Onthaal aan Moleculaire Post!

U moet registreren alvorens u op onze forums kunt posten of onze geavanceerde eigenschappen gebruiken. Register nu! Zijn Vrij en Snel!

Reeds geregistreerd? Login nu hieronder.

De Naam van de gebruiker:

Wachtwoord:

Herinner me?

Vergat reeds geregistreerd en uw wachtwoord? Klik hieronder om het terug te krijgen.

Krijg Verloren Wachtwoord terug

Treed nu toe - het is snel en vrij!

De moleculaire Post is overal het grootste netwerk van onderzoekers, wetenschappers en wetenschapsminnaars!

De recente Posten van het Forum

 

Eiwit Protocollen

Eiwit Encyclopedie

Eiwit Bio-informatica

Het eiwit Forum van de Wetenschap

Eiwit Blog

Het Nieuws van DNA

 

Eiwit Concentratie

Eiwit Bepaling door UVAbsorptie

 

Dichtbij UVAbsorbering

Dichtbij UVAbsorbering bedraagt UVAbsorbering 280 NM: Een eenvoudige spectrometer kan de hoeveelheid proteïne in een oplossing kwantificeren.  De absorptie van de straling door proteïnen in dichtbijgelegen UV hangt van de inhoud van Tyr en RT (en in een mate op de hoeveelheid banden van Phe en van het bisulfide) af. Aldus variÃërt A280 zeer tussen verschillende proteïnen (voor a1 mg/ml oplossing, van 0 tot 4 [voor sommige tyrosine-rijke wolproteïnen], hoewel de meeste waarden in waaier 0.5-1.5 zijn). Deze methode heeft zijn voordelen; het is eenvoudig, en de steekproef is terug te krijgen. Ben dat aangezien het kan het ook nadelen die omvatten, interferentie van andere chromophores heeft, en de specifieke absorptiewaarde voor een bepaalde proteïne moet worden bepaald. Het uitsterven van nucleic zuur in het 280 NMgebied kan zijn zo veel zoals 10 keer dat van proteïne bij hun zelfde golflengte, en vandaar, kunnen een paar percenten van nucleic zuur de absorptie zeer beïnvloeden.

 

Verre UVAbsorbering

De absorptie van de peptide band bedraagt sterk in veel UV met een maximum ongeveer 190 NM   De sterke absorptie van proteïnen bij deze golflengten is gebruikt in eiwitbepaling. Wegens de moeilijkheden die door absorptie door zuurstof en de lage output van conventionele spectrofotometers bij deze golflengte worden veroorzaakt, worden de metingen meer gemakshalve gemaakt bij 205 NM, waar de absorbering over de helft dat 190 NM bedraagt. De meeste proteïnen hebben uitstervencoëfficiënten bij 205 NM voor a1 mg/ml oplossing van 30-35 en tussen 20 en 24 bij 210 NM.  Diverse zijketens, met inbegrip van die van Trp, Phe, Tyr, van hem, Cys, kwamen samen, en Arg (in die dalende orde), levert bijdragen tot A205. De voordelen van deze methode omvatten eenvoud en gevoeligheid. De steekproef is terug te krijgen en daarnaast is er weinig variatie in reactie tussen verschillende proteïnen, waarbij dichtbijgelegen-absolute bepaling van proteïne wordt toegelaten. De nadelen van deze methode omvatten de noodzaak voor nauwkeurige kaliberbepaling van de spectrofotometer in veel UV. Vele buffers en andere componenten, zoals heme of pyridoxal groepen, absorberen sterk in dit gebied.

 

Merk ook onze EiwitProtocol van de Concentratie en EiwitProtocollen van de Concentratie aan andere laboratoria.

 

De verwante EiwitArtikelen van de Concentratie

Eiwit Concentratie

Het eiwit Protocol van de Concentratie

De EiwitAnalyse van Lowry

Het Protocol van de Methode van Lowry

De Methode van Bradford

 

 

Andere EiwitArtikelen:

Het westelijke Huis van de Vlek

Immunoprecipitation Huis

Sds-PAGINA de Elektroforese van het Gel