일은 의정서를 작성한다

종류: 쥐는 의정서를 작성한다: 쥐 발생학은 의정서를 작성한다

프로토콜은3.5에4.5일 지점coitum(dpc)에 임신 여성 쥐에게서blastocysts을 모으기를 위해 방법을 기술한다. 키메라를 만들 위하여blastocysts은 미발달 줄기 세포에 그때 주사될 수 있는다. - [읽는 Blastocysts프로토콜을 모은]

종류: 줄기 세포는 의정서를 작성한다: 줄기 세포 격리는 의정서를 작성한다

줄기 세포 선의 d어 노v오 격리를 위해 시작 물자는 배치한다coitum(dpc) 확장한blastocysts또는 "연기한"blastocysts을 정상적인3.5일 이을 수 있는다. 연기된blastocysts은 흔하게 오v아r이엊돔y다음에4-6일 모은다. blastocysts의 양쪽 그룹를 위해, 직물 문화 절차는 유사하다. 연기하기blastocysts이 처음에 더 느리게 성장할 것이기 때문에, 유일한 다름은 첫번째 분해의 타이밍 이다. - [미발달 줄기 (ES) 세포의 읽은DeNovoIsolation는Blastocysts프로토콜에서 일렬로 세운다]

종류: 줄기 세포는 의정서를 작성한다

TS세포의 이 프로토콜decribes유도는3.5일 지점coitum(dpc) 쥐blastocysts에서 일렬로 세운다. 절차는 미발달 줄기 (ES) 세포 선의 유도에 유사하다. 그런데, 성공율은 상당하게 더 높,pluripotentTS세포 식민지를 인정할것을 더 적은 전문가적 의견은 요구된다. - [Trophoblast 줄기 (TS) 세포의 읽은 유도는Blastocysts프로토콜에서 일렬로 세운다]

종류: 줄기 세포는 의정서를 작성한다

ES세포의electroporation을 위해 프로토콜. 세포는 일상으로electroporating보다 전에 2 일 통행한다. 대략80%confluency에 흔하게 1개의 10 cm 격판덮개는1-2electroporations을 위해 충분할 세포를 제공할 것이다. - [ES 세포 프로토콜의 읽은Electroporation]

종류: 쥐는 의정서를 작성한다

쥐는 2 일을 위해cytohesin억제물SecinH3에 개발한다 감소한 간 글리코겐 수준에의해, 증가한 혈청 인슐린 및 키톤체 수준 및 줄인 혈청non-esterified지방산 확인될 수 있는 간 인슐린 저항을 먹였다. 쥐 간안에SecinH3의 존재 그리고 신원을 확인하기 위하여는, 우리는 클로로프롬에 간 균질화액에서 화합물을 추출하고LC/MS에의한 확인했다. - [쥐 간 프로토콜에서SecinH3의 읽은 적출]

종류: 핵산 정화는 의정서를 작성한다: DNA격리는 의정서를 작성한다

버섯 모양DNA격리를 위해 프로토콜. 이 pr업안에 중요한 성분은 (1) 젊은 냉동 건조한mycelial매트....young매트 (C.carbonum)... 수확량을 위해 4 일 성장Dnases(마지막=0.3mg/ml을 죽이는)의 사용 적출 버퍼안에 단백질 가수분해 효소K의 더 적은 오염 탄수화물 그리고 다른 잡다한 쓰레기 (2) 제비 이다. - [읽은 버섯 모양DNA격리 프로토콜]

종류: PCR은 의정서를 작성한다

PCR폴리메라이제 비용은 높을 수 있는다. 너가 기꺼이 하 일하 이 , 너는 수 있 생성하 박테리아를 포함하 복제품을. 그것은Taq의 제비를 일으키기 위하여 나타나고 확실히 안정되어 있. proceedure은 (Taq의15의000단위) 끝에게 4 일 시작을 가지고 간다. Taq은 또한ver나타난다 - [읽은 집에서 만들는Taq폴리메라이제 정화]

종류: 쥐는 의정서를 작성한다: 쥐 세포 배양은 의정서를 작성한다

프로토콜은11.5일 지점coitum(dpc)에서 태아 쥐의 생식기 능선에서 생식 세포의 격리를 앞으로 기술한다. 생식 세포는 분석, 문화, 또는 이식을 위해 그때 이용할 수 있는다. - [읽는 생식기 리지에게서 생식 세포를 고립시킨]

종류: 일차 전지 격리와 문화 프로토콜: 포유류 세포 배양은 의정서를 작성한다

이 프로토콜은11.5일 지점coitum(dpc)에서 태아 쥐의 생식기 능선에서 생식 세포의 격리를 앞으로 기술한다. 생식 세포는 분석, 문화, 또는 이식을 위해 그때 이용할 수 있는다. - [읽는 리지 생식기 프로토콜에서 생식 세포를 고립시킨]

종류: 줄기 세포는 의정서를 작성한다: 줄기 세포 격리는 의정서를 작성한다

postimplantation단계 태아의 격리는 1개을postimplantation결점을 일으키는 원인이 되는 유전 돌연변이아울러 정상적인 발달을 공부하는 둔다. 이 프로토콜은 이른somite단계 태아를 고립시키기를 위해 방법을 기술한다 (~8.5일은coitum[dpc을]배치한다). - [읽는 Postimplantation태아를 고립시킨: 이른somite단계 프로토콜]

종류: 줄기 세포는 의정서를 작성한다: 줄기 세포 격리는 의정서를 작성한다

postimplantation단계 태아의 격리는 1개을postimplantation결점을 일으키는 원인이 되는 유전 돌연변이아울러 정상적인 발달을 공부하는 둔다. 이 프로토콜은 늦은 원시 조흔 단계 태아를 고립시키기를 위해 방법을 기술한다 (~7.5일은coitum[dpc을]배치한다). - [읽는 Postimplantation태아를 고립시킨: 늦은 원시 조흔 단계 프로토콜]

종류: 줄기 세포는 의정서를 작성한다: 줄기 세포 격리는 의정서를 작성한다

postimplantation단계 태아의 격리는 1개을 지점 주입 결점을 일으키는 원인이 되는 유전 돌연변이아울러 정상적인 발달을 공부하는 둔다. 이 프로토콜은prestreak단계 태아를 고립시키기를 위해 방법을 기술한다 (~5.5일은coitum[dpc을]배치한다). - [읽는 Postimplantation태아를 고립시킨: prestreak단계 프로토콜]

종류: 식물 생물학은 의정서를 작성한다: Arabidopsis유전학은 의정서를 작성한다

Arabidopsis핵의 격리 및 유전자 녹음방송의 측량을 위해 프로토콜은 분석실험달리 에 핵을 사용하여 평가한다. 공장 설비 재료는hexylene에 의하여 글리콜 기초를 두는 버퍼안에 갈 높게 풍성된 핵 조각은Percoll조밀도 기온변화도을 사용하여 얻는다. 표준과 소규모 프로토콜은 분석실험달리 에 핵을 위해 시험된 방법과 함께, 선물된다. 전과정은 3 일안에 완료될 수 있는다. - [Arabidopsis 핵의 읽은 격리 및 유전자 녹음방송 비율 프로토콜의 측량]

종류: Tetrahymena원생 동물은 의정서를 작성한다

실험실이 세포를 빈번하게 이용하지 않을 때 동결되지 않는Tetrahymena의 장기 저장은 편리하다; 그런데, 이 조건의 밑에 유지되는 세포는 재기하기 위하여 수시로 배양기안에 외피의 2, 3일을 걸린다. - [콩 중간 프로토콜안에Tetrahymena동결되지 않는 문화의 읽은 장기 저장]

종류: 세포 생물학과 세포 배양: 교류Cytometry은 의정서를 작성한다: 교류Cytometry을 위해DNA얼룩이 지는 프로토콜

이 프로토콜은propidium요오드화물 (PI)을 사용하여DNA의 양이 많은 측량을 위해 방법을cytometry얼룩이 짐 그리고 교류 기술한다. 이중 나사선의 겹쳐 쌓인 기초사이에 삽입해서DNA과RNA모두의 모든double-stranded지구가PI에 의하여 얼룩이 진다. PI은 본래 세포막을 관통할; 그런 까닭에, 세포는 얼룩이 지기보다 전에 조정 이다. 에타놀 조정 세포는,또는 주몇일동안4캜에, 그리고 그때 얼룩이 지고 분석해 저장한 수 있는다. - [조정 전체 세포 프로토콜의Propidium요오드화물 (PI) 얼룩이 지기]을 사용하여DNA내용의 읽은측량

종류: Microinjection은 의정서를 작성한다: DNA의Microinjection은 의정서를 작성한다

microinjection에 의하여 초파리 태아로double-strandedRNA(dsRNA)을 도입하기 위하여 이 프로토콜은 어떻게의 묘사를 제공한다. 초파리 태아로 주입이 시작될 전에 준비의 몇 일은 요구된다. 비행거리는 계란 수집을 위해 풍부한 공급안에 있어야 한다. dsRNA입히는 금 입자 (유전자 전자총에 의하여 초파리 태아로dsRNA의 납품)에 태아의 사격은 대안으로 사용될 수 있는다. - [초파리 태아 프로토콜으로dsRNA의 읽은Microinjection]

종류: Microinjection은 의정서를 작성한다: DNA의Microinjection은 의정서를 작성한다

코어는 동일한 돌연변이를 위해 하나나 둘개의 복제품을 사용하여 2 연속적인 일에 주사되는 40개의blastocysts의 합계로 1개의 주입을 정의한다. , 1개의 주입의 비용에 정보은 값을 매기는 페이지를 참조하십시요. - [Blastocysts 으로 쥐ES세포의 읽은Microinjection]

종류: 쥐는 의정서를 작성한다: 쥐 생식계 수술은 의정서를 작성한다

생식선을 제거하고기 위하여, 성ofmouse태아를13.5일 지점coitum결정하고기 위하여 알칼리성 인산 가수분해 효소 얼룩이 지기의 사용으로 생식 세포를, 구상하기 위하여 프로토콜은 어떻게 기술한다. - [읽은 쥐 생식선 제거 및 생식 세포 얼룩이 지는 프로토콜]

종류: 줄기 세포는 의정서를 작성한다

이 프로토콜은ES세포의 통행을 기술한다. 그들은 그들의 성장율의지하고 있는1:3에70%confluency이 그들에 의하여 도달할 때1:7에 각 2-3 일 쪼개야 한다. 그들은 결코90%confluency지나서 성장하는 허용되어야 하지 않는다, 그러나 오히려 만지지 않아 단단하게 포장한 식민지를 형성해야 한다. - [미발달 줄기 (ES) 세포 프로토콜]의 읽은통행

종류: 세포 배양은 의정서를 작성한다: 세포는 프로토콜을 일렬로 세운다

익지않는264.7세포는a대식 세포 ,Abelson백혈병BALB/c쥐에게서 파생되는 바이러스에 의하여 변형시키는 세포 선 이다. 문화 (통행)안에 일상적인 정비를 위해, 세포는 100 밀리미터와150밀리미터 격판덮개안에 대략10%(1x106및 3개x106의 세포의 합류에, 각각으로) 씨를 뿌리고 대략80%의 합류에 성장한다. 이 절차는 세포를 각 2 일 쪼갤것을 요구한다. - [익지않는 264.7세포를 위해 읽은 통행 절차]

종류: 박테리아 유전학은 의정서를 작성한다

Agrobacterium문화안에 플라스미드DNA의 존재를 결정하기 위하여 프로토콜은 방법을 기술한다. 애매할 수 있고 나타나기 위하여 정상적으로 저항하는 식민지를 위해 몇 일을 걸리는 변형시킨Agrobacterium의 선택에 비교해, 여기 기술되는 접근은 급속하고 정확하다 모두. - [Agrobacterium 프로토콜의 읽은PCR분석]

종류: 분자 모형 유기체: 쥐 동물성 프로토콜: 쥐Genotyping은 의정서를 작성한다

PCRGENOTYPING프로토콜. 1) 나이의 대강 10 일에 쥐의 자른 발가락 및 기록 성, 색깔, 및 긴장은... 쥐Genotyping자원등을맞댄. - [읽은 PCRGENOTYPING프로토콜]

종류: RNAi기술은 의정서를 작성한다

프로토콜은 익지않는264으로siRNA의transfection을 관련시킨다. Lipofectamine2000년을 사용하여 7개의 세포.  세포는siRNA에transfected두번 이다 (연속적인 일에).  표적 유전자 때려 눕힘은 총계RNA에서 고립시키나48시간 지점transfection을 단백질에서 고립시켰다72시간 지점transfection을 사정된다. - [Lipofectamine 프로토콜에 익지않는264.7세포의 읽은siRNA두 배Transfection]

종류: RNAi기술은 의정서를 작성한다

프로토콜은 익지않는264으로siRNA의transfection을 관련시킨다. Lipofectamine2000년을 사용하여 7개의 세포.  세포는siRNA에transfected두번 이다 (연속적인 일에).  표적 유전자 때려 눕힘은 총계RNA에서 고립시키나48시간 지점transfection을 단백질에서 고립시켰다72시간 지점transfection을 사정된다. - [Lipofectamine 프로토콜ii에 익지않는264.7세포의 읽은siRNA두 배Transfection]

종류: 세포 생물학과 세포 배양: 교류Cytometry은 의정서를 작성한다: 프로토콜을 분류하는 세포

FACSort이 풍성하기 위하여transfected인간 트롬빈 수용체의 상부를 내색하는 쥐 세포를 이용될 수 있는 까 라고를 위해 기술한다. 트롬빈 수용체 내색 세포를 위해 풍성해 남아 있는 것을 보이기 위하여 분류한 조각은 그때12일 늦게in-vivo경작해,reanalyzed할 수 있는다. - [읽는 Culture가in-vivo따르는 유전자 발현에 기초를 두는Transfected세포를 분류한]