Stroom Cytometry

Cytometry de stroom (ook geroepen FCM) is een moleculaire biologiemethode die algemeen wordt gebruikt om, snel cellen of zelfs microscopische deeltjes te tellen onderzoeken analyseren en te sorteren die in vloeistof worden opgeschort. Cytometers van de stroom staan een gelijktijdige multiparametric analyse van de fysieke en/of chemische kenmerken van enige cellen of deeltjes toe die voorbij een optisch en/of elektronisch opsporingsapparaat stromen, in een vloeibare stroom gebruikend een straal van laserlicht.

De cytometry termijn komt uit de Griekse woorden voor (metry) meting, en cel die (cyto) voort „cytometry stroom“ de meting van enige cellen geeft aangezien zij voorbij een detector stromen.

De stroom of cel het sorteren zijn een verder functioneel cytometry vermogen van stroom die de scheiding van types van cellen toestaat door het gebruik van elektro of mechanische krachten om bevolking van cellen met één of meer te verzamelen fysiek of chemisch kenmerk dat door de gebruiker wordt geplaatst.

De Toepassingen van Cytometry van de stroom

Cytometry de stroom wordt algemeen gebruikt in de analyse van de celcyclus, opsporing en analyse van apoptosis of necrose, cel het sorteren, het antigeenopsporing van de celoppervlakte voor immunologie, en de analyse van de stamcel.

De Metingen van Cytometry van de stroom

De stroom Cytomers kan worden gebruikt om de volgende parameters, afhankelijk van de fluorophore machine, en andere te meten:

• volume van cellen
• morfologische kenmerken van cellen
• de antigenen van de celoppervlakte (Cluster van differentiatie (CD) tellers)
• opsporing van celpigment (d.w.z. chlorofyl of phycoerythrin)
• apoptosis (getalsmatige weergave, meting van de degradatie van DNA, mitochondrial membraanpotentieel, doordringbaarheidsveranderingen, caspaseactiviteit)
• de analyses van de celuitvoerbaarheid
• beoordeel DNA (b.v. in de analyse van de celcyclus, celkinetica, proliferatie)
• beoordeel RNA
• chromosomale analyse en het sorteren (voor de bibliotheekbouw of chromosoom die van DNA schilderen)
• beoordeel voor eiwituitdrukking en localisatie
• transgenic producten in vivo, in het bijzonder de Groene fluorescente eiwit of verwante fluorescente proteïnen
• enzymatische activiteit
• en veel andere parameters

Hoe het Werk van Cytometers van de Stroom?

Een lichtstraal (gewoonlijk laserlicht) wordt van één enkele golflengte geleid op een hydrodynamisch geconcentreerde stroom van vloeistof. Een aantal detectors worden gericht op het punt waar de stroom door de lichtstraal overgaat; overeenkomstig de lichtstraal (Voorwaartse Verspreiding of FSC) en verscheidene loodlijn aan het (ZijVerspreiding (SSC) en één of meerdere fluorescente detectors). Elk opgeschort deeltje dat door de straal overgaat verspreidt het licht op één of andere manier, en de fluorescente chemische producten die in het deeltje worden gevonden of in bijlage aan het deeltje kunnen in het uitzenden van licht bij een lagere frequentie worden opgewekt dan de lichtbron. Deze combinatie van verspreid en fluorescent licht wordt opgenomen door de detectors, en door schommelingen in helderheid bij elke detector (voor elke fluorescente emissiepiek) te analyseren het is toen mogelijk om diverse soorten informatie over de fysieke en chemische structuur van elk individueel deeltje te extrapoleren. FSC correleert met het celvolume en SSC hangt van de binneningewikkeldheid van het deeltje (d.w.z. vorm van de kern, het bedrag en het type van cytoplasmic korrels of de membraanruwheid) af. Sommige stroomcytometers op de markt hebben de behoefte aan fluorescentie en gebruiks slechts lichte verspreiding voor meting geëlimineerde. Andere stroomcytometers vormen beelden van de fluorescentie van elke cel, verspreid licht, en overgebracht licht.