Onthaal aan Moleculaire Post!

U moet registreren alvorens u op onze forums kunt posten of onze geavanceerde eigenschappen gebruiken. Register nu! Zijn Vrij en Snel!

Reeds geregistreerd? Login nu hieronder.

De Naam van de gebruiker:

Wachtwoord:

Herinner me?

Vergat reeds geregistreerd en uw wachtwoord? Klik hieronder om het terug te krijgen.

Krijg Verloren Wachtwoord terug

Treed nu toe - het is snel en vrij!

De moleculaire Post is overal het grootste netwerk van onderzoekers, wetenschappers en wetenschapsminnaars!

De recente Posten van het Forum

De Plaats van de Referentie van de referentie

PCR Gebaseerde Plaats Geleide Mutagenese

De Mutagenese van de Plaats van de Kettingreactie van de polymerase

Leer over PCR gebaseerde plaats geleide mutagenese.

(Verwijs hieronder naar Diagram)

Begin eerst met een plasmide die een gen met een TAC tyrosinecodon bevat dat wij aan een phenylalanine TTC codon willen veranderen. om dit te verwezenlijken moeten wij BIJ (blauw) paar in origineel in een paar van Ta veranderen. Deze plasmide werd geïsoleerdv van een normale spanning van E.coli die vanaf opeenvolgingen GATC méthyleert. De methylgroepen zijn vermeld in geel. De volgende stappen worden uitgevoerd om dit te verwezenlijken:

• Verwarm de plasmide om zijn bundels te scheiden.
• Wij ontharden dan mutagene inleidingen die het codon TTC, of zijn omgekeerde aanvulling, GAA bevatten. De veranderde basis in elke inleiding is vermeld in roze.
• Wij voeren dan een paar rondes van PCR (ongeveer 8) met de mutagene inleidingen uit om de plasmide met het veranderde codon te vergroten. Wij gebruiken een hitte - de stabiele polymerase van DNA, zoals polymerase Pfu, om fouten te minimaliseren in het kopiëren van de plasmide.
• Wij behandelen dan DNA in de PCR reactie met DpnI om geméthyleerde wild-typeDNA te verteren. Aangezien het PCR product in vitro werd gemaakt, wordt het niet geméthyleerd en niet gesneden. Ten slotte zetten wij de cellen van E. coli met behandelde DNA om. In principe, slechts overleeft veranderde DNA aan transformatie. Dit wordt gecontroleerd door plasmideDNA van verscheidene klonen te rangschikken.



Factoren voor Succesvolle PCR

Kan niet Uw Probleem vinden? Zorg ervoor u het PCR Forum voor PCR het oplossen van problemen en oplossingen aan gemeenschappelijke problemen ziet. U kunt vragen aan andere onderzoekers ook posten door eenvoudig dan op Post Nieuwe Draad of het vraag hieronder teken te registreren en te klikken!

PCR Artikelen

PCR het Oplossen van problemen

PCR Geschiedenis

PCR het Ontwerp van de Inleiding

De Uitbreiding van de inleiding

PCR Enzymen

Factoren voor Succesvolle PCR

PCR Gebaseerde Plaats Geleide Mutagenese

Analyse van PCR Reacties

Echt - tijdPCR

De Onderwerpen van het Forum van de mutagenese

Draden
De Titel/de Affiche van de draad	Laatste Post	Antwoorden	Meningen
gelieve te helpen me-basisinformatie over plaats-geleide mutagenesePCR trypsine	06:21 van 05-01-2008 PM door kmunson779“	1	145
plaats geleide mutagenese die Invitrogen Genetailor gebruikt satishreddy27	03:34 van 06-19-2007 PM door satishreddy27“	0	526

U moet NOW REGISTREREN om een hulpvraag in het Forum van de Elektroforese van het Gel te posten. Login nu als u reeds hebt geregistreerd.

PCR de Onderwerpen van het Forum

Rechts-pcr in rechts-PCR, wih bandf van mijn belang wij ook twee extra lichte band.how werden kan ik mijn result.sh verbeteren ould ik vermindert mijn inleidingsconcentratie? indien of ik…
GSTP1 promotor - niet specifiek product Hello, heb ik een probleem met interpretatie van PCR producten’ lengte. De lengte van een opeenvolging van malplaatjeDNA (menselijke promotor GSTP1) is over 1650bp…
Nieuw aan PCR technieken Hello daar! mijn naam is 'durft en ik doe mijn niet-gegradueerdenproject op Genetische karakterisering van kippen met mtDNA. Ik zou werkelijk… waarderen
PCR de Gids van het Oplossen van problemen hallo iedereen, proberen wij aan opstelling een PCR Gids van het Oplossen van problemen. Gelieve te helpen door gemeenschappelijke problemen en hun oplossingen hier te posten. dank: notworthy:
PCR verontreiniging heb ik een probleem tijdens PCR programma. voeg templete DNA, dNTP, inleiding, polymerase, etc.to EP toebuis. dan vergat ik om het oliÃen u-u toe te voegen: mellow: zo. I…
PCR, onvolledige producten? Hello, gebruik ik iproof hoog-fedilitypolymerase om een fragment van DNA 6kb in grootte van een genoom te vergroten. Met Taq die maar iproof… bijna onmogelijk is
PCR Remming door DNA HELLO ALLEN! Ik heb een groot pcr probleem. Ik probeer om pcr te leiden gebruikend plasmideDNA ik het gebruiken van een uitrusting van Qiagen Midi zuiverde. Ik gebruik deze DNA om te maken…
plz hulp in deze vragen 1-welk dNTP doe voor PCR? 2 - Mijn PCR steekproeven blijven bij de bovenkant van het agarose gel terwijl de ladder een volledige looppas toonde?
Probleem re-PCR Hello iedereen. Ik probeer om een gen te vergroten, en tezelfdertijd puntveranderingen te introduceren, om de spijsvertering met een specifiek enzym van toe te laten…
Het Verlies van het volume tijdens PCR?!! Zo stel ik mijn PCR buizen voor 30 cycli met een volume van 15ul in werking. Strak afgedekt allen, maar ik beëindig omhoog met 8-10 ulvolume na PCR. Ik probeerde spinnend hen onderaan…
U moet NOW REGISTREREN om een vraag in het PCR Forum te posten door hierte klikken.

Bekijk Meer PCR besprekingen en oplossen van problemen in: PCR Forum

Ontkenning/Termijnen van de Dienst & Het Beleid van de privacy& ©2005-2007 moleculair Station.com, Alle voorgebe*houde rechten.

Verzend deze pagina naar een vriend