Onthaal aan Moleculaire Post!

U moet registreren alvorens u op onze forums kunt posten of onze geavanceerde eigenschappen gebruiken. Register nu! Zijn Vrij en Snel!

Reeds geregistreerd? Login nu hieronder.

De Naam van de gebruiker:

Wachtwoord:

Herinner me?

Vergat reeds geregistreerd en uw wachtwoord? Klik hieronder om het terug te krijgen.

Krijg Verloren Wachtwoord terug

Treed nu toe - het is snel en vrij!

De moleculaire Post is overal het grootste netwerk van onderzoekers, wetenschappers en wetenschapsminnaars!

De recente Posten van het Forum

PCR Protocollen	PCR Bio-informatica en Gegevensbestanden	Leer over PCR	PCR Uitrustingen en Producten	PCR Forum	PCR Boeken

Analyse van PCR Producten

Agarose de Analyse van de Elektroforese van het Gel van PCR Producten

Aan en analyseer en los PCR snel gemakkelijk producten op, kan een 3% NuSieve gebruikte agarose GTG (FMC Bioproducts, Rockland, ME) en 1% Seakem GTG agarose (FMC Bioproducts) gel zijn dat in of TBE (89 mm tris-Boraat, 2 mmEDTA) in werking wordt gesteld of TAE (40 mm tris-Acetate, 2 mmEDTA, pH ong. 8.5). De vastbesloten banden van DNA worden ontdekt door de gelen met of ong. 0.5 μg/mL van ethidium bromide te bevlekken, door met water of SYBR® Groene 1 (Moleculair Inc. van Sondes, Eugene, OF) destaining gevolgd en die definitief onder UVverlichting wordt gefotografeerd. Gebruik een basepair 123 (bp) of 1 kilobasepair (kbp) ladder als geschikte teller voor grootteramingen van de producten.

Andere Analytische Methodes om PCR Producten te analyseren

Er zijn een verscheidenheid van andere opsporingsmethodes beschikbaar voor PCR productanalyse, zoals bromide-ethidium 8-10% polyacrylamidegelen die in buffer TBE in werking worden gesteld, Zuidelijke gelen of punt/vlekken bevlektde, die en leidt goed het rangschikken, HPLC analyse, en het gebruik van 96 microplates, om enkelen te noemen subcloning. Omgekeerde combineert de punt-vlek methode PCR versterking met nonradioactive opsporing. De introductie van fluorescente kleurstoffen aan PCR, samen met een geschikt instrument voor getalsmatige weergave in real time, online van PCR producten tijdens versterking heeft geleid tot de ontwikkeling van kinetische PCR of kwantitatieve PCR. De kwantitatieve PCR (QPC) maatregelenPCR productaccumulatie tijdens de exponentiële fase van de reactie en vóór versterking wordt kwetsbaar, d.w.z., wanneer de reagentia beperkt worden. Het ABI Prisma 7700 (Toegepaste Biosystemen) en LightCycler (Roche Moleculaire Biochemische producten, Mannheim, Duitsland) zijn geïntegreerdew fluorescente opsporingsapparaten die fluorescentie onophoudelijk controlerend of of eens per cyclus toestaan. Deze instrumenten kunnen PCR producten door hun het smelten kenmerken ook kenmerken, b.v., om singlebaseveranderingen van een wild-typeopeenvolging te onderscheiden. Onlangs ontworpen Mx4000™ seinen Kwantitatief PCR Systeem (Strategene, La Jolla, CA) simultaan over kunnen gegevens voor veelvoudige fluorescente analyses QPCR in real time produceren en analyseren.