安定したTransfectionのプロトコル

安定したtransfectionはセルにもたらされる遺伝物質が再生を越えて保たれるtransfectionの方法である。ここの安定したtransfectionの発見のプロトコル。

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安定したTransfectionのプロトコルプロトコルはソートを下記によってリンクする: 衝突 & アルファベット

24-Well皿のFuGENE 6 - http://www.signaling-gateway.org/data/cgi-bin/ProtocolFile.cgi/afcs_PP00000261.pdf?pid=PP00000261の未加工264.7のセルのAntisenseオリゴヌクレオチドのTransfection

AfCSはセルライン大食細胞のように未加工264.7のシグナリング蛋白質の表現を処理するのにantisense技術を利用している。これを遺伝子特定のantisenseオリゴヌクレオチド(ASOs)のtransfectionによって達成することができる。次のプロシージャはFuGENE 6のtransfectionの試薬を使用して未加工264.7のセルにASOsのtransfectionを含む。続いて、これらのtransfectedセルからの隔離された総RNAか蛋白質はmRNAまたは蛋白質の打撃のレベルを査定するのにそれぞれ使用することができる。 - [24-Well皿のFuGENE 6の未加工264.7のセルの読まれたAntisenseオリゴヌクレオチドのTransfection]

Electroporation - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3751著DNAのTransfection

脈打った電場がいろいろ動物のセルにDNAを導入するのに使用することができる。 Electroporationは他の技術に屈折するカルシウム隣酸塩DNAのcoprecipitationのようなセルラインをよく使用する。しかし、他のtransfection方法と同じように、試験されていないセルラインへのDNAをelectroporatingための最適の条件は実験的に定められなければならない。 - [Electroporation著読まれたDNAのTransfection]

CHO Lecのセルプロトコルの安定したTransfectant - http://www.cbrinstitute.org/labs/springer/protocols/jun_CHOlec.htmlの確立

CHO Lec 3.2.8.1のセルにNおよびOのglycosylationので4つの独立した突然変異がパスある。アルファグルコシダーゼIの抑制剤のNブチルdeoxynojirimycinと培養されたとき、CHO Lec 3.2.8.1のセルで作り出される糖蛋白質は内部Hの消化力に完全に敏感である。内部Hは最初のNアセチルのグルコサミンの残余間のおよびtrypのような蛋白質容解性そして特別なキャブレター蛋白質の相互作用の維持にとって理想的、であるサイトごとの単一のNリンクされたN-acetylglucosamineを残すchitobioseを裂く。 - [CHO Lecのセルプロトコルの安定したTransfectantの読まれた確立]

誘引可能な遺伝子発現IIIの調整装置としてテトラサイクリン- http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3958

プロシージャの最初の2つの段階で生成される固定してtransfectedセルはターゲット遺伝子の表現のために誘導される。収穫および換散の後で、lysatesはSDS-PAGEおよびimmunoblottingによって分析される。 - [誘引可能な遺伝子発現IIIの調整装置として読まれたテトラサイクリン]

誘引可能な遺伝子発現のプロトコル- http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3986の調整装置としてテトラサイクリン

プロトコルはtranscriptional TRANS活性剤のtTAが自身の表現およびターゲット遺伝子の表現を運転するautoregulatoryシステムを使用する。プロシージャの第一段階はtTA単独でかtTAおよびテトラサイクリン調整されたターゲット遺伝子表現するNIH-3T3セルの安定したラインを生成する方法を記述する。 - [誘引可能な遺伝子発現のプロトコルの調整装置として読まれたテトラサイクリン]

誘引可能な遺伝子発現のプロトコルIIの調整装置としてテトラサイクリン- http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3957

プロシージャのこの段階は既に誘引可能なtTAを表現するセルラインのターゲット遺伝子とのtransfectionを記述する。この例では、ターゲット遺伝子は選択可能なマーカーとしてpuromycinの抵抗を運ぶプラスミッドでtransfected。 - [誘引可能な遺伝子発現のプロトコルIIの調整装置として読まれたテトラサイクリン]