 |
|---|
너가 우리의 공개토론 에 배치할나 우리의 진보한 특징을 이용할 수 있을 전에 너는 등록해야 한다. 지금의 기록기! 그것의 자유롭고 및 빠른!
이미 등록하는가? 아래에의 지금의 로그인.
이미 등록하는 자신의 암호를 잊고? 그것을 재기하는 아래에의 누르기.
중대한 과학적인 발견은 것의 성격에 관하여 확실히 잘못되는 이론을 검증한것을 찾아 남자에의해 했다. ~AldousHuxley, "열대안에Wordsworth"
소금과 에타놀을 사용하여DNA강수는DNA과RNA 핵산을 집중하기를 위해 실험실안에 일반적으로 사용한 프로토콜 이다. 기본적인 방법은 소금 이고 에타놀은 핵산을 해결책에서 침전시킨 수성 해결책에 추가된다. 침전시킨 핵산 및 세척의Ccentrifugation은 해결책의 나머지에서 핵산을 고립시킨다. 소금을 제거하기 위하여 펠릿을 포함하는 핵산은 감기70%에타놀에 그때 세척된다.
에타놀에서 핵산을 멀리 고립시키기 위하여 그때 제 2 원심 분리 단계는 이용해 제거되는 에타놀을 허용한. 핵산 펠릿은 그때 말리는 두고, 신선한 수성T(Tris) 버퍼 또는 근해안에 그때resuspended.
핵산이 근해안에 녹는 까 왜 1 필요물은 첫째로 이해한다.
근해 (H2즁)은 수소 원자의 가까이에 만기가 되는 산소 원자의 가까이에 부분적인 음전하가 전자의 각각 쌍 있는 극지 분자, 및 부분적인 양전하에는 이다.
DNA 근해, 다른 극지 분자 또는RNA의 이 극지 성격에 만기가 되는 물 분자에 정전기로 상호 작용한 할 수 있어, 쉽게 근해안에 녹이는 그들을 허용한.
강수는 이 상호 작용을 끊 새것을 만들어, 해결책을 나오, 쉽게 고립시키는DNA또는RNA을 허용한.
프로토콜안에 소금 역할은DNA또는RNA핵산의 설탕 인산염 등뼈에 책임을 중화하는 이다. DNA과RNA강수안에 일반적으로 이용한 소금은 나트륨 아세테이트를 포함한다.
aqeous해결책안에, 나트륨 아세테이트에 의하여Na+으로[CH3COO]-.positively-charged나트륨 이온 중화한다DNA, 명확하게 핵산 분자에게 근해안에 먼 보다 적게 친수성 및 그런 까닭에 매우 보다 적게 녹는 하는 핵산에PO3-그룹에negatively-charged등뼈가 갈라지고.
해결책안에Na+이온과PO3-이온사이 정전기 매력은 해결책의’절연성 불변의 것에의해 영향을 미치는Coulombs 법률에의해 지시된다. 근해에는 함께 오기 위하여Na+및PO3-을 위해 공정하게 곤란한 만들는 높은 절연성 불변의 것이 있는다. 에타놀에는 이와 반대로 그것을PO3에 - 상호 작용하, 그것을 s 책임 보호하, 핵산을 보다 적게 친수성에게 하게Na+을 위해 매우’쉽게 하는 매우 더 낮은 절연성 불변의 것이 있어, 해결책을 중퇴하는 그것을 일으키는 원인이 된.
저온에 핵acid/salt/ethanol혼합물의 외피는 프로토콜안에필요에 따라 프로토콜안에 (예를들면-20또는-80C) 일반적으로 인용된다. 20ng/mL이0-4C그래서 침전시킬 것이다 처럼 낮은 얼음에15-30분을 위해 농도 외피에 핵산은 그런데에 충분하다.
유명한 것 말하기 때문에, 이 프로토콜의 목표는DNA을 침전시키는 이다. 이것은 석탄산 클로로프롬 적출에 흔하게 결합되고 핵산을 순화하기의 방법으로 사용된다. 이것은 무슨 해결책안에 또는 너의 핵산을 있는 부드럽게 하십시요 변화하기를 위해 방법으로 또한 사용될 수 있는다.
이 프로토콜은RNA강수 (우리들에게 포획 배려RNAse자유로운 물자 의 경우에는)을 위해 또한 일한다.
시간을 위해-20캜은DNA의 더 큰 (세균성 문화, 플라스미드의1mL) 총계를 사용하기를 위해 잘 이다
얼마DNA을 너가 침전시키고 있는 까DNA펠릿은 항상의지하고 있는 보이지 않을 것이다. 이렇게 항상 분리기안에 너의 견본을 직면하고 있는 방향을 생각하기 위하여 적재하기안에 포획 배려. DNA펠릿은 분리기의 외부를 직면하는 관의 편에서는 이을 것이다.
정당할DNA는 아니고 이 프로토콜은 모든 핵산을 침전시킬 것이다. 너가 너의 견본안에RNA을 원하지 않으면, 그것을 다루는 많은 방법의 한개은 간단하게안에TE+RNAse마지막 단계에resuspend,15mins-1hr을 위해 실내 온도에 그것을 남겨둔것을 이다.
소금이 침전시키면,70%EtOH에
세척해서 쉽게 제거될 수 있는다. DNA은
실내 온도에 녹이지 않을 것이다,
그러나 소금은. (CsCl을 제거하기
위하여 이것은 또한 이용될 수 있는다. 나가
플라스미드 pr업에서CsCl을 제거해야 할 때
나는70%EtOH에 약간 세척을 투석보다는 더 쉽다
발견한다. 주: 해결책의 고열 계수가
있는CsCl에는 제거할 경우 식히지 말라.)
친구에게 이 페이지를 보내십시요
![[أربيك]](http://www.molecularstation.com/translate/images/flag_ar.gif){kind=small}
