インビトロ再構成はプロトコルを作成する

このプロトコルはインビトロアセンブルされたchromatin からのトランスクリプションの単一の円形を可能にするインビトロトランスクリプション試金を記述する。トランスクリプションの多重円形からの結果を用いるトランスクリプションの単一の円形しか測定しない試金の受容器またはtranscriptional のcoactivator の作業を比較することはそれらの要因によってtranscriptional の活発化のメカニズムを明瞭にするのを助けることができる。- [前 ヒーラセルを使用してアセンブルされたChromatin のテンプレートからのインビトロトランスクリプションの円形読まれたAssay:Single]

実験室のRNA を総合する機能は多くのtechniques.Radiolabeled に重大であり、小規模のトランスクリプション反作用で生成されるnonisotopically 分類されたRNA のプローブはしみの交配及びヌクレアーゼの保護試金で使用することができる。この記事は情報を含んでいる: トランスクリプションのための条件、RNA のPhage ポリメラーゼ、テンプレートオプション: プラスミッド、PCR プロダクト、Oligonuclotides およびDNA 、感覚またはAntisense 、慣習的なまたは大規模の統合、インビトロトランスクリプションのためのプロダクト。- [インビトロ トランスクリプションの読まれた基本的な情報]

あなたが気づいているに必要がある特定のパラメータで情報を提供するeukaryotic インビトロ変換システムを使用するとき。下記のものを含んでいる: DNA のテンプレートの考察; 蛋白質の分類; 非放射性蛋白質の分類。- [読まれた Eukaryotic インビトロ変換システム]

このプロトコルはそのままなセルのxenobiotics のプロスタグランジンのH によってsynthase 仲介される新陳代謝に調査でSEMV のセル(ラムの精液小胞から得られるセルライン) の使用を記述する。- [Prostagland H Synthase (- PHS) の調査のための読まれたインビトロモデルXenobiotics の仲介されたGenotoxicity]

ショウジョウバエKC またはヒーラ核エキスのインビトロ接続の反作用のためのプロトコル。プロトコルは下記のものを含んでいる: プロシージャ、解決、BioReagents および化学薬品およびプロトコルヒント。- [ショウジョウバエ KC またはヒーラ核エキスの読まれた試験管内で接続の反作用]

インビトロトランスクリプションのためのプロトコルおよびつながれたreticulocyte のlysate システムを使用して変換。蛋白質ゲルのランダムサンプルをテストするようにこのプロトコルは設計されている。反作用の上でそれに応じて位取りしなさい。プロトコルは下記のものを含んでいる: プロシージャ、解決、BioReagents および化学薬品およびプロトコルヒント。- [Reticulocyte つながれたLysate システムを使用して読まれたインビトロトランスクリプションそして変換]

このプロトコルと、permeabilization 前のRNA のポリメラーゼによって特定の遺伝子から始められたコピーは測定することができる。核エキスの代りに、セルを使用されるpermeabilized 。情報を含んでいる: セルのPermeabilization; インビトロトランスクリプション反作用(雨水); RNA の分離; 交配のためのスロットしみの膜の準備; 硝酸セルロースの膜の交配; 核酸に[ 32P ] GTP の結合を定めるトリクロロ酸の沈殿物- [Permeabilized の セルを使用して読まれたインビトロトランスクリプション試金(雨水の試金)]

インビトロトランスクリプションのためのプロトコル。情報を含んでいる: 熱いトランスクリプション反作用、ノートおよびトラブルシューテ-ィング。- [読まれた インビトロトランスクリプションプロトコル]

SP6 ポリメラーゼのプロトコルのインビトロトランスクリプションのためのプロトコル。- [SP6 ポリメラーゼのプロトコルの読まれたインビトロトランスクリプション]

イースト核エキスが付いているインビトロトランスクリプションのためのプロトコル。調理法をのための含んでいる: 5x アセテートのトランスクリプションバッファ; クレアチンのphospho のキナーゼ; Phospho のクレアチン; 停止組合せ; ha + 0.1 のM のカリウムのアセテート; 5x グルタミン酸塩のトランスクリプションバッファ(5 ML) 。プライマー拡張試金のためのプロトコルをまた含んでいる。- [イースト 核エキスが付いている読まれたインビトロトランスクリプション]

プロトコルはCFTR のインビトロ変換のための一般手順そして条件の輪郭を描き、インビトロ変換されたプロダクトを使用してある試金を輪郭を描く。CFTR のコアglycosylation はER に起こる。この処理ステップのための試金は基本的なインビトロ変換の混合物にmicrosomal 膜の付加を必要とする。このプロトコルは考慮にこれを入れる。- [CFTR のための読まれたインビトロ変換の試金]

プロトコルはCMV 即時の早い促進者からの雨水のコピーを提供する肯定的な制御テンプレートと同様、インビトロトランスクリプションのための必要なコンポーネントのすべてを含んでいるシステムを記述する。このシステムは雨水のトランスクリプションのために設計されている。代わりに、トランスクリプションプロダクトはプライマー拡張によって分析することができる。- [読まれた 核エキスのインビトロトランスクリプションシステム]

試験管内で接続のためのKC の核エキスの準備のためのプロトコル。プロトコルはセルの4 リットル毎にのためのエキスの3.4 ML を作る(最初のセル集中によって) 。プロトコルは下記のものを含んでいる: プロシージャ、解決、BioReagents および化学薬品およびプロトコルヒント。- [試験管内で 接続のためのKC の核エキスの読まれた準備]

メッセンジャー依存したウサギのreticulocyte のlysate の準備のためのプロトコル。Informamtion はまたテストにlysate がヌクレアーゼの不活性化をことをする前に働いていることを追加した- [メッセンジャー依存した ウサギReticulocyte Lysate の読まれた準備]

ウサギのreticulocyte のlysate のcell-free システムの準備のためのプロトコル。プロトコルは情報が含まれている: 解決; BioReagents および化学薬品およびProtcol のヒント。- [ウサギの Reticulocyte Lysate セル自由なシステムプロトコルの読まれた準備]

プロトコルは情報が含まれている: 膜の準備; 1 段階の反作用; 膜の正常な量を使用して2 段階の反作用; 膜の低い集中を使用して2 段階の反作用。- [イースト のGolgi の輸送の反作用へのインビトロ細胞質網状質のための読まれたProtcol]

このプロトコルはインビトロ変換の試金で使用することができるクローンとして作られた遺伝子からRNA のコピーを作り出す。- [RNA のインビトロトランスクリプションのための読まれたプロトコル]

プロトコルはRNA のポリメラーゼIII を(選択のエキスまたは蛋白質を使用してポールiii) のトランスクリプション記述する試金。ポールIII は5S RNA 、tRNAs 、および他の小さいRNAs を転写する為に責任があるポリメラーゼである。4I.-Amanitin は試金のポールII のトランスクリプションを禁じる。新し転写された、radiolabeled RNA は尿素のポリアクリルアミドゲルの電気泳動に従がって放射線写真法によって視覚化される。- [ポリメラーゼ III のインビトロトランスクリプションのための読まれたプロトコル]

インビトロトランスクリプションプロトコルによるRNA の拡大。DNA のmicroarrays のDNA の分類及び交配のプロトコルを含んでいる。- [インビトロ トランスクリプションによるRNA の拡大のための読まれたプロトコル]

プロトコルはTranswell のインビトロ移行の試金のプロシージャが含まれている。- [TRANS よ 移行の試金のための読まれたプロトコル]

興味の遺伝子を表現するセルから隔離されるこのプロトコル核で実行中にセルを収穫されたその時に転写していたRNA のポリメラーゼの分子によって初期のRNA のコピーに組み込まれるradiolabeled UTP とincubated 。RNA の統合の少しだけdenovo の開始が隔離された核に起こるので、ターゲット遺伝子のトランスクリプションは硝酸セルロースかナイロンで固定するターゲット遺伝子の超過分へのradiolabeled RNA を交配させることによって測定することができる- [試金 でランされるTranscriptional のための読まれたプロトコル]

mitotic スピンドルアセンブリを試金するためにこのプロトコルはインビトロ反作用を記述する。Xenopus の卵から、tubulin なされる試金の使用のCytostatic 要因エキスおよび準備された精液の核とfluorescently 分類される。スピンドルアセンブリはimmunofluorescence の顕微鏡検査によって監察される。- [読まれた プロトコルスピンドルアセンブリ試験管内で]

T3 、T7 またはSP6 によってphage 符号化されるRNA のポリメラーゼを用いるインビトロトランスクリプション反作用が広く適切な促進者を含んでいる組換えのベクトルからのRNA を総合するのに使用されている。多量の特定のRNA の生産は交配のプローブ及びインビトロ変換の調査の準備で貴重である; RNA の接続のためのribozymes 、rRNA 、SRP 、antisense のRNA および基板の統合では; そしてRNA 蛋白質の相互作用の調査で。- [読まれた プロトコル: Microcon またはCentricon の遠心フィルターとのインビトロ総合されたmRNA の浄化]

インビトロトランスクリプションシステムはRNA のトランスクリプションのプロダクトP1420 、P1430 、P1440 、P1450 およびP1460.Includes の情報およびプロトコルの使用説明を試験管内で含んでいる。高特定作業のラジオによって分類されるRNA のProbes;Determining のパーセントの結合のDNA のテンプレートPreparation;Synthesis およびプローブインビトロ変換のためのRNA;Capping の多量のRNA のunincorporated nucleotides;Synthesis のTranscription;Removal の後のDNA のテンプレートの特定のActivity;Removal の情報。- [読まれた Riboprobe のインビトロトランスクリプションシステム]

トランスクリプションランで隔離された核のトランスクリプションの規則を監視する。プロトコルは下記のものを含んでいる: 雨水のコピーのトランスクリプション反作用、アルカリ加水分解、フィルターの準備および交配ランの核の準備。下記のものを含まれている解決: DNase の解決、交配の組合せ、Denhardt の解決(100X) 等。- [トランスクリプション プロトコルの読まれた実行]