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検索はのために起因する: クローン
カテゴリ: PCRのプロトコル: cDNAの統合のプロトコル
「3匹の' -端」の部分的なcDNAのクローン、mRNA生成するため2つの混合されたベース([T] 17に先行している) GATC/GACおよび一義的な35ベースオリゴヌクレオチドシーケンス(QI-QO)から成っている「をハイブリッド」プライマー(Qtotal、QT)を使用して逆転写される。 拡大はこのシーケンス(Qouter含んでいるプライマーを使用してそれからQo)の部分を行われる(3時で各cDNAに今'結合する-端)および興味、GSP1 (遺伝子特定のプライマー1)の遺伝子から得られるプライマー。 - [3つは'読まれる-標準的な競争のプロトコルを使用してcDNAの拡大を終了しなさい]
標準的な競争を使用して「5匹の' -端」の部分的なcDNAのクローンを生成するため、最初繊維の製品は知られていた遺伝子特定のプライマー(GSP-RT)からの逆のトランスクリプション(プライマー拡張)によって生成される。 それから、多(A)テールはターミナルdeoxynucleotidyltransferase (Tdt)およびdATPを使用して付けられる。 拡大は3つのプライマーを使用して遂行される。 - [5つは'読まれる-標準的な競争のプロトコルを使用してcDNAの拡大を終了しなさい]
カテゴリ: 細胞遺伝学のプロトコル: 蛍光そのままの交配の魚のプロトコル
魚のためのより小さい挿入クローンをマップするための追加スライドの前処理。 Sangerの協会。 - [より小さい挿入クローンをマップするための読まれた追加スライドの前処理]
カテゴリ: 微生物学: 細菌のエシェリヒア属大腸菌の培養基及び版
LBの寒天: Luriaの流体培養基、XGal準備、IPTGおよびampicillin。 ペトリ皿の準備。 軽打HeslopハリスンおよびTrude Schwarzacher、大学レスター- [細菌のクローンの選択のための読まれた寒天版]
カテゴリ: BACsの細菌の人工的な染色体のプロトコル
プロトコルはTAIL-PCRを使用して細菌の人工的な染色体のクローンからの挿入終わりシーケンスの拡大を示す。 増幅された製品はマップする染色体の歩くことおよびゲノムのためのそして直接配列のためのテンプレートとしてプローブとして適している。 プロトコルは米のゲノムの調査で使用された。 - [熱非対称的な織り交ぜられたPCRによるBACsのクローンからの挿入終わりシーケンスの読まれた拡大]
カテゴリ: DNAのプロトコル: Genomic DNAライブラリプロトコル
exon引っ掛けられた製品の拡大そして配列。 - [Exonの装飾および拡大のためのクローンの読まれた分析]
カテゴリ: 細胞生物学および細胞培養: ESの幹細胞生物学および文化
小型南によるESのセルクローンの分析。 ブラッドリーの実験室、テキサス。 - [小型南によるESのセルクローンの読まれた分析]
カテゴリ: ウイルスの処理のプロトコル: M13バクテリオファージの処理のプロトコル
M13 recombinantsのsingle-stranded DNAのサイズを分析する急速な方法。 - [組換えのバクテリオファージM13はの読まれた分析はプロトコルをクローンとして作る]
プロトコルはFITCアビディン(ベクトル実験室、DCSの等級)を使用して検出されるビオチン分類されたBAC DNAを準備するのにGibcoBRLからのBIOPRIMEの反作用キットを使用する。 他の製造業者からの試薬は同様にうまく働くテストされるかもしれない。 下記のものを含んでいる: BACのクローンの分類; エタノールの沈殿物; 交配; ポスト交配の処置/検出。 - [読まれたBAC-FISHのプロトコル]
カテゴリ: 細胞生物学および細胞培養: セルTransfectionのプロトコル
セルtransfection、クローンのスクリーニングおよび盗品のセルクローンのためのプロトコル。 Bjorkmanのグループ。 カリフォルニアI.T - [MDCKのセルのための読まれたカルシウム隣酸塩Tranfection]
カテゴリ: 細胞培養のプロトコル: 昆虫の細胞培養のプロトコル
この方法を使用して、昆虫のセルは4-8本の道のHyQのSFX昆虫に適応するべきである。 ただし、physiochemicalおよび栄養の変更により敏感の、場合によっては適応のためのより8本の道に時間がかかるかもしれないクローンおよびあるセルラインがあり。 - [HyQ© SFX-Insect™媒体への昆虫のセルの読まれた直接適応]
カテゴリ: 遺伝学およびゲノミクス: Genotypingのプロトコル: 突然変異の検出のプロトコル
この方法の目的はgenomic DNAのクローンとして作られたセグメントのtranscriptionally実行中の遺伝子を識別することである。 プロトコル使用交配および親和性の浄化は回復BACのベクトルでクローンとして作られる人間DNAの500kbセグメントに結合するcDNAsをビオチン分類した。 ただし、方法は大容量ベクトルでクローンとして作られるgenomic DNAsの他のクローンに容易に適応させることができる。 - [Genomic大きいDNAが付いているcDNAsの読まれた直接選択はプロトコルをクローンとして作る]
大きいPACのクローンからのDNAを隔離するための急速なアルカリ換散のminiprep方法。 それは標準の修正Qiagenひっくり返す有機性抽出かコラムを使用しない方法をである。 方法作業は必要ならばの上でとてもよくPACのクローンの分析的な制限のダイジェストをするために位取りされ。 - [BAC及びPACからの読まれたDNAの隔離はプロトコルをクローンとして作る]
カテゴリ: 核酸の浄化のプロトコル: DNAの隔離のプロトコル
これは大きいPACのクローンからのDNAを隔離するための急速なアルカリ換散のminiprep方法である。 それは標準の修正Qiagenひっくり返す有機性抽出かコラムを使用しない方法をである。 方法作業は必要ならばの上でとてもよくPACのクローンの分析的な制限のダイジェストをするために位取りされ。 - [BAC及びPACからの読まれたDNAの隔離はプロトコルをクローンとして作る]
カテゴリ: siRNAおよびRNAiのプロトコル
クローンからのdsRNA、プライマーはdsRNAを設計した。 ハーバード衛生学校のショウジョウバエのRNAiのスクリーニングの中心- [読まれたdsRNAの統合のプロトコル]
カテゴリ: 細胞生物学および細胞培養: ESの幹細胞生物学および文化: ESのセル成長の媒体および条件
参照: ミハエルP. Matise、Wotjek AuerbachおよびアレキサンドラL. Joyner (2000年)。 遺伝子の目標とすること: 実用的なアプローチ。 章から第3の目標とされた萌芽期の幹細胞のクローンの生産抜粋されるプロトコル。 アレキサンドラL. Joyner (ED。)、第2版、オックスフォードUnive - [読まれた萌芽期の幹細胞の成長媒体の条件- Taconic Transgenics]
カテゴリ: 幹細胞のプロトコル: 幹細胞文化プロトコル
目標とされたESのクローンの拡張のためのプロトコル。 - [目標とされたESの読まれた拡張はプロトコルをクローンとして作る]
96-Well版のフリーズの萌芽期の茎(ES)のセルクローン。 ブラッドリーの実験室テキサス。 - [96-Well版の読まれたフリーズの萌芽期の茎(ESの)セルクローン]
カテゴリ: DNAのプロトコル: cDNAライブラリプロトコル: cDNAライブラリ構築のプロトコル
DNAの大きいセグメントの散弾銃の配列はバクテリオファージM13のベクトルに続いてクローンとして作られるより小さいセグメントにターゲット領域の任意分裂を含む。 目的はターゲットフラグメントの全体の長さ上の少なくとも5重の適用範囲を提供する重複のクローンのライブラリを作成することである。 - [任意にDNAを重複することのライブラリの読まれた生成はプロトコルを挿入する]
カテゴリ: イーストプロトコル: イースト核酸のプロトコル: イーストPCRのプロトコル
pYAC4の左右どちらかアームが方向を変えるどちらかの人間の挿入そして部分を両方含んでいるYACのsubclonesを識別するため。 特定YACのクローンに連続的な人間の挿入があるか、またはcoクローニングイベントが発生したかどうか歩いているこれらのクローンの識別はYACの染色体をして必要決定にまた有用のである。 ベクトルアームシーケンスはBamHI-PvuIIの倍のダイジェストからのpBR322フラグメントを使用して識別される。 - [YAC Subcloneライブラリプロトコルの端のクローンの読まれた識別]
カテゴリ: 細菌の遺伝学のプロトコル
pENTRYおよびpDESTのベクトルが両方細菌の選択のための同じマーカーを含んでいる場合の肯定的なゲートウェイの表現のクローンの識別のためのプロトコル。 プロトコルは得るのに困難なベクトル組合せが互換性のある抗生の抵抗のベクトルにpENTRYのクローンかpDESTのクローンを変換しないで適切な表現のクローンを効果的に使用することができる方法を記述する。 - [肯定的なゲートウェイの表現の読まれた識別はプロトコルをクローンとして作る]
カテゴリ: ウイルス文化および隔離のプロトコル: ウイルス文化プロトコル
5つのmlの液体のlysatesはわずか多数のlambdaのクローンからのDNAが必要なとき準備される。 lysatesは接種材料として標準的なlysateまたは100倍の増幅されたバクテリオファージ「macroplaque」の10 - 20 ulを使用して作ることができる。 - [バクテリオファージのLysatesの読まれた液体のプロトコル]
カテゴリ: 細胞培養のプロトコル: セル保存およびセルフリーズのプロトコル
特別な処理は実行中のコレクションのためにlysateを準備するために必要とならない。 次のプロシージャはアーカイブのコレクションでlambdaのクローンの長期保管に使用するべきである。 バクテリオファージは7% DMSOを含んでいる媒体で薄くなり、-80の摂氏温度でフリーズされる。 - [読まれた長期Lambdaのバクテリオファージの記憶のプロトコル]
カテゴリ: Microinjectionのプロトコル: DNAのプロトコルのMicroinjection
コアは合計同じ突然変異のための1-2匹のクローンを使用して2つの連続した日に注入される40のblastocystsと1つの注入を定義する。 、1つの注入の費用の情報に関しては価格設定のページを参照しなさい。 - [BlastocystsへのマウスESセルの読まれたMicroinjection]
カテゴリ: 抗体のプロトコル: 抗体の生産のプロトコル
Monoclonal抗体の生産。 下記のものを含んでいる: マウス免疫; 出血マウス; Hybridomaの融合; 肯定的なクローンのための試金; 拡大の陽性のクローン。 - [読まれたMonoclonal抗体の生産]
このプロトコルは生成する方法のプロトコル萌芽期の茎(ES)のセルクローンをtransfected。 このシリーズの前のプロトコルはESのセルのElectroporationのためのプロトコルである。 シリーズの次のプロトコルはTransfected ESのクローンの離解、拡張、およびフリーズのプロトコルである。
このプロトコルはサイトのtranformationのために指示したdsDNAの突然変異誘発を推薦されるBMH 81-17のmut Sの緊張のelectroporationを記述する(二重残されたDNAのサイト指示された突然変異誘発のプロトコルを見なさい)。 BMH 81-17のmut Sは不適当な組み合わせ修理不完全な(mut S)エシェリヒア属大腸菌の緊張である。 2つの突然変異がDNAの複製の最初の円形の間にcosegregateを決定する確率はこの緊張で高められる。
プロトコルはtransgenicマウスのためのベクトルを目標とすることのデザインのための汎用考察を与える。 プロトコルはノックアウトのそしてベクトルそしてhomologously組み変えられた萌芽期の幹細胞を作り出すための作戦の一部たたのデザインの先端を共有する。
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