Bioinformatics のプロトコル、DNA のRNA 蛋白質Proteomics
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新しい考えで着くために続くべき規定されたルートがない。直観的な跳躍をしなければならない。しかし相違は直観的な跳躍をしたら中間ステップことをで満ちることによってそれを正当化しなければならないことである。私のケースでは、それは頻繁に私が考えを有するが、一方では中間ステップを記入し、働かない、従って私は~Stephen W. Hawking をそれを与えなければならないことが分ることを試みること起こる
材料
1 。試薬の複雑形成: 割合100:1:1 の次の貯蔵液の混合によって使用の直前に(Vol. によって) 、それぞれ準備しなさい:
解決A: 2% (蒸溜された水のw/v) Na2CO3 。
解決B: 1% (w/v) CuSO4·蒸溜された水の5H2.O 。
解決C: 蒸溜された水の2% (w/v) ナトリウムのカリウムの酒石酸塩。
2 。2 つのN のNaOH を準備しなさい。
3 。使用できるFolin の試薬(商業的に): 1 つのN の集中の使用。
4 。標準: 標準蛋白質(v) 保存される蒸溜された水で2 mg/mL 蛋白質を含んでいる例えば、牛のような血清アルブミンの一部分20.C の貯蔵液をでフリーズされて –使用しなさい。蒸溜された水と貯蔵液を薄くすることによって標準を準備しなさい次の通りことを:
貯蔵液 (.L) 0 2.5 5 12.5 25 50 125 250 500
水 (.L) 500 498 495 488 475 450 375 250 0
conc 蛋白質。 (.g/mL) 0 10 20 50 100 200 500 1000 年 2000 年
方法
1 。0.1 ML のサンプルにまたは標準、0.1 ML の2 つのN のNaOH を追加しなさい。暖房のブロックまたは沸騰水の浴室の10 分の100.C で加水分解しなさい。
2 。水解物を室温に冷却し、1 ML の新たに混合される追加し試薬を複雑形作る。解決が10 分の室温に立つようにしなさい。
3 。0.1 ML のFolin の試薬を、渦のミキサーを使用して追加し、30 の60 分の室温で混合物の–立場を許可しなさい(60 分を超過してはいけない) 。
4 。蛋白質の集中が100 そして2000 .g/mL の間にあったら蛋白質の集中が500 .g/mL の下にまたは550 nm にあったら750 nm で吸光度を読みなさい。
5 。吸光度の標準カーブを最初の蛋白質の集中の機能として計画し、未知の蛋白質の集中を定めるのに使用しなさい。
Jakob H. Waterborg 著プロトコルに基づかせている。
Lowry 等。 J. Biol 。Chem。193: 265-275 (1951 年)
Lowry 方法プロトコル
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