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カテゴリ: 一次電池隔離および文化プロトコル: レーザーはMicrodissectionのプロトコルを捕獲する: LCMのプロトコルのためのティッシュの準備
サンプルからのLCMの隔離集団の特定のセルかティッシュは顕微鏡のスライドに取付けた。 サンプルはmicrocentrifugeの管のふたに接続する熱可塑性のフィルムを通して見られる。 レーザーのパルスのアプリケーションによって引き起こされる集中させた熱はそれ以上の分析のために収穫することができる興味のセルに膜を溶かす。 RNAおよび蛋白質は隔離されたセルから浄化することができ遺伝子発現の詳細解析を許可する。 このプロトコルは3つの段階に分けられる。 - [読まれる(LCM): 凍結するティッシュのブロックの準備および区分および隔離されたCelからのRNAの浄化]
カテゴリ: 免疫学: Chemotaxis
12-well Chemotaxis区域のプロトコル。 区域を準備し、準備し、そして返答のセルを追加し、フィルターを除去し、拭き、そして汚す。 Neuroprobe - [読まれた12-well Chemotaxis区域のプロトコル]
カテゴリ: 細胞生物学および細胞培養: 流れのCytometryのプロトコル: 流れCytometryのためのプロトコルを汚すDNA
拡散を測定するのに増殖のセルのDNAの複製の5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU)の結合が使用することができる。 このプロトコルはcytometry流れによってBrdUを組み込んだセルの識別を可能にする。 - [読まれた細胞増殖の試金のために汚れる5-Bromo-2-Deoxyuridine (BrdU)および7アミノアクチノマイシン(7AAD)]
カテゴリ: 遺伝学およびゲノミクス: 蟹座の遺伝学のプロトコル: Heterozygosityのプロトコルの損失
分析のためのDNAは塩の沈殿物を使用して浄化される。 方法は穏やか、長い染色体の繊維の破損を限定し、そしてフェノールおよびクロロホルムの使用を避ける。 それはホルモンの受容器の分析に服従した、および血液サンプル培養されたセル、胸の腫瘍のティッシュとの使用のために適している。 heterozygosityの試金の損失はマルチプレックスPCRを使用して分類される各プライマーペアのどれが別のfluorophorと、で行われる。 - [腫瘍のゲノムの狭いところによって削除される染色体領域を定義するマルチプレックスPCR方法読まれて]
カテゴリ: プラント生物学のプロトコル: プラント蛋白質、ペプチッドおよび抗原
pHは重要なパラメータ制御生きているセルの多くの新陳代謝および信号を送るパスである。 組換えの蛍光pH表示器(pHluorins)はモニタリング細胞pH.のための流行に入って来た。 それらは最も普及したAequoreaビクトリアGFP (AvGFP)から得られる。 ここでは、私達は蛋白質がオレンジからPtilosarcusのgurneyi (PtGFP)を示し、プラントの表現そして使用のためのpHluorinsと特性をseapen新しい蛍光pHレポーターを比較する。 - [プラントの表現のための新しい蛍光pHのプローブ読まれて]
カテゴリ: 顕微鏡検査のプロトコル: 住セルイメージ投射プロトコル
このプロトコルは環境の二酸化炭素制御なしで直立物の培養された哺乳類セルまたは逆にされた顕微鏡の連続的な長期観察を可能にする密封された準備を記述する。 準備は少なくとも100時間良質イメージ投射そしてよいセル実行可能性に一貫した光学条件を可能にする。 - [培養されたセルの長期観察のための密封された準備読まれて]
培養されたセルの長期観察に密封された準備にサポートスライドの構築の必要な細部のプロトコル。 - [培養されたセルの長期観察のための密封された準備読まれる: サポートスライドの構築]
カテゴリ: ウイルス文化および隔離のプロトコル: ウイルスの隔離のプロトコル
組換えのアデノウィルスの急速な生成のための簡単だったシステム。 下記のものを含んでいる: 細菌のセルのRecombinantsの生成; 293か911のセルのウイルスの生産; 高い力価のウイルスの在庫の準備。 - [組換えのアデノウィルスの急速な生成のための簡単だったシステム読まれる]
カテゴリ: 核酸の浄化のプロトコル
セルおよびティッシュからのDNA、RNAおよび蛋白質の同時準備のシングル・ステップ方法のためのプロトコル。 総RNAの収穫はティッシュまたはセルソースによって決まるが、ティッシュか5-10のµg/106セルを開始する4-7 µg/mgの範囲に一般にある。 重要: ジエチルpyrocarbonate (DEPC)とのこのプロトコルで-扱われたH2O使用されるすべての試薬を準備しなさい。 - [セルおよびティッシュからのDNA、RNAおよび蛋白質の同時準備のためのシングル・ステップ方法読まれて]
カテゴリ: プラント生物学のプロトコル: プラント遺伝学のプロトコル
中期の染色体の分析のために、含んでいるどのティッシュでもセルを分けて使用することができる: ルートはプラント鍋の端で最近育てられたルートからの若い実生植物から、ひっくり返るまたはhydroponic文化はすべて適している。 また、つぼみ、葯、心皮または葉または頂点のmeristemsは使用することができる。 中期の人目を引く試薬を含んでいる。 - [プラント中期の染色体のプロトコルの読まれた蓄積そして固定]
カテゴリ: Cytoskeletonのプロトコル: アクチンミオシンのプロトコル
PhalloidinはF-actinにとりわけ結合し、蛍光付けられたphalloidinは反アクチン抗体を使用して見られる汚損パターンに非常に近いアクチンをセルで骨組ある意味では汚す。 - [固定イースト菌のプロトコルで汚れる読まれたアクチン]
カテゴリ: 細胞培養のプロトコル: 昆虫の細胞培養のプロトコル
このプロトコルは5本の道のHyQのSFX昆虫のserum-free浮遊培養にFive™高い(BTITN4)のセルを適応させるように設計されている。 全体の適応プロセス取得は浮遊培養でおよそ2週および生じる適応させたセル16のそして20時間および最小の群生のダブルタイムを過す。 - [HyQ© SFXの昆虫媒体へのFive™の高いセルの読まれた適応]
カテゴリ: 一次電池隔離および文化プロトコル: 哺乳類の細胞培養のプロトコル
serum-free媒体にセルラインを適応させる多くの方法がある。 protein-free媒体にhybridomasを適応させるために設計されている5つの方法は示される。 これらのプロトコルは特定のセルラインおよび状態のためにある修正を必要とするかもしれない。 - [読まれるセルをSerum-Free環境のプロトコルに適応させる]
カテゴリ: 薬理学および毒物学のプロトコル: 細胞毒性のプロトコル: 細胞培養のプロトコルの細胞毒性の試金
テスト物質の毒性を査定するためにL929マウス繊維芽細胞のセルの使用がagaroseオーバーレイ試金で生体外で培養したプロトコルdescibes。 試金はDraizeのウサギの目テストに代わりとしてテスト物質(例えば界面活性剤基づかせていた製品)の苛立ちの潜在性の査定に有用かもしれない。 - [読まれたAgaroseは試金のプロトコルの上にあった]
カテゴリ: 細胞生物学および細胞培養: ESの幹細胞生物学および文化
ESのセルおよび8つのセル段階の胚の集合。 Bowtellの実験室。 - [ESのセルおよび8つのセル段階の胚の読まれた集合]
カテゴリ: 幹細胞のプロトコル: 幹細胞文化プロトコル
マウスmorula段階の胚が付いているESのセルの集合のためのプロトコル。 下記のものを含んでいる: 集合の壁の準備; ESのセル準備; 胚の準備および集合。 - [マウスMorula-の段階の胚のプロトコルのESのセルの読まれた集合]
マウスMorula状態の胚が付いているESのセルの集合。 オックスフォードの実用的なシリーズは近づく。 - [マウスMorula状態の胚が付いているESのセルの読まれた集合]
mESCsの効率的な派生。 等Bryja、明白な2005の幹細胞。 - [マウス萌芽期の幹細胞の派生のための効果的な方法読まれる]
固定セルを汚すための簡単な、例外なく適用できる方法はセルをpermeabilizeのに洗剤および蛋白質分解処置を利用する方法があるように、示される。 さらに、DNA内容の相違に基づいてそれに続く培養のための生きているセルをソートするために本質的に使用されるHoechst 33342と汚れるsupravitalセルはまた記述されている。 また示されるパラフィン埋め込まれたティッシュから隔離される細胞核の汚損のための方法およびDNA内容頻度のdeconvolutionは… - [流れのCytometryのプロトコルによる細胞DNAの内容の読まれた分析]
このプロトコルはapoptotic核のpropidiumのヨウ素化合物(PI)の分類の後でcytometry流れを使用してDNAの分裂の分析に方法を提供する。 Apoptoticの核はセルやchromatinの凝縮から低分子量のフラグメントの拡散のために正常な同等よりより少しを汚す。 - [個々の核のプロトコルのPropidiumのヨウ素化合物(PIの)蛍光性]を使用してDNAの分裂の読まれた分析
このプロトコルは固定apoptoticセルのpropidiumのヨウ素化合物(PI)の分類の後でcytometry流れを使用してDNAの分裂の分析に方法を提供する。 cytometry流れは明らかにする細胞周期のヒストグラムのsubdiploid領域のapoptotic核を… - [エタノールの固定のプロトコルの後で汚れるPropidiumのヨウ素化合物(PI)]を使用してDNAの分裂の読まれた分析
カテゴリ: 細胞生物学および細胞培養: Apoptosisのプロトコル: Apoptosisの分析
込み合いの試金を使用してDNAの分裂の分析。 等Shailaja Kasibhatlaによって、込み合いの試金は[3H]チミジンが付いている循環のセルの核DNAを分類し、ガラス繊維フィルターのサンプルを収穫することに基づいている。 Apoptosisは特定のサンプルの減らされた放射能に終ってガラス繊維フィルターを、通るには十分に小さいDNAのフラグメントを生成する。 細胞毒素Tのリンパ球(CTL)が仲介するCell-mediated細胞毒性またはセル殺害はまたこの技術によって測定することができる。 - [込み合いの試金(必要な予約購読)]を使用してDNAの分裂の読まれた分析
カテゴリ: セル細胞器官のプロトコル: Mitochondriaのプロトコル
JC-1汚損の技術は意思とそのままなDY検出するために実行可能なセルを開発された。 このためJC-1は赤い放出を与えるJ総計の形成以来のミトコンドリアの作業のマーカーとして、である可逆機能する。 従って高いDYが付いているセルはJ総計を形作るそれらであり高く赤い蛍光性を示す。 従って一方で、低いDYが付いているセルはJC-1が(または再取得しなさい)単量体形式を維持する緑の蛍光性だけ示すセル、である。 - [敏感な蛍光プローブJC-1とのミトコンドリアの膜の潜在性の読まれた分析]
カテゴリ: RNAiの技術のプロトコル
プロトコルは感覚およびantisense siRNAの繊維をアニールするためにプロシージャをデュプレックスを形作る記述する。 デュプレックスは培養されたセルにそれからtransfectedできる。 - [siRNAのデュプレックスのプロトコルを作り出す読まれた焼きなましのsiRNAs]
カテゴリ: 細胞生物学および細胞培養: 流れのCytometryのプロトコル: Apoptosis Cytometryのプロトコル
蛋白質の最近検出された系列に、anticoagulantの特性が付いているannexins属する、Annexin Vはapoptoticセルの検出の役に立つツールであると証明したCa2+の前でPSのような負荷電のリン脂質に優先的に結合し、phosphatidylcholineおよびsphingomyelineに最小の結合を示すので。 セル膜に結合するAnnexin Vの測定によって分析されるPSの非対称の変更はと関連付けられた形態学上の変更の前に検出された… - [Annexin読まれたVのプロトコル]
Lambdaのバクテリオファージのプロトコル大きいDNAの準備
bacteriophagemid含んでいる細菌および助手のバクテリオファージを使用してsingle-stranded DNA (ssDNA)の生産そして隔離を記述する単一の残されたプラスミッドDNAの隔離のプロトコル。 助手のバクテリオファージが付いている宿主細胞の伝染はバクテリオファージにssDNAの包装を可能にする。 ssDNAはバクテリオファージの粒子からそれから隔離することができる。
DNAのマイクロアレイはスライドガラスの基板にロボティック装置によって「斑点を付けられる」興味の遺伝子に補足DNAの分子の発注された整理である。 セルの遺伝子の表現はマイクロアレイと興味のセルのmRNAからのcDNAを準備し、マイクロアレイへの交配を測定することによって監察することができる。 このプロトコルはアレイで斑点を付けられるcDNAに交配のためのプローブとして使用のためのgenomic DNAの分類を記述する。
簡単なショウジョウバエのティッシュ文化セルtransfection方法。
TubulinはGTPの37°Cの孵化のtubulinによってmicrotubulesに重合する。 核形成のシードは目的がmicrotubuleの延長を試金するとき追加される。 Tubulinはまたtubulinをリサイクルするか、または蛍光に分類されたtubulinのmicrotubulesを分類する目的のために重合させることができる。 ハーバード大学のTimothy Mitchison著プロトコルに基づく。
人間mRNAのプロトコルからの蛍光DNAのプローブのこのマイクロアレイのプロトコル準備は蛍光染料、DNAのマイクロアレイに人間mRNAからのcDNAの統合およびプローブの交配に続くCy3およびCy5と分類されるプローブの生産を記述する。
フェノールのクロロホルム抽出およびGuanidiniumの酸のチオシアン酸塩を使用してシングル・ステップのRNAの隔離のプロトコル。 このRNAの隔離方法はguanidiniumのチオシアン酸塩が同時にセルを分離でき、最初のRNAの隔離のステップの間の作動しない細胞RNAsesが方法のシングル・ステップを可能にするという事実を使用する。
Microinjectionは準備のプロトコルをピペットで移す。
ガラスmicroinjectionの酸性染料で色落ちすることはプロトコルをピペットで移す。
分子に側面図を描くことのためのプロトコルを埋め込むことをパラフィンで処理しなさい。 プロトコルを埋め込むこのパラフィンはエタノールの固定の後のセクションにティッシュの処理を記述する。 分子に側面図を描くことは(MP)さまざまなセルタイプおよび病気プロセスのRNAの表現または蛋白質の表現の全体的なパターンを視覚化するのに使用されている技術である。
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