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가정 > dna > 수액 새우 알칼리성 인산 가수분해 효소 프로토콜 >index.php
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생활은 간결, 예술 오랫동안 이다. ~Hippocratesc.460-357B.c.. 약의 그리스 의사 그리고 아버지.
새우 알칼리성 인산 가수분해 효소 또는 수액은, 핵산dephosphorylatingRNA또는DNA끝에서’ 5개의 인산염의 d엎옷포ryXX이온을 촉매 작용을 미치는 효소 이다.
PCR제품에는 또한 뇌관 그들의 자유로운 끝에 인산 가수분해 효소가 있지 않는 것을 주의하고, 너가 d어de-phosphorylated선그림을 사용하기 위하여 가면 그런 까닭에 클로닝보다 전에phosphorylated있는것을 필요로 하십시요!
수액은 불안정한 온도 이다 그런 까닭에 너 쉽게CIP에 비교되는 이 효소를 이다 (!) 군대를 해산할 수 있는다. 수액은15분을 위해65캜목욕 외피에 군대를 해산한다.
너는 사실상으로 반응을 얻지 않는다. 수액은 적어도10mMMgCl2을 (요구한다 그러나 새우 알칼리성 인산 가수분해 효소의 최선 효소 활성은20-25mMMgCl2에 있고) pH8.0에 잘 일한다.
DNA끝 (3개 킬로 비트 플라스미드의2.5으g)의dephosphorylate1pmol, 왜냐하면 너가 필요로 하는37캜에1hr에:
5'오버행을 위해 수액의0.1단위,
무뚝뚝한을 위해0.2단위 및3'정상을
위해0.5단위는 걸n다.
효소는 을당 1개 단위 온다, 따라서 안전함 너 2
으g을 위해approx.0.5단위를 이용할 수 있는다.
끝: 수액 효소는 금지 다이제스트에 직접적으로 추가될 수 있는다! 최후 레테르를 붙이는 1개의 단순한 관안에 다만 적당한 시약을 추가해서 금지 효소 소화, d엎옷포ryXX이온,’ 효소 비활성화, 결찰 또는 5을 포함하여 따라서 전체 절차는 실행될 수 있는다. 이것은 너를 시간을 저장하, 능률적 이는 허용할 것이다!
새우 알칼리성 인산 가수분해 효소와DNA클로닝 공개토론안에 그것에 관하여 지점 질문 토론하거든 !
금지 효소 소화 - 너가 알n것을 필요로 하는 모두!
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