in zoogdiercellenvariëteiten gebruikend electroporation, een proces waardoor de externe toepassing van elektrische impulsen de doordringbaarheid van het celmembraan veroorzaakt. De cellen in opschorting en de kleine volumecellen zijn moeilijk aan transfect, terwijl de adherente cellen en de grote volumecellen vrij gemakkelijk zijn. Ongeacht celgrootte of fenotype, stijgt de transfectieefficiency met een hoge concentratie van cellen in een klein volume. - [Gelezen het Optimaliseren van Electrotransfection van Protocol het In vitro van ZoogdierCellen]

De volgende procedure is voor gelijktijdig transfectie en plateren van RUWE 264.7 cellen. Dit protocol resulteert in ongeveer 50% tot 70% celuitvoerbaarheid, en van die haalbare cellen, zijn 20% tot 40% transfected wanneer het gebruiken van pEYFP-N1 van Clontech. Omvat: Procedure om Cellen vóór Transfectie Te verdelen; Procedure om Lipofectamine 2000 en DNA Voor te bereiden; Voorbereiding van RUWE 264.7 Cellen voor Transfectie. - [Gelezen Transfecting en Plateren RUWE 264.7 Cellen met het Protocol van Lipofectamine 2000]

Het dEAE-dextran wordt over het algemeen gebruikt om een uitbarsting van voorbijgaande uitdrukking van gekloonde genen na transfectie van zoogdiercellen te verkrijgen. Vele varianten van de techniek zijn beschreven, die tot doel hebben om het begrijpen van DNA te maximaliseren en de cytotoxic gevolgen van dEAE-Dextran te minimaliseren. In dit protocol worden de cellen blootgesteld kort aan een hoge concentratie van dEAE-dextran-DNA en dan aan chloroquine difosfaat, dat facilitator van transfectie is. - [Gelezen Transfectie die door DEAE-Dextran wordt bemiddeld: High-efficiency Protocol van de Methode]

Transfectie van cellen IMEC die het protocol van de Reagens van de Transfectie SuperFect gebruiken. Het protocol omvat experimentele ontwerpoverwegingen. - [Gelezen Transfectie van Cellen IMEC die het Protocol van de Reagens van de Transfectie SuperFect gebruiken]

Het protocol beschrijft een methode voor de levering van siRNAs in zoogdiercellen bij gebrek aan verslaggeversplasmiden. Dit wordt het best met transfectiereagentia bereikt die voor de levering van antisense oligodeoxynucleotides worden ontwikkeld. De hoeveelheden hieronder gegeven reagentia worden berekend voor de transfectie van één goed van 24 goed plateren. - [Gelezen Transfectie van ZoogdierCellen met het Protocol van siRNADuplexen]