Onthaal aan Moleculaire Post!

U moet registreren alvorens u op onze forums kunt posten of onze geavanceerde eigenschappen gebruiken. Register nu! Zijn Vrij en Snel!

Reeds geregistreerd? Login nu hieronder.

De Naam van de gebruiker:

Wachtwoord:

Herinner me?

Vergat reeds geregistreerd en uw wachtwoord? Klik hieronder om het terug te krijgen.

Krijg Verloren Wachtwoord terug

Treed nu toe - het is snel en vrij!

De moleculaire Post is overal het grootste netwerk van onderzoekers, wetenschappers en wetenschapsminnaars!

De recente Posten van het Forum

 

Eiwit Protocollen

Eiwit Encyclopedie

Eiwit Bio-informatica

Het eiwit Forum van de Wetenschap

Eiwit Blog

Het Nieuws van DNA

 

Protocol van de Analyse van Lowry het Eiwit

De eiwit Bepaling van de Concentratie door het Protocol van de Analyse van Lowry Prtoein

Materialen

1. Complex-vormt reagens: Tref onmiddellijk v3o3or gebruik door de volgende voorraadoplossingen voorbereidingen in het aandeel 100:1 te mengen: 1 (door volume), respectievelijk:
            Oplossing A: 2% (w/v) Na2CO3 in gedistilleerd water.
            Oplossing B: 1% (w/v) CuSO4·5H2O in gedistilleerd water.
            Oplossing C: 2% (w/v) het tartraat van het natriumkalium in gedistilleerd water.

2. Bereid NaOH van 2 N voor.

3. Folin (commercieel beschikbare) reagens: Gebruik bij 1 concentratie van N.

4. Normen: Gebruik een voorraadoplossing van standaardproteïne die (b.v., fractie V van de runderserumalbumine) 2 mg/ml proteïne in gedistilleerd water bevat, opgeslagen bevroren bij - 20°C. bereidt normen door de voorraadoplossing met voor gedistilleerd water als volgt te verdunnen:

De oplossing van de voorraad   (µL)     0         2.5      5          12.5     25        50        125      250      500

Water                (µL)     500      498     495      488      475      450      375      250      0
Eiwit conc.    (µg/mL) 0          10       20        50        100      200      500      1000    2000

Methode

1. Aan 0.1 ml van steekproef of norm, voeg 0.1 ml NaOH van 2 N toe. Hydroliseer bij 100°C voor 10 min in een het verwarmen blok of een kokend water - bad.

2. Koel hydrolysate aan kamertemperatuur en voeg 1 ml van vers gemengd toe complex-vormt reagens. Laat de oplossing me bij kamertemperatuur voor 10 min. bevinden.

3. Voeg 0.1 ml van Folin reagens toe, gebruikend een draaikolkmixer, en laat de mengseltribune bij kamertemperatuur voor 30-60 min (overschrijd 60 min niet).

4. Lees de absorbering bij 750 NM als de eiwitconcentratie onder 500 µg/mL of 550 NM bedroeg als de eiwitconcentratie tussen 100 en 2000 µg/mL was.

5. Breng een standaardkromme van absorbering als functie van aanvankelijke eiwitconcentratie in kaart en gebruik het om de onbekende eiwitconcentraties te bepalen.

De Verwijzingen van de Methode van Lowry

Gebaseerd op protocol door Jakob H. Waterborg.

Lowry et al. J. biol. Chem. 193:265 - 275 (1951)

De verwante EiwitArtikelen van de Concentratie

Het Protocol van de Methode van Lowry

Eiwit Concentratie

Het eiwit Protocol van de Concentratie

De EiwitAnalyse van Lowry

De Analyse van Bradford

Het Protocol van de Analyse van Bradford

Eiwit Artikelen:

Het westelijke Huis van de Vlek

Immunoprecipitation Huis