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연구를 하는 방법은 가장 중대한 경천동지의 순간에 사실을 공격한것을 이다. Science1972년의~Celia녹색, 쇠퇴 및 가을
물자
1. 시약을 복잡하 형성한:
비율100:1:1안에 뒤에 오는 모액을 섞어서
사용의 직전 (vol.에 의하여), 각각으로
준비하십시요:
해결책A: 2%(증류수안에w/v)Na2CO3.
해결책B: 1%(w/v)CuSO4·증류수안에5H2즁.
해결책C: 증류수안에2%(w/v)
나트륨 칼륨 주석산염.
2. 2개의NNaOH을 준비하십시요.
3. 유효한Folin시약 (상업적으로): 1개의N농도에 사용.
4. 기준: 표준 단백질 (저장되는 증류수v)안에 2mg/mL단백질을 포함하는 예를들면, 둔감한 혈청 알부민 조각20캜의 모액을에 얼어 –이용하십시요. 증류수에 모액을 묽게 해서 기준을 준비하십시요 다음과 같이 것 을:
모액 (킠) 0 2.5 5 12.5 25 50 125 250 500
근해 (킠) 500 498 495 488 475 450 375 250 0
conc단백질. (킽/mL) 0 10 20 50 100 200 500 1000년 2000년
방법
1. 견본의0.1ml에 또는 표준, 2개의NNaOH의0.1ml을 추가하십시요. 난방 구획 비등 목욕안에 10 분을 위해100캜에 가수분해하십시요.
2. 가수분해 산물을 실내 온도에 냉각하 신선하게 섞는의 1ml을 추가해 시약을 복잡하 형성한. 해결책을 10 분을 위해 실내 온도에 서는 시키십시요.
3. Folin시약의0.1ml을, 와동 믹서을 사용하여 추가하고,30의60분을 위해 실내 온도에 혼합물–대를 시키십시요 (60분을 초과하지 말라).
4. 단백질 농도가 100 그리고 2000킽/mL사이에 있으면 단백질 농도가500킽/mL의 밑에 또는550nm에 있으면750nm에 흡수도를 읽으십시요.
5. 흡수도의 표준 곡선을 처음 단백질 농도의 기능으로 음모를 꾸미고 불명한 단백질 농도를 결정하기 위하여 이용하십시요.
JakobH.Waterborg에의해 프로토콜에 기초를 두는.
Lowry그 외 여러분. J.Biol. Chem. 193: 265-275(1951년)
Lowry방법 프로토콜
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