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단백질Microarray은 잘게 썰n다

단백질과 항체Microarrays

단백질과 항체Microarrays에 소개 그리고 배경

항체와 단백질 칩의 유형

단백질과 항체 부착 방법 -Microarray칩의 창조

단백질 칩 납품 방법

단백질 칩 붙잡음 분자와 그들의 제한

항체Microarrays: 문제와 해결책

단백질Microarray검출 방법과 분석

단백질 배열을 위해 단백질 생산

단백질 배열과 단백질 칩의 응용

단백질Microarrays: 진로 및 결론

단백질과 항체Microarrays을 위해 참고

단백질과 항체 Microarrays에 소개 그리고 배경.

질병에 명확한 단백질을 내포하게 분자 생물학의 우리의 이해안에 최근 전진에도 불구하고, 많은 경우에 우리는. Genomics과microarray기술은 우리들을mRNAs의 수천을 한때는 분석하,mRNA표정이 질병 국가안에 변화한다 결정하는 허용했다. 그런데 세포안에mRNA의 농도가 저 단백질 (1,2,3)의 실제적인 풍부와 가난하게 상관되는 것을, 연구원은 오랫동안 있어있었다. 이것은 개인적인mRNAs의 강직의 비율 및 단백질 분해 (6)에 의하여 단백질이 틀린다 고 사실, 단백질 번역 (4)의 지점transcriptional통제, 단백질 (5)의 다수 지점transcriptional수정, 및 단백질 강직에 만기가 된다.
명확한 단백질의 총계를 직접적으로 측정해서, 우리는 유전자 기능의 진실한 수준을 측정하고 있다. 그런데, 1개이 고려사항으로 다수 지점 번역상 수정을 가지고 갈 때, 인간 세포는 더 다른 단백질 이체 무엇이든이 모두를 분석하기의 업무를 만들는 질병안에 거대한 업무 바꿀 수 있은 백만닢의 포함할 수 있는다. 단백질microarrays또는 단백질 칩은 이 문제에게 해결책 고려할 수 있는다. 활주 또는 "칩"은 알고있은 항체의 수천에 더럽힐 수 있었다 또는 칩 및 결정된 어떤 바인딩이microarrayDNA 펩티드에 의하여, 생물학 견본 퍼졌다. 묶음것은 시간 의 비행 질량 분석 (Ms) 및 펩티드 대량 f잉어rpr인딩 표준proteomic기술을 사용하여 또한 분석될 수 있었다. 단백질 칩은 이렇게 질병안에 단백질 변화를 윤곽을 그리기의 빠른과 높 처리량 방법이 될 수 있는다. (7)

단백질 칩은 단백질 단백질, 단백질 약 상호 작용,dna단백질 상호 작용, 단백질 지방화, 항원 항체–상호 작용, 언zy머-스bstrXX어–, 및 수정할 수 있는 배열하 유형 높 처리량 검열 (7,8) 이을지도 모른다 수용체ligand상호 작용의 학문을 포함하여 많은 다른 응용안에 작용하는 가능성으로 가지고있n다.

생물학 견본안에 다각 단백질을 성격을 나타내기 위하여 2개의 접근은 이용되었다. 첫번째 접근은 질량 분석 (Ms)에 의하여 절단 그리고 식별에의해 널리 (9) 단순한 실험안에2000-10,000종사하고 단백질을 분리하, 구상하는 쓴 2 차원 젤 전기 이동법 이다. 가장 풍부한 단백질이 검출될 수 있는다 다만, 이 방법은Ms과 시각이 걸리고다 동등하다 모두. 프리카스트 젤 및 일반적으로 이용한 시약, 프로토콜, 및 하드웨어 구성요소가 개량한 성과 (17)에 지도했 비록, 또한, 재현성은 문제 이다. 3D젤 별거 기술의 제한에 만기가 되는, 증가 주의는 대안으로 제 2 접근의 발달, 단백질microarrays의 발달 및 무료한 접근 (10-12)에 초점을 맞추고 있다.
단백질에 의하여microarray기초를 둔ligand의무적인 분석실험을 위해 이론 배경은 1980년대 (13-16)후반에Ekins그 외 여러분에의해 처음에 개발되었다. 모형에 따르면, 항체microarrays은 뿐만 아니라 분석물 위원회의 동시 검열을 허가하고, 그러나 또한 평범한 검열 방법보다는 더 과민할고 급속할 것이. 검열 큰 단백질 세트안에 관심사는DNAmicroarrays과 인간 게놈 계획사업 (17)에 의하여 g언옴잊s안에 공적의 단 그 결과로 일어났다.

첫번째 배열 접근은 흔하게96-well미량역가판 (18-19)안에 실행된 생화확 적이고,immunobiological분석실험을 소형화한것을 시도했다. 각자96-well항체 배열은 표준 효소 연결된 임믄옷오rb언t 분석실험 (ELISAs)을 위해144성분에 첫째로 (20) 만들었다. 전립선 명확한 항원 (PSA) 및cytokines(21)을 측정하기 위하여 유사한 배열은 이용되었다.

필터 막은 그들의 우량한 단백질 의무 수용량때문에 또한 처음에 사용되었다. 그들은ELISA기술을 사용하여 항체에 대개는 시험되다. 녹음방송안에 관련시킨 방사선DNA,RNA,ligands, 및 다른 작은 화학제품 (22)에 단백질의 명확한 상호 작용의 수사를 위해48의 순화된 단백질의 저밀도 배열은 개발되었다. 37830의 복제품을 이루어져 있는 인간 태아 두뇌DNA표정 도서관을 가린 의 목적으로 막 기초를 둔 고밀도 배열은 개발되었다. 순화된 단백질은300samples/cm2(23)의 조밀도에PVDF막의 위에 더럽혔다. 다른 필터는 배열을 건설되었다 기초를 뒀다 그러나 제한은 종양 생검의 단백질 표정 윤곽을 그리기같은 견본 양을 제한하기에 응용안에 그들을 사용한 것을 곤란해던 하는 낮은 결의안 및 상당한 배경 이었다.

단백질 배열은 칩에 제 2 어드레스로 불러낼 수 있는 격자안에 고정시키는 단백질 항체의 도서관의 손상한다 (숫자 1)을 보십시요. 단백질microarray바이오칩은 추출하고 액체 매체에서 표적을 유지하고 수송 매체in.situ안에 분리되고는 가공 단백질microfluidic장치 (24,25) 을 사용하여 microfluidic바이오칩에서 명료하다. 전형적인 배열은 1개 cm2 (26)의 전체 면적안에103-104의 공간에 명료한 성분을 포함할 수 있는다.

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