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세포 배양은 의정서를 작성한다

세포 배양Bioinformatics과 데이타베이스

세포를 2차 배양한

DMEM매체4C을 얻으십시요; 트립신20C; BSA-20C;

원뿔 관 플라스틱으로DMEM의36mL안에 두는

36mLDMEM에BSA매체의4mL을 추가하십시요;

주사통과 필터를 얻으십시요;

주사통에 매체높은 쪽으로 빨십시요. 필터를 추가하십시요.

주사통에 필터를 통해서 매체를 내십시요.

양의 모두를 얻기 위하여 두번 반복하십시요.

원뿔 새로운 플라스틱 관으로 두십시요.

비커로 내버려서 오래 되는 매체를 제거하십시요; 흡인기를 사용하지 말라 (오염을 얻으십시요!!)

문화에3mLtypsin을 추가하십시요. 문화 콘테이너떨어져 잡아당기기 세포에 트립신.

부화기로 콘테이너를 두십시요. 2 분을 기다리십시요; 밖으로 가지고 가십시요; 현미경으로 보십시요.

더 적은 수풀을 얻는것을 해보십시요. 개인적인 세포.

비커로 내버려서 트립신의 최대량을 제거하십시요.

부화기 으로 두십시요. 빈번하의 검사.

더 적은 수풀을 바닥을 검사하는 측에 철석 때림 콘테이너; 현미경으로 보기.

많은 개인적인 세포를 따라 이초 볼 때; 중대한!

더 큰 콘테이너에 매체를 추가하십시요; 더 큰1:5/년1:3희석 (3-5의 콘테이너).

10mL을에 추가하십시요 (T75)large콘테이너,5mL에 (T25)small콘테이너.

최대량에서 빨십시요 (T25에서 세포의5mL). T75에 추가하십시요.

작은 콘테이너안에 몇몇 세포를 넣어두십시요. 작은 콘테이너에 매체를 추가하십시요. 단세포를 현미경을 체크인하십시요; 37C부화기안에 알을품으십시요.

우리의 세포 생물학과 세포 배양 프로토콜 디렉토리에 다른 세포 프로토콜을 보십시요.