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PCR のサンプル及びテンプレートのDNA

PCR のためのテンプレートのDNA そしてサンプル

テンプレートのDNA のための指針及びPCR のためのサンプル:

PCR は見本抽出する:  タイプ、量および純度

タイプのPCR のためのサンプル

あらゆる起源の単一かdouble-stranded DNA はPCR のサンプルであるかもしれない。拡大に使用することができるテンプレートは動物、細菌を、プラント、かウイルスを含んでいる。RNA の分子、総RNA を含んで、多(A+) RNA 、ウイルスのRNA 、tRNA 、またはrRNA の変換は拡大前にこれらをと同時にテンプレート酵素の逆のtranscriptase によっていわゆる補足のDNA (DNA) に使用した場合起こらなければならない(MuLV か組換え、rTth のDNA の�&リメラーゼ) 。

PCR のための材料の量

PCR のために必須開始材料量は単一の分子同様に少しである場合もある。  genomic DNA のマイクログラム量までのDNA によってクローンとして作られるテンプレートのnanogram 量までの基礎、、か105 DNA ターゲット分子までとして最初のPCR のテストのために最もよいがありなさい。

PCR のためのテンプレートそしてサンプルの純度

PCR の拡大のために使用されるDNA のサンプルの純度は高い必要はない。低下させたDNA のテンプレートのsingle.cell 、粗野なセルlysate 、または小さいサンプルは正常な拡大のために通常十分である。サンプル純度の条件はターゲットが増幅された領域を取囲む少なくとも1 つのそのままなDNA の繊維を含んでいること、そしてターゲットと関連付けられる酵素作業を禁じないために不純物がdilute であることなる。、ある拡大のために、長いPCR のようなかもしれないようにそれが、それDNA のサンプルをの品質そして量考慮すること必要があるかもしれないありなさい。例えば: 1. より多くのテンプレートの分子が使用できるとき、サンプル間のcross-contamination か前のPCR の拡大からの持ち越しの汚染によって引き起こされる “偽の” 陽性がより少ない回出て来る。

2 。PCR の拡大が特定性か効率に欠けているか、またはターゲットシーケンスが限られているとき、不十分なプロダクト収穫のより大きいチャンスがある。

3 。PCR に使用できるDNA の開始の一部分は不確かなとき、ターゲットDNA の内容を定めることはますます困難である。