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ゲルのトリプシンの消化力のプロトコル

ゲルのトリプシンの消化力に何が丁度あるか。ゲルのトリプシンの消化力ののゲルのトリプシンの消化力そしてプロシージャで約学びなさい。

ゲルのトリプシンの消化力はスライスする: 導入

�&リアクリルアミドゲルの電気泳動は複雑な生物的サンプルの蛋白質を分けるのに使用される共通の実験室プロシージャである。二次元の(第2) ゲルの電気泳動の開発は表示蛋白質に方法をdifferentialy 提供し多くのたくさんの数量化解析をたくさんの蛋白質にかつて許可する。制御と実験条件間の第2 ゲルパターンの相違の分析によって、1 つは癌のようなある条件の下で今蛋白質の表現および新しい蛋白質の統合に対する効果を定めることができる。

�&リアクリルアミドゲルのペプチッドのTryptic 消化力は直接プロトコルをスライスする 

直接�&リアクリルアミドゲルで消化しランされた、Coomasie と説明する蛋白質を汚れる方法を私達は次の記事で。ゲルのの中の蛋白質の消化によって、ゲルバンドスライスからの蛋白質を溶離するか、またはPVDF/硝酸セルロースの膜に興味の蛋白質を転送する必要性を除去する。

HPLC の分別のない液体クロマトグラフィーの多く分光測定(LC-MS) によってゲル蛋白質の消化力のの直接分析を可能にするこのプロトコルは洗剤を使用しない。

 消化力のゲルの蛋白質の検出限界は蛋白質の約1 pmol 帰宅している。coomasie の汚損に同じような検出限界があるので、かすかに汚されたcoomasie によって汚されるバンドが多く分光測定が検出する十分であることが知られている。

  Shevchenko 等はnanospray 多く分光測定によって銀によって汚されたゲルの分析の消化力を出版し、このプロトコルはそのプロトコルに基づいている。

ゲルで消化力は参照する:

A. Shevchenko 、M. Wilm 、O. Vorm 、およびM. マン。銀汚された�&リアクリルアミドゲルからの蛋白質の多くの分光配列。分析化学68:850-858 (1996 年) 。