PCRはサイトによって指示された突然変異誘発を基づかせていた

ポリメラーゼの連鎖反応のサイトの突然変異誘発

PCRによって基づくサイトによって指示される突然変異誘発について学びなさい。

(次図表を参照しなさい)

私達がTTCのフェニルアラニンのcodonに変えたいと思うTACのチロシンのcodonの遺伝子を含んでいるプラスミッドから最初に始めなさい。私達がT-Aのペアにオリジナルのペアの(青い)変更する必要があるこれを達成するため。このプラスミッドはGATCシーケンス現在でメチル化するエシェリヒア属大腸菌の正常な緊張から隔離された。メチルグループは黄色で示される。次のステップはこれを達成するために行われる:

繊維を分けるためにプラスミッドを熱しなさい。
私達はそれからTTCのcodonを含んでいる、または逆の補数、GAAをアニールするmutagenicプライマー。各プライマーの変えられたベースはピンクで示される。
私達はそれからPCRの少数の円形を行う(について8)変えられたcodonのプラスミッドを増幅するmutagenicプライマーと。私達は熱-プラスミッドのコピーの間違いを最小化するのに安定したDNAポリメラーゼ--を、Pfuのポリメラーゼのような、使用する。
私達はDpnIとそれからメチル化された野生タイプDNAを消化するためにPCRの反作用のDNAを扱う。 PCRの製品は生体外になされたので、メチル化されないし、切られない。最後に私達は扱われたDNAが付いているエシェリヒア属大腸菌のセルを変形させる。原則的には、変異するDNAだけ変形するために存続する。これは複数のクローンからのプラスミッドDNAの配列によって点検される。

サイトは突然変異誘発を指示した

正常なPCRのための要因

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PCRの記事

PCRはサイトによって指示された突然変異誘発を基づかせていた

PCRの反作用の分析

リアルタイムPCR

突然変異誘発のフォーラムのトピック

糸
糸タイトル/ポスター	最後のポスト	応答	眺め
私は突然変異誘発プロセスをしているが、それを得ない突然変異誘発	08-17-2009 06:16 AM jiajia1987によって」	1	119
サイト指示された突然変異誘発PCRについての私基本的な情報を助けなさいトリプシン	05-01-2008 06:21 PM kmunson779によって」	1	549
サイトはInvitrogen Genetailorを使用して突然変異誘発を指示した satishreddy27	06-19-2007 03:34 PM satishreddy27によって」	0	983

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PCRのフォーラムのトピック

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