Bio-informatica, Protocollen, RNA EiwitProteomics van DNA
huis > DNA > sap-garnaal-alkalisch-phosphatase-protocol > index.php
huis > DNA > sap-garnaal-alkalisch-phosphatase-protocol > index.php
 |
|---|
U moet registreren alvorens u op onze forums kunt posten of onze geavanceerde eigenschappen gebruiken. Register nu! Zijn Vrij en Snel!
Reeds geregistreerd? Login nu hieronder.
Vergat reeds geregistreerd en uw wachtwoord? Klik hieronder om het terug te krijgen.
Krijg Verloren Wachtwoord terug
Treed nu toe - het is snel en vrij!
De moleculaire Post is overal het grootste netwerk van onderzoekers, wetenschappers en wetenschapsminnaars!
Het droevigste aspect van het leven op dit ogenblik is dat de wetenschap kennis sneller vergaart dan de maatschappij wijsheid verzamelt. ~Isaac Asimov, het Boek van Isaac Asimov's van Wetenschap en de Citaten van de Aard, 1988
Zijn phosphatase of SAP van garnalen alkalische, een enzym dat dephosphorylation van 5' fosfaten van einden van nucleic zuur dephosphorylating RNA of van DNA katalyseert.
Merk op dat PCR de producten en ook inleidingen geen phosphatases op hun vrije einden hebben, en daarom phosphorylated moeten zijn voorafgaand aan het klonen als u een de-phosphorylated vector gaat gebruiken!
SAP is onstabiele temperatuur is daarom u kan dit enzym (in vergelijking met CIP!) gemakkelijk desactiveren. SAP wordt gedesactiveerd met water 65°C - badincubatie 15 minuten.
U krijgt vrijwel geen reactie. SAP vereist 10mM minstens MgCl2 (maar de optimale enzymactiviteit van garnalen alkalische phosphatase is bij 20-25mM MgCl2) en het werkt goed bij pH 8.0.
Dephosphorylate 1 pmol van de einden van DNA (2.5 ug van 3 Kb plasmide), voor 1hr bij 37°C moet u:
0.1 eenheden van SAP voor 5 ' overhangend gedeeltes, 0.2 eenheden voor bot en 0.5 eenheden voor 3 ' hangen over.
Het enzym komt 1 eenheid per ul, dus om veilig te zijn kunt u eenheden approx.0.5 voor 2 ug gebruiken.
UITEINDEN: Het Enzym van SAP kan rechtstreeks aan beperkingssamenvatting worden toegevoegd! Aldus kan het geheel dat met inbegrip van spijsvertering van het beperkingsenzym, dephosphorylation, eind-etiketteert enzyminactivering, afbinding of 5 te werk gaat de' in één enkele buis worden uitgevoerd door de aangewezen reagentia enkel toe te voegen. Dit zal u toestaan om tijd te besparen en efficiënt te zijn!
Bespreek en post vragen over het in het Alkalische Phosphatase van Garnalen en Klonende Forum van DNA!
De Elektroforese van het Gel van DNA
De Spijsvertering van het Enzym van de beperking - allen u moet het weten!
Het Protocol van de Isolatie van DNA van Genomic
De Isolatie van DNA van Baceteria
De Transformatie van DNA - bevat Geschiedenis van DNA
Vind andere protocollen bij onze externe het middelfolder van de Protocollen van DNA of zie onze protocollen van DNA.
Verwant:
De Protocollen van DNA Microarray
De Bio-informatica van DNA van het bezoek.
Ontkenning/Termijnen van de Dienst & Het Beleid van de privacy& ©2005-2007 moleculair Station.com, Alle voorgebe*houde rechten.
Verzend deze pagina naar een vriend
![[أربيك]](http://www.molecularstation.com/translate/images/flag_ar.gif){kind=small}
