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단백질 배열 장비와 제품

Microarray에 단백질 부착은 잘게 썰n다

단백질과 항체Microarrays

단백질과 항체Microarray의 창조 그리고 제조는 잘게 썰n다

부착
            최대 의무 수용량 (8,27)을 달성하 도록 단단한 표면에 단백질을 붙이기 위하여는, 기질의 표면은 변경되어야 한다. 단백질은 단백질 부착 층에 칩에 붙인다 (숫자 3)을 보십시요. 이 층은 전형적으로 응용의 성격에 변화하는 유기 필름 이다. 다양한 물자는 아g아r옷어 (39), 덱스트런 기초를 둔 히드로겔 시트 (40), 다공성 볼XXry람이d어 히드로겔 시트 친수성 중합체 및polyamino 산 (41)을 포함하여 공부되었다.
            편리한 부착 방법은 니트로셀룰로오스 막을 사용했다 또는 단백질이 일반적인 상호 작용 (34,42,43)으로 표면의 위에 수동적으로 흡수될 수 있었다 고 많l리진은 유리를 그런 입혔다. 붙인 단백질은 무작위 오리엔테이션안에 표면의 위에 묶고 엄격한 세척 조건의 밑에 떨어져 세척될 수 있는다. 그런데, 잡음 레벨은 흔하게 일반적인absorption/adsorption때문에 더 높다.
            더 명확하고 더 강한 부착은 단백질 (31,36,26)에 공유 원자가로 교차 결합 할 수 있는 유리에 반동적인 표면을 만들어서 달성된다. 각자 소집된 단층을 (지대공 미사일), 유리에 수산기 그룹에 유리제 표면을 반작용하는 1명의 기능적인 그룹이 있는, 및 단백질의 1 차 아민 그룹에 반작용하게 자유롭 또는 최대 특이성 (44,45)을 도달하기 위하여 화학으로 변경되는 더 이을 수 있는 다른 그룹을 형성하기 위하여bifunctional실란 crXX-린거r은 이용한다. 다른 변이는 금 입히는 유리 (46,47) 이다. 금 입히는 칩의 이점은, 그리고 붙잡은 분자를 확인하기 위하여 반응의 역동성을 감시하기 위하여SPR과 질량 분석이 검출 방법으로 통합될 수 있는다 고 이다.
            상술하는 공유 원자가 crXX-린깅 접근에는 그런데 불리가 있는다. 그들의 무작위 부착이 단백질의 출생지 견진을 바꾸나, 단백질의 활동을 감소하나, 조사 (8,27)에게 그들을 접근하기 어려운 만들l 수 있는다 고 반동적인ligands이 단백질의 곁사슬안에 또한 존재한다 고 사실에 만기가 되는 가능하다.
            칩의 표면에서 단백질을uniformily멀리 동쪽으로 향하게 하기 위하여는, 단백질은 그들의 아미노carboxy더r민이에 높 친화력 꼬리표에 융합될 수 있는다. 이 방법에, 고정시킨proteins/antibodies은 그들의 출생지 구조안에 남아 있기 할 것 같, 따라서 분석물에게 단백질의 활동적인 사이트에 능률적인 접근을 허용한. 이 방법은 성공적으로 니켈 입히는 유리 슬라이드 (26)의 위에 그의 꼬리표를 포함하는5800의 융해 단백질의 부착에 시범된 첫번째 이었다. glutathione/GST 다른 친화력 방법은 또한 사용되었다 (48).
무엇이든을 붙이기 위하여Streptavidin에 의하여 기초를 두는 동원정지 방법은 배열 표면 (49)에 또한 넓게biotinylated생물학 성분을 채택했다.
            단백질이physiochemical재산에 높게 과민하기 때문에 칩 지원 물자는 중요하다. 예를 들면, 극지 배열은 친수성 단백질에 묶기 위하여 화학으로 대우된다 그런데 소수성 도메인을 (9) 소유한다 대로 그런 표면이 세포막 단백질 (예를들면g단백질에 의하여 결합되는 수용체)을 위해 부적한.
            단백질은 핵산 행동하고지 않, 동일한 지상 화학에 드러낸 때 다를 단백질은 다를 방법안에 행동할 것이다. 다른 유형은 지상 화학 이렇게 몇몇 단백질의 보유를 승진시키고 다른 사람의 활동의 변성 또는 손실을 일으키는 원인이 될 것이다. 그런 까닭에 이것이 다양한 유형의 고정시키기 단백질을 그들의 이차와 삼차 구조를 유지하기 두기 때문에, 지상 화학의 적당한 선택은 중요한, 그리고 이렇게 그들의 생물 활성도 이다. 모든 단백질의 적당한 폴딩 그리고 기능을 얻기 위하여 거기서로 칩 증가에 다른 반점의 수가, 100개의 다른 단백질을 고정시킬 100개의 다른 방법 이을지도 모르다 때 이 문제는 확대된다. 가장 큰 단백질의 기능이 현재 미지수 이기 때문에 또한 뜻깊은 문제는, 이렇게 거기서 실제적으로 칩 (7)에 아직도 기능적 이다 시험할 것이다 방법 이다.

다음: 단백질 칩 납품 방법

단백질과 항체Microarrays을 위해 참고

등을맞댄:

단백질 칩과 항체 칩에 소개 그리고 배경.

항체와 단백질 칩의 유형

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