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과학, 가장 큰 발견을 예고하는 것안에 들을 것이다 가장 호쾌한 어구는, "Eureka!" (나는 그것을 발견했다!) 그러나 "재미있은..."~IsaacAsimov이는
저작권2007분자 역
EdwinM.Southern남쪽에게 더럽힘것은 그것의 발명자 및 개발자 의1975년에 영국 생물학자다음에 지명되는 기술 이다. 남쪽에게 더럽힘것은DNA(예를들면 세포질DNA)의 크고, 복잡한 견본안에 명확한DNA순서의 탐지를 (유전자 또는 다른 사람) 허용하는 기술 이다.
"PCR의 앞에 싸게 단식하 변화했다 유전학 이는 우주의 우리의 전망을, 남쪽 오점은 이었다 보편적인 사역마 연속. 어떤 단계에서는 남쪽 오점을 채택하지 않은 분자 유전학안에 실험 없었다. 아직도 유용한 공구 이고 너가."역사적인 데이터를 해석할 수 있는다 하기 위하여 너는 그것에 관하여 알n것을 필요로 한다
남쪽 오점technique.Figure의 도표는 저작권 이다. 너가 강의 또는 과학 계획사업을 위해 그것을 사용하고 싶으면, 허가를 위해 우리들을 연락하십시요.
단계 1안에,DNA은 금지 언d온읒러앗엇에 소화된다. High-molecular-weightDNA은 더 작은 파편으로 소화된다.
단계 2안에,DNA은 아g아r옷어 젤에 전기 이동법에 의하여 크기에의해 그때 밖으로 분리한다.
단계 3안에, (자주색) 버퍼 해결책안에 아g아r옷어 젤의 위에 나일론 또는 니트로셀룰로오스 막의 장은 둔다. 이것은 더럽히나 옮기는 단계 사려된다. 압력은 흡입을 사용하여 또는 막의 위에 종이 수건 및 무게의 더미 및 젤을 두어서 젤에 동등하게 젤과 막사이 조차 접촉을 지키기 위하여 가한다. 만조 잠재력의 지구에서 간조 잠재력의 지구에 모세관 작용을거쳐 버퍼 이동은 (흔하게 여과지와 종이 직물) 막으로 젤에서DNA을 위에 이동하기 위하여 그때 이용된다. (자주색)DNA을negatively-chargedDNA과positively-charged막사이 이온 상호 작용으로 막에 높은 친화력에 묶는 두는Positively-charged막은 흔하게 사용된다.
단계 4안에, 니트로셀룰로오스 막은 높은 온도에 노출에의해 (60에 100 에서캜). 나일론 막은UV방사선에 드러낸다. 막에 악대안에 현재DNA의 영원한 공유 원자가 교차 결합을 지키기 위하여 이 단계는 이용된다.
단계 5안에, 막은 방사선 조사에 드러낸다. 이 조사는 검출하고 너가 싶는 관심사의 너의 순서가 있는 단순하 배가 좌초한DNA파편에는 이다. 이 조사는 막에 알을품고 막에DNA에 교배시키는 둔다. 형광성 색원체 염료같은 비방사능 이는 더 새로운 조사가 또한 이용한다 그런데 필름에 검출된 하기 위하여 조사는 흔하게 방사선 이다. 교잡다음에, 과잉 해방되는 조사는 명확하게 도약된 조사를 떠나는 막에서 멀리 세척된다.
단계 6안에, 색원체 검출 방법이 이용되면 교잡의 패턴은 방사성 형광성 조사의 경우에 방사선 사진술, 또는 막에 색깔의 발달에 의하여 엑스레이 필름에 구상에의해 검출된다.
(단계 3을 위해 주: 큰DNA파편이
출석하면 킬로 비트가 크기안에 있을 수 있는
보다 큰15은 그때까지 더 작을 조각으로DNA을
끊을 것이다 더럽히기보다 전에HCl묽게 하는
산을depurinated, 따라서 젤에서 막에 능률적인
이동을 허용한. 알칼리성 이동 방법이
사용되면,double-strandedDNA을 변성시키기
위하여DNA젤은 (전형적으로 가성소다를
포함하는) 알칼리성 해결책으로 둔다.
알칼리성 환경안에 변성은 조사에 더 늦은
교잡을 위해
단순한DNA물가로positively-charged막에negatively-chargedDNA의
개량한 바인딩을, 분리하고 그것을 (아래에
보십시요), 파괴한다 아직도DNA안에 출석할지도
모른다 어떤 잔여RNA을 제공한다.
오디오: 상세한 남쪽 오점 설명을
들으십시요! 의례:
국가 인간 게놈 연구소.
언급되는것과 같이, 남쪽 오점은 조사이라고 부르는DNA의 다른 조각에 무료한DNA순서를 확인하, 위치하기 위하여 이용되는 기술 이다.
부분적으로 언d온읒러앗엇에의해 소화되는genomic또는 무료한DNA의 순서 파편의 전기 이동 젤에 별거는, 막의 위에 파편 그때'더럽히고'어느 악대가 관심사의 파편 또는 유전자를 포함하는 까 검출하기 위하여 조사이라고 레테르를 붙이는 특성에 교배시키는 둔다. 남쪽 오점은 큰 유전자rearrangements/deletions및 큰trinucleotide반복 확장을 검출하기안에 특별하게 유용하다.
남쪽 오점은DNA견본안에DNA순서의 존재를 검사하는 일상으로 분자 생물학안에 이용되는 방법 이다. 조사 교잡을 위해 필터 막으로 크기 분리한DNA을 옮기기 위하여 남쪽에게 더럽힘것은 방법에DNA의 입도 분리를 위해 아g아r옷어 젤 전기 이동법을 결합한다. 다른 더럽히는 방법 (i.e, 서쪽 오점, 북부 오점, 남서 오점) 유사한 원리를 채택하는, 그러나RNA또는 단백질을 사용하는것은, 늦게 에 관하여 남쪽 이름이라고 지명되었다. 기술이 시조로 지명되기 때문에, 북부와 서쪽 오점이 않않 이지만, 남쪽 오점은 투자해야 한다.
금지 파편의 분자량을 결정하, 다른 견본안에 관계되는 총계를 측정하기 위하여 그것은 또한 이용된다.
오점은 운반대의 위에DNA과RNA단백질을 옮기기를 위해 기술 이다 그래서 분리할 수 있고, 수시로 젤 전기 이동법의 사용을 따른다. 남쪽 오점은DNA을 옮기기를 위해 이용한다.
이 파편이 조사에 무료한DNA순서를 포함하는 것을 필터 막에 명확한DNA파편에 조사의 교잡은 지적한다.
남쪽 오점은 유전자 발견을 포함하여 몇 주요한 지역안에와, 기동전개와 발달 학문 지도로 나타냄, 진단서 및 웅변술 이용한다.
최선 조건의 밑에, 남쪽에게 더럽힘것은 관심사의DNA의~0.1페이지를 검출한다
20XSSC버퍼의 1개 리터를 만들 위하여는, 뒤에 오는 것 추가하십시요:
문제와 분쟁 해결 남쪽에게 더럽히기를 위해, 남쪽 더럽히는 공개토론안에 그것을 토론하기 위하여 새로운 실을 배치하십시요!
금지 효소 소화 - 너가 알n것을 필요로 하는 모두!
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