huis > de microbiologie > sterilisatie > index.php

U moet registreren alvorens u op onze forums kunt posten of onze geavanceerde eigenschappen gebruiken. Register nu! Zijn Vrij en Snel!
Reeds geregistreerd? Login nu hieronder.
Vergat reeds geregistreerd en uw wachtwoord? Klik hieronder om het terug te krijgen.
Krijg Verloren Wachtwoord terug
Treed nu toe - het is snel en vrij!
De moleculaire Post is overal het grootste netwerk van onderzoekers, wetenschappers en wetenschapsminnaars!
Het onderzoek is het proces om stegen uit te gaan om te zien of zijn zij blind. ~Marston vermindert
Inhoudstafel:
De Onderwerpen van het Oplossen van problemen en van het Forum van de sterilisatie
De verwante Artikelen van de Microbiologie
Het Bulletin van de microbiologie
Â
De sterilisatie wordt gedefiniÃërd als vernietiging van alle vormen van het leven. Het kan door diverse agenten worden uitgevoerd. Zoals toegepast op de praktische vereisten van het bacteriologische laboratorium zijn veel van die agenten zoals elektriciteit, zonlicht, enz., van weinig waarde en zijn beperkt in hun toepassingen; anderen zijn zo goed geschikt voor bijzondere doeleinden dat hun gebruik volledig bijna beperkt tot dergelijke toepassingen is. De gebruikte principemethodes steriliseren met autoclaaf het vaakst (hitte, stoom en druk - een combinatie) en chemisch, nochtans is steriliseren met autoclaaf het meest efficiënt indien behoorlijk uitgevoerd
Â
Er zijn twee belangrijke methodes van sterilisatie.
A)
1) de Geconcentreerde oplossingen vernietigen micro-organismen door water van hun cellen (plasmolyse), b.v., in het behoud van voedsel door geconcentreerde zout of suikeroplossingen terug te trekken. De micro-organismen gebruikelijk aan een geconcentreerd voedend substraat kunnen aan plasmoplysis (het barsten van de cel) lijden indien geplaatst in een minder geconcentreerd middel. In of geval, als zij geleidelijk aan aan de veranderende voorwaarden worden onderworpen, wordt de dood vertraagd of verhinderd.
2) de Opdroging is vernietigend aan vele microben, espe cially die die geen sporen vormen. Bijvoorbeeld, Ps. Radicicola is zeer gevoelig voor opdroging op het gewone dekking-glas of op katoen.
Â
3).
Dit wordt gewoonlijk gebruikt aangezien a brander in het laboratorium bunsen, nochtans zijn er verscheidene verwarmingsmethoden:
1. In sterilisatie in een Naakte Vlam,
(a) het eenvoudigste middel om een metaalinstrument te steriliseren moet het aan rode ness in een vlam verwarmen. Deze methode wordt altijd goedgekeurd voor ster ilizing platina, koper, enz., draden en ijzer en nikkelspatels, forceps, enz.
Een platinanaald zou altijd zorgvuldig droog moeten zijn vóór sterilisatie, door het dichtbij de vlam te houden. Dit vermijdt sputterend, wat micro-organismen verspreidt, vooral als het vochtige materiaal, b.v., het vet of de proteïne, op de naald onmiddellijk duw in de vlam zijn.
(b) een instrument kan worden gesteriliseerd door het te vlammen, d.w.z., door het door een hete vlam snel over te gaan. Deze methode is nuttig voor instrumenten, enz., hebben opgepoetstd oppervlakten verstoken van vouwen waarin de micro-organismen aan vernietiging zouden kunnen ontsnappen, b.v., messen, glasstaven, handvatten van platinanaalden, monden van reageerbuizen, flessen, pipetten, enz.
(c) de diepe wonden worden door cautery met een instrument gesteriliseerd dat aan een saaie gloeihitte wordt verwarmd.
Â
2.
In geval van nood, kleine instrumenten, naalden, enz., kan worden gesteriliseerd door hen in ether of absolute alcohol en na verwijdering onder te dompelen die de adherente vloeistof aansteekt en het toestaat om van de oppervlakte van de instrumenten te branden. Herhaal het proces. Men kan veilig dan veronderstellen dat het zo behandelde apparaat steriel is.
3.
De de filterkaarsen worden van het porselein gesteriliseerd door hen aan witte hitte in te verwarmen dempen - oven. Deze methode van sterilisatie kan op porseleinfilters met metaalmontage, zoals filters worden toegepast niet Berkefeld.
De vernietiging van autopsied dieren en geaccumuleerd afval van het laboratorium wordt ook het best op deze wijze verwezenlijkt.
Â
4.
De blootstelling aan hete lucht is de gebruikelijke methode om al glaswerk, instrumenten met metaalhandvatten, enz. te steriliseren, maar het is niet geschikt voor organische subhoudingen, met uitzondering van wol, katoen en document.
Om efficiënte sterilisatie, het voorbereide glaswerk te verzekeren, moet enz., in een gas of een elektrisch verwarmde oven die (een thermometer bevatten die meer dan 200 C. registreren) worden geplaatst de waarvan temperatuur bij ongeveer 150 C. één uur, of 180 C. tien minuten wordt gehandhaafd. De oven moet om neer aan 60 C. te koelen alvorens de deur te openen om het breken van glaswerk te vermijden door koude luchtstromen worden toegestaan. Het katoen, de wol, en het document zijn lichtjes geschroeid bij deze temperatuur,
De apparaten moeten absoluut schoon en droog zijn alvorens wordt gesteriliseerd.
Â
4.
De sterilisatie door vochtige hitte kan in één van vier manieren worden uitgevoerd:
Â
1.
Sommige substanties die als cultuurmedia worden gebruikt, die rijk aan vluchtige stof of anders chemisch onstabiele substanties, kunnen aan 100 C. zonder een duidelijke wijziging (b.v., coagulatie) zijn en in zekere mate een destruc tion van hun eigenschappen worden verwarmd niet; bloed serum, bijvoorbeeld.
Pasteur toonde aan dat dergelijke media betere ster kunnen zijn ilized door hen bij een lage temperatuur (55-60 C.) dan bij op hoge temperatuur (70 C. of zelfs 100 C.) voor een korte tijd lange tijd te verwarmen. In dit proces, wordt de hitte niet direct toegepast ', in het algemeen. De controle van de temperatuur wordt doorgaans door middel van water verwezenlijkt dat aan de gewenste graad wordt verwarmd.
Het verlengde verwarmen bij een lage temperatuur vormt pasteurisatie. In de praktijk, echter, vindt men dat om alle organismen te doden de pasteurisatie Com moet zijn bined met de methode van het onderbroken verwarmen die door Tyndall wordt bedacht. De eiwithoudende media die aan de methode Tyndall worden onderworpen moeten definitief bij 37 C. achtenveertig uren worden uitgebroed om alle specimens te elimineren die verontreiniging tonen.
2.
(a) het ononderbroken Verwarmen. Het water bij 100 C. vernietigt de vegetatieve vormen van bacteriën bijna ogenblikkelijk, en de sporen binnen van vijf tot vijftien minuten doorgaans, hoewel vele sporen van bestand soorten niet door van verscheidene uren bij 100 C. Water te verwarmen verdachten van rioleringsverontreiniging worden gedood kunnen zo voor het drinken doeleinden veilig worden gemaakt eenvoudig door voor een paar notulen te koken.
Deze methode is van toepassing op metaalinstrumenten, spuiten, rubberkurken, rubber en glasbuizenstelsel, en andere kleine apparaten.
(b) het onderbroken Verwarmen. (Methode Tyndall.) Tyndall merkte op dat bepaalde bestand vormen die in een infusie worden gevonden die van hooi wordt gemaakt niet door de infusie bij 100 C. te verwarmen, eens, zelfs wanneer de temperatuur voor een verlengde periode werd ondersteund, nog door het voor een korte tijd op drie opeenvolgende dagen werden vernietigd te koken alle het leven organismen werden vernietigd. Zijn theorie was dat door te verwarmen bij 100 C., de vege tative vormen maar niet werden de sporen gedood. De laatstgenoemden ontkiemen aangezien de vloeistof koelt en tijdens het tweede verwarmen gekoeld. Een paar sporen, echter, escape DE struction bij het tweede verwarmen;
deze zullen ontkiemd zijn tegen de tijd dat het derde verwarmen gepast is. Na het derde verwarmen wordt de sterilisatie verwezenlijkt.
De nu gegeven verklaring, echter, is dat me ance van micro-organismen geleidelijk aan wordt verminderd onder de invloed van herhaalde verwarming verzet tegen. Dit principe om op drie opeenvolgende dagen te verwarmen, een te steriliseren middel is nu genoemd geworden methode Tyndall van sterilisatie. In het algemeen wordt de laboratoriumpraktijk, stoom gebruikt in plaats van water bij 100. , maar dit vergt speciale apparaten, terwijl het water zich gemakkelijk aan de dichtbije middelen leent.
Â
De fysieke aard van het middel, de buitengewone weerstand van de sporen van bepaalde soorten bacteriën of allebei in combinatie, kan dat dit het intermitterende verwarmen over een langere tijdspanne, d.w.z., vier, vijf, zes wordt gedragen, enz., dagen in successie voor het zelfde of een langere periode elke keer vereisen, of dat de periode tussen inter mittent verwarming van vierentwintig uren aan achtenveertig uren wordt verlengd.
De methode van Tyndall is waardevol in zoverre dat de media van gevoelige samenstelling kunnen worden gesteriliseerd zonder ongewenste veranderingen te veroorzaken, zoals vaak wordt geproduceerd door hoge tempera ture van autoclav.
3. Sterilisatie in Stromende Stoom bij 100 C. Continuous of Onderbroken, (a) het Ononderbroken Verwarmen. Het eenvoudige koken of de blootstelling aan stoom bij 100 C., alhoewel de blootstelling wordt verlengd, is geen betrouwbare methode van sterilisatie. Wanneer de micro-organismen droog zijn geweest, wordt hun weerstand tegen de gevolgen van hitte veel verbeterd, en vooral is dit het geval wanneer zij met substanties van een colloïdale aard worden gemengd. Bepaalde bestand vormen van protoplasma die als sporen worden bekend kunnen niet door één worden vernietigd verwarmend aan 100 C., zelfs wanneer de temperatuur voor sev eral notulen is gehandhaafd.
(b) het onderbroken Verwarmen. Algemeen gebruik voor sterilization van media.
Dit principe van sterilisatie geavanceerd door Tyndall vindt zijn breedste toepassing in het bacteriologische werk met het gebruik van stromende stoom. De stoom van de hoge druk kan aan goed voordeel worden gebruikt als een het centrale verwarmen post beschikbaar is. De sterilisator Arnold maakt gebruik van stoom voor het sterilisatieprocédé en leent zich gemakkelijk aan zowel de ononderbroken als onderbroken methode.
4. Sterilisatie door Oververhitte Stoom (onder druk en daarom boven 100 C.). Water, spuiten, de chirurgische vullingen, beddegoed, de India-rubberapparaten, filters, de oude culturen, de cultuurmedia, enz., niet die door hoge termperatures wordt de het de het verwond, kunnen sneller worden gesteriliseerd door in stoom onder druk te verwarmen.
De blootstelling aan stoom bij een temperatuur van 115 C. twintig minuten volstaat in de meeste gevallen om sterilisatie te verzekeren,
Â
Maar sommige media, aardappel bijvoorbeeld, vereisen een temperatuur van 120 C. tien tot vijftien minuten. Men realiseert nu dat de media die aan dit op hoge temperatuur worden onderworpen hydrolytische veranderingen ondergaan die hen voor de cultuur van gevoeligere micro-organismen ongeschikt maken. De sterilisatie in de oververhitte stoom wordt gedragen in een speciaal apparaat genoemd een autoclaaf, die zo te lopen door directe of indirecte stoom kan worden geconstrueerd. De laatstgenoemde is wenselijker voor de sterilisatie van media.
Â
5)
Het licht schijnt om te handelen door krachtige chemische kiemdodend middelen, waarschijnlijk te produceren organisch per oxyden, in het middel dat de bacteriën omringt. Bepaalde stralen van licht, blauw, violet en het ultraviolet zijn in het bijzonder vernietigend aan levende cellen. Het is aan deze stralen dat het zonlicht zijn het desinfecteren actie verschuldigd is. Het praktische gebruik is van de ultraviolette stralen in watersterilisatie door de kuiper-Hewitt lamp die van de kwikdamp aan te wenden een kwarts in plaats van een glasbuis heeft gemaakt, aangezien deze stralen niet door glas overgaan.
6)
De sterilisatie kan door de filtratie van gassen of vloeistoffen door materialen worden uitgevoerd die micro-organismen zullen behouden.
Het beste voorbeeld van de filtratie van gassen is het gebruik van katoenen stoppen in flessen en buizen die micro-organismen bevatten. Het katoen is zal genoeg poreus om de noodzakelijke uitwisseling van gassen toe te staan maar noch stof noch buitenlandse micro-organismen om toestaan binnen te gaan. De sterilisatie van lucht of andere gassen zou als vooraan 3d door katoen van de dikte van de katoenen laag en ook van de kracht afhangen die werd uitgeoefend.
Bepaalde vloeistoffen die in het bacteriologische werk worden gebruikt kunnen zelfs aan een gematigde hoeveelheid hitte worden onderworpen niet zonder hun aard diep te veranderen. om zulk een vloeibare steriel te maken, wordt het overgegaan door een cilindrisch vat, aan de ene kant als een reageerbuis gesloten, en dat of van poreus „koekjes“ porselein, hard gebrand en unglazed (het landfilter van de Kamer) wordt gemaakt of van kieselguhr, een fijne diatomaceous aarde (filter Berkefeld) en genoemd een kaars of een kaars.
De poriën van de fijnere filters zijn zo klein dat terwijl de vloeistoffen, en de vaste lichamen in oplossing door overgaan, de micro-organismen en de vloeibare passen door in een kiemvrije voorwaarde worden behouden.
Â
Pasteur in zijn vroeg werk gebruikte pleisterplaten als filtrerend middel, maar als resultaat van de onderzoek van Chamberland, vervangt het poreuze porselein nu pleister. Zal het fijn verscheurde asbest dat strak in een smeltkroes Gooch wordt ingepakt als bacteriële filter dienen op voorwaarde dat de laag van asbest voldoende dik is. Het tarief van filtratie is gewoonlijk zeer langzaam omdat de poriën van de filter zo zeer minuut zijn; daarom om dit nadeel te overwinnen of de aspiratie of de druk zijn over het algemeen aangewend om het proces te verhaasten. Deze methode kan filterable organismen niet uitsluiten.
Â
Â
7)
In één van de recentere methodes die voor de voorbereiding van vaccins tegen hondsdolheid worden bedacht wordt het vaccin voorbereid door het virus (ruggemerg van een dol konijn) te plaatsen in een collodion zak en het te dialyseren in het runnen van gedistilleerd water. Het het leven virus wordt vernietigd, nog zijn zijn immuniserende eigenschappen behouden intact. Vrij kan het tegenovergestelde effect onder wat worden verkregen welke verschillende omstandigheden. Als een collodion zak die een opschorting van een pathogeen organisme bevat in de lichaamsholte van een vatbaar dier wordt geplaatst bloeien de organismen binnen de zak, wordt gevoed door de lichaamsvloeistoffen die door het semipermeabele membraan verspreiden.
Het GOMMEN, J.G.: Hondsdolheid Hydrophobia. Een studie van vast virus, bepaling van M.L.D., vaccinbehandeling (Hogyes, Pasteur, en gedialyseerd vaccin), en immuniteitstests. Dagboek van Besmettelijke Ziekten, Volume XIV (1914), blz. 33-52.
8)
De verbrijzeling of het daadwerkelijke verpletteren van de microbiële cellen worden zijn toevlucht genomen tot voor het aantonen intracellular enzymen.
Â
B.
1)
De sterilisatie door dis infectants heeft maar beperkt gebruik in het bacteriologische werk. De hoeveelheid ontsmettingsmiddel noodzakelijk om bestaande organismen in een voedend middel te vernietigen is groter dan het bedrag noodzakelijk om vermenigvuldiging van een organisme te remmen dat later als entstof kan worden gebruikt; het middel wordt daarom gemaakt nutteloos.
Als voorbeeld, kwikchloride 1-1000, 1.5% formaline, 5% fenol, 2% samenstellingsoplossing van cresol, enz., zijn goedkoop in veel gevallen en aanpasbaar. De tint van iodin is waardevol voor het schilderen van wonden.
De gemeenschappelijke zepen, en meer in het bijzonder de groene zeep, hebben een benarde toestand kiemdodende waarde, en dit samen met hun oplosbare actie op vetten en proteïne, en het mechanische reinigen die hun gebruik begeleidt, rechtvaardigt de toewijzing van hen een belangrijke plaats onder de chemische ontsmettingsmiddelen.
De ontsmettingsmiddelen die voor het steriliseren van de huid vóór col. pus, bloed, enz. die, van het het leven onderwerp worden gebruikt moeten zorgvuldig worden verwijderd door het deel met alcohol goed te wassen alvorens materiaal te verzamelen, anders de aanwezigheid van het ontsmettingsmiddel zich materieel zouden mengen in de verdere groei van organismen in de cultuur lecting.
3. De ontsmettingsmiddelen worden ook toegevoegd aan steriele filtraten die niet meer als cultuurmedia worden vereist. Met deze bedoeling een kleine hoeveelheid van één of ander ontsmettingsmiddel (zoals thymol of kamfer) dat zonder chemische actie betreffende de constituenten van de vloeistof wordt geselecteerd is.
Een hoeveelheid carbol (0.5%) wordt of ander chemisch product vaak toegevoegd aan vaccins, bac termijnen, serums, enz., voor bewarende doeleinden.
4. De ontsmettingsmiddelen worden soms gebruikt om een cultuur te steriliseren wanneer de producten van microorgansims onder investigation zijn. De chloroform, de ether, het toluol, de olie van knoflook of de mosterd, enz., die daarna door verdamping kunnen worden afgeslagen, zijn in dit verband onder het nuttigst.
Â
2)
De chemische reagentia zoals behoren tot de klasse die als ontsmettingsmiddelen wordt bekend, d.w.z., substanties die de groei van remmen, maar vernietigen het geen bacteriële leven, zijn duidelijk nutteloos.
De monden van reageerbuizen, gistingsbuizen, pipetten, enz., zijn doorgaans gestopt met katoen vóór sterilisatie. Met deze bedoeling is het katoen ideaal aangezien het, dient aan filter uit micro-organismen van de lucht goedkoop en aanpasbaar is, terwijl ing de klaar verspreiding van gassen toesta, en nadat zodra het kan worden gebrand gebruikte.
Het document (gewone krant) kan worden gebruikt om glaswaren als Petrischalen, diep-cultuurschotels, pipetten, enz. te verpakken, die men wenst om in een steriele voorwaarde op te slaan en waarvoor het katoen niet aanpasbaar is.
Het glaswerk wordt voor het vernietigen van micro-organismen huidig op zijn oppervlakte en in of op het katoen gesteriliseerd of het document dat respectievelijk voor het stoppen of het verpakken wordt gebruikt. Na sterilisatie dienen het katoen en het document om micro- organismen te verhinderen het ingaan van en de steriele werktuigen te vervuilen.
Droog hitte, niet niettemin als efficiënt een kiemtorpedojager aangezien de vochtige hitte, meer aanpasbaar is aan de sterilisatie van lege cultuurflessen, pipetten en ander glaswerk. Hetelucht sterilization niet alleen verwezenlijkt de sterilisatie van de glaswaren, de katoenen stoppen, enz., maar de „reeksen“ de stoppen zodat zij met grotere faciliteit kunnen worden behandeld.
Al glaswerk moet absoluut schoon en droog zijn of sporen van alcohol bevatten slechts alvorens voor sterilisatie voorbereidingen te treffen; anders kan de sterilisatie worden verwezenlijkt niet. Als nadenk is de bekwame vochtigheid aanwezig in reageerbuizen, flessen, enz., zal het niet tijdens het heteluchtsterilisatieprocédé verdampen, en het is zeer duidelijk dat de temperatuur van dergelijke vochtige gedeelten van het glaswerk niet zal bereiken of bij leastwill 100 C. niet overschrijden.
Richtingen. De reageerbuizen en de flessen zijn gestopt met katoen. De gewone forceps wordt met deze bedoeling gebruikt. (De het glasstaaf van A kan ook worden gebruikt.) wordt het kleine stuk van A van katoen begrepen op de rand met de forceps en in de mond van de reageerbuis opgenomen. De stoppen zouden in reageerbuizen van 3 tot 4 cms., en van 3 tot 5 cms moeten ontwerpen. In de hals van flessen, volgens de grootte van de fles. Slechts zou een hoeveelheid katoen uit de mond moeten ontwerpen die volstaat om het uitgaande gedraaide gedeelte (lip) de reageerbuizen of flessen tegen stof te beschermen.
„Kerstmis-Boom“ een effect moet worden vermeden. De stoppen zouden niet zo strak moeten zijn om met moeilijkheid worden verwijderd, noch geen weerstand tegen verwijdering zo los aan te bieden. Wat ervaring zal voldoende zijn om het bedrag van te gebruiken katoen en de stevigheid aan te tonen waarmee de stop zou moeten passen.
De katoenen stoppen voor reageerbuizen, flessen, enz., kunnen worden gerold. Dit soort stop is stabieler en kan meerdere keren worden gebruikt. Heb de instructeur de methode aantonen om te rollen.
Voor heteluchtsterilisatie, kunnen de reageerbuizen die met katoen worden gestopt in grote bundels worden gebonden of in draadmanden (nooit in agaatkoppen) omhoog worden geplaatst, katoenen stoppen. Een paar reageerbuizen zouden niet in een grote draad-mand of in draad een test-buis rek moeten worden geplaatst, aangezien het noodzakelijk is om ruimte in de heteluchtsterilisator te bezuinigen.
De petrischalen zijn afzonderlijk verpakt en samengebonden in document in reeksen van drie, maakt Één blad van krant vier documenten van juiste grootte voor het verpakken van Petrischalen en is goedkoop.
Drie of meer Petrischalen kunnen samen worden verpakt als allen moeten tezelfdertijd worden gebruikt. Merk elk ronduit met het bureauaantal.
Pipetten. Plaats een stuk van katoen in de bodem van een reageerbuis, stop de bovenkant slechts van de pipet met katoen (niet te strak}, het weggaan maar weinig van het katoen dat uit ontwerpt. Verpak een klein gedeelte van katoen rond het lagere derde van de pipet, neem de pipet in de reageerbuis op tot het uiteinde op het katoen rust, makend het katoen verpakkend als stop voor de buis dienen.
Verpak pipetten die zo in document (één laag) worden voorbereid en band en merk hen ronduit met het bureauaantal.
Een behandeld metaalgeval wordt vaak voor te steriliseren holdingspipetten gebruikt. Het hogere eind van de pipetten is gestopt met katoen, de pipet die in het geval wordt opgenomen, het open eind van het geval dat met katoen wordt gestopt, en de vervangen dekking. (Deze laatstgenoemde methode wordt niet geadviseerd voor de nieuwe student, aangezien de noodzaak van zorgvuldige techniek in het verwijderen van een steriele pipet uit het geval zonder die te vervuilen die moeilijk om op hem blijven) is indruk te maken op.
De buizen van de gisting zijn gestopt met katoen zoals die voor reageerbuizen worden geleid; de katoenen stop zou niet in de bol moeten ontwerpen.
De diepe cultuurschotels zijn afzonderlijk verpakt in document zoals die voor Petrischalen worden geleid.
De dia's en de dekking-glazen worden over het algemeen gesteriliseerd door te vlammen, maar slechts zoals nodig.
Â
Â
| Draden | |||
| De Titel/de Affiche van de draad | Laatste Post | Antwoorden | Meningen |
| 09-06-2006 11:02 AM | 3 | 784 | |
Onderzoek en de Folder van de Producten en van de Verkopers van het Laboratorium - die door onderwerp wordt georganiseerd. De bedrijven, maken een lijst van Uw producten en bedrijf kostenloos in de productfolder door Uw Bedrijf hier Te registreren!
Ontkenning/Termijnen van de Dienst & Het Beleid van de privacy& ©2005-2007 moleculair Station.com, Alle voorgebe*houde rechten.