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栄養媒体の細菌文化

栄養媒体の流体�&養基および�&養皿を使用して細菌文化の成長の情報

目録:

細菌文化トラブルシューテ-ィング及びフォーラムのトピック

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栄養媒体定義は何であるか。

"化学的に、すべての他の生体細胞のように、微生物は有機性及び無機窒素およびミネラル塩から成っている; 従ってその微生物を育てることは必要物質のこの3 つのクラス作られる、すべての生きている構造の生命へ必要である酸素とともに使用できるようにである。最終的にある量の湿気はである絶対に必要。" (Besson は。)

食糧は微生物の成長のために与えられる一般用語の栄養素媒体を準備した。多数の微生物はミルク、ブイヨン、等として容易に使用できる栄養媒体でまたはに、容易に育つ。あるmicroorgan isms に広く相違の食糧条件があり、広く異なる成長の栄養媒体のために構成で必要とする。

但し、微生物の使用のためのすべての栄養媒体の準備で適用されなければならない少数の一般ルールがある。これらは、それ簡潔にある:

あらゆる�&養基はなる

1. 成長に必要な物質を含みなさい。
2. 適した反作用であつて下さい。
3. 館外資料からの汚染からの保護をできる容器で含まれなさい。

栄養媒体の分類

�&養基は次のように分類されるかもしれない:

I. 性質、例えば、ミルク、�&テトおよび他の野菜、肉および肉製品、血および血血清、卵、土、等に起こる自然な媒体。

II 。実験室でなされる準備された媒体、すなわち。これらは次のとおりである:

(a) 未知の化学成分の; 例えば、栄養寒天、ゼラチン、等。

(6) 合成物質; 、denitrifying 有機体のための例えば知られている、すなわち、化学成分Giltay の解決。

または次のように:

I. 液体媒体。これらは下記のものを含んでいる:

A. 動物組織および液体の例えば、栄養流体�&養基、血清の流体�&養基、炭水化物の流体�&養基、ミルク、血、硝酸塩のペプトンの解決、Dunham の解決からなされる媒体。

B. 野菜ティッシュからなされる媒体。これらの中にありなさい: モルトエキス(ウワート、イーストエキス、干し草の注入、自然なフルーツジュース、(発酵させたフルーツジュース) ワイン発芽させたオオムギ) 、ビール。

C. 総合的な媒体。

II 。固体媒体。これらのmav は次のように分類される:

A. 、例えばLiquefiable 、栄養寒天、栄養ゼラチン。

非non-liquefiable B. 下記のものを含んでいる: 1. 凝固させて物理的な平均、蛋白性の液体から準備される例えば、媒体によって卵、血血清、等のようなティッシュ溶けることができなく、または総合的な媒体はナトリウムケイ酸塩と凝固した未開地でしかし液体媒体。

2 。未開地、�&テト、にんじん、バナナ、等のような例えば、野菜媒体で固体である媒体。

 

 

練習3 。媒体の滴定

肉からなされる細菌学媒体の滴定は微生物が栄養基板の反作用に敏感であるので、準備の重要なステップである。

プロシージャ。次の方法はミルク、ウワート、りんご酒、�&、フルーツジュース、等を除いて実験室媒体のために、使用される。p. 22 を見なさい。

1 。5 c.c を置きなさい。テストされるべき媒体および45 c.c の。蒸発皿の蒸溜された水の。

2 。活発の沸騰かき混ぜる定数の1 分(酸味として登録する) すべての分解されたを離れて運転するため二酸化炭素。

$ は. 表示器のための1 つのc.c. のフェノールフタレインの解決を追加する。

4 。熱い、' N/20 ナトリウム水酸化物、かケースde mands. としてN/20 塩化水素酸と沸いている間かすかの、できれば間Titrate しかし明瞭なパーマのばら色カラーは終点を示す。このカラーは5 分の間常置に残るべきである。

5 。常態の立方centi のメートルの番号* 立方1000 で現在の酸かアルカリであるより完全なスケールの程度の媒体の反作用を計算し、記録しなさい、

* 解決は正常1 リットルで酸かベースの1 グラムの同等のalent 含んでいるときであると言われる。

酸またはベースのグラムの等量は同等のまたは一塩基酸または月曜日酸ベースの1 グラム分子を中和するその量である。

システムの利点はその1 c.c である。あらゆる常態の解決は丁度酸かベースの貸された等量中和するか、または1 ミリグラムのequiva へ丁度である。(Noyes 、Wm 。A. のChemistry の教科書、1913 年、p. 184 は。)

媒体21 の滴定

indi のcator としてフェノールフタレインを使用して媒体のセンチメートル。

6 。アルカリ媒体は() アルカリ性度の番号の前の印引くa を置くことによって表示される; 従って、15 は媒体がアルカリ15 であるかまたは15 c.c. の正常な酸が中立ize に1 リットルにつきそれ追加されなければならないことを示す。

酸媒体は(+) 酸性度の番号の前の印とa を置くことによって表示される; 従って、+15 は媒体が酸15 であるか、または15 c.c ことを示す。正常なアルカリのtralize それをneu に1 リットルにつき追加されなければならない。

例。

5.4 c.c をtitrating 後ビュレットの読書。

2.0 c.c をtitrating 前のビュレットの読書。

必要なc.c. N/20 のNaOH の番号

5 c.c の酸を中和するため。の

中型の4 c.c 。

5 c.c 。の(100 c.c の1/20 年が。である) 中型必要としなさい

3 。4 c.c 。ent 酸のpres を中和する1/20 正常なNaOH の100 c.c 。媒体の20X3.4 c.c を必要とする。または68 c.c 。1/20 正常なNaOH の。

正常な解決が強さ1/20 の常態の解決の20 倍のであるので、100 c.c 。媒体の68 c.c の1/20 年を必要とする。または3.4 c.c 。中和のための正常なNaOH の; そして1 リットルか1000 c.c 。媒体の10X3.4 を必要とする

c. c. か34 c.c 。中和のためのN/l のNaOH; すなわち、媒体は34 酸である。より完全なスケール。これは媒体のリットルである。

媒体のN/20 酸かアルカリおよび5 c.c. の部分時(45 c.c で。蒸溜された水の) 、1 c.c. の各1/10 年対応する1 個のより完全なスケールに使用される。

反作用の調節。+15 反作用a を媒体に、例えば残すことを、望めば、私達は次のものを持っている:

22 概要微生物学

媒体の酸味

(100 c.c につき+34) 3.4 c.c. 。媒体の

望ましい酸味(+15) 。。100 c.c につき1.5 c.c. 。正常なアルカリの中型量の

追加されるため100 c.c につき1.9 c.c. 。媒体の

または10X1.9 c.c. = 19 c.c 。1000 c.c につきN/l のNaOH 。媒体の

正常な解決がボリューム、すなわち、1 c.c によって等しい強さであるので。N/l の酸はちょうど1 c.c を中和する。N/l のアルカリの、それは容易にこと15 c.c 見られる。媒体の1 リットルで現在の酸を中和するためにN/l のNaOH は必要となるそしてそこにそのリットルに丁度なる15 c.c 。N/l の酸、または私達の反作用が(+ 15) 15 の程度酸であることを言うべきである。他のどの酸性度のためにも望まれる�&イントに酸味を減らすために十分な正常なアルカリを追加しなさい。

媒体の反作用は通常の温度で殺菌の間の、またその後立った上の中和の後で、特に幾分変更する。この変更は高められた酸味の方に、右旋糖で豊富な媒体でマーク付きである。従ってそれがよりもむしろ殺菌の前に得られる図を引用するために使用される時媒体の力価を定めることは必要である。

ミルク、りんご酒、�&、ウワート、およびフルーツジュース

プロシージャ。1 。蒸発皿の測定5 c.c に。適したピペットによって、テストされるべき媒体の。蒸溜された水との50 までc.c. を作りなさい。

熱してはいけない。上記の媒体は揮発性酸をか登録するかもしれない酸として沸騰によって運転され、他の有機性物質を含んでいると同時に滴定の前に熱くしないべきでない

2 。1 つのc.c. のフェノールフタレインの解決を追加しなさい。

3 。最初の常置ピンクが現われるまで、正確なビュレットから、次第にIN/20 NaOH 追加しなさい。

4 。滴定に必要なNaOH の量に注意しなさい。

5 。常に複写をランしなさい。

ミルク23

6 。酸性度としてレコード媒体の1 リットルを中和するために必要となるN/l のNaOH のc.c. の番号。

ミルク

ミルクは次の理由で微生物のための栄養媒体として貴重である: それは多数の微生物にとって自然なnutriment そしてほとんど理想的である。その構成、averag のing の3.40% 脂肪、3.50% カゼインおよび卵白、4.50% の乳糖、0.75% の灰、87.75% はほとんどの微生物のための優秀な形式の食糧を供給するという証拠水をまいたり、である。

多くの細菌の生化学的な作業は搾り出す変更、特にリトマスのミルクでそれらを自己、経る確定的に明らかにする。これらの変更の多数は見られたマクロscopically である。これらのいくつかは次のとおりである:

(a) 酸生産。2 つのヘキソースの分子、1 つのmol を形作るラクトーゼ、乳糖C^IfeOn は() 、最初に逆さになる。右旋糖及び1 つのmol 。ガラクトース。

そしてヘキソースの収穫の各分子乳酸の2 分子:

ヘキソース= 乳酸。

C 6 H 12 6 = 2CH 3 CH(OH)COOH 。

青いリトマスは赤い回る。

(b) アルカリの生産。リトマスはより暗い青になる。この変更は頻繁にpeptonization に伴う。

(c) 減少(リトマスの脱色) 。これはカラリング問題(リトマス) の減少のためにそうなったものである。多くの微生物は水素を作り出す酵素を分泌する。水素はleuco 混合にそれを減らすリトマスと結合する(無色) 。(Methylen の青は条件のようにカラーに。より少なくなる) これは減少およびない破壊であること示されてもよい少数の立方センチメートルのハイドロGEN のperoxid の漂白された文化の動揺によって。リトマスをまた漂白する細菌

24 人大将微生物学

E^O 及び(ミルクのreac のtion によって現在の微生物の種類を示す) 減らされたリトマスをreoxidizes 初期の酸素に水素のperoxid を減らしなさい。再酸化は自然な条件の下でゆっくり起こる。減少はミルクが酸の、アルカリか中立とき起こるかもしれない。

(d) 酸生産によって凝結。カゼインは、ほとんどの蛋白質のような、両性である、すなわち、弱い酸および弱いベースとして両方を反応させることができる。別の方法で不溶解性のカゼインはカルシウム塩との組合せのために(コロイド) 部分的に分解された状態のミルクに、あるためにある: カゼインと以前結合されたあるマイクロ有機体による酸の生産によるカルシウムは、乳酸と、今結合する; その結果凝結を引き起こすカゼインの沈殿物により(凝固) 。Lit のmus は明らかに回された赤である。酸のカードを食べるミルクは+50 の上でtitrate 。

(e) レンネットのカード。凝固はまた媒体が中立または唯一にslightly^ の酸のとき起こるかもしれない。カードのこのプロduction は微生物によって作り出される酵素レンネットのようにa のためにそうなったものチーズ工場のミルクを凝結させるのに使用されるレンネットの処置に類似している。

多くのspore-forming 種類はレンネット作成の有機体のグループの下にある。レンネットのカードは通常peptonization に先行している。

(/) Peptonization 。酸またはレンのネット形成微生物によって作り出されるカードはleav のing 液体乳しようのようにa ただ次第に消えるかもしれない。これはカードを消化し、溶けるする蛋白質分解酵素を作り出すある細菌によって引き起こされる。固体プロteins のこの液化はゼラチン、フィブリン、沸かされた卵白、ミルクカード、等を好んだり、酵素、ペプシンおよびトリプシンの2 グループのためにそうなったものである。

動物ボディのペプシンは酸媒体(胃の現在) でしか機能しない。

動物ボディのトリプシンはアルカリ媒体(腸の現在) でしか機能しない。

リトマスのミルク25 の準備

マイクロ有機体によって作り出される酵素トリプシンのようにpepsinand はある反作用の媒体の作業によってこうして分かれていることができない; これは微生物の種と環境条件と変わる。ミルクの気力のtonization は通常アルカリニュートラル、わずかにかわずかに酸の反作用でよりまれに起こる。

ある有機体はレンネットのカードを形作らないでミルクをpeptonize 。

(g) ガスの生産。これは酸のカードの形成によってミルクの気泡のmation のためのによって特徴付けられ、一般にaccom panied である。非常に一般にカードは縮まり、乳しようの放出を引き起す。

練習4 。リトマスのミルクの準備

器具。新しい分けられるか、またはスキムミルク; titra のtion の器具; N/20 NaOH; フェノールフタレイン(表示器); 5 c.c. のピペット; azolitmin 、2% の解決; 満ちる漏斗; ピンチ雄ん鶏; 生殖不能の試験管; 蒸気のsterili のzation のための器具。

方法。1 。新しい分けられるか、またはスキムミルクは使用されるべきである。全ミルクは脂肪分のために望ましくない。

2 。ミルクの反作用をTitrate 、記録しなさい。ミルクが17 酸の上でtitrates 場合、酸っぱい+15. に反作用が凝結させて合わせられなければミルクを、neutrali のzation の後で、作らない微生物のための好ましい栄養媒体をuncurdled 、従って、力価が20-25 酸の上にあるミルクは廃棄されるべきである。

新しいミルクは12 から18 まで酸味で変わる。フェノールフタレインへの18 の上の酸味のミルクは18 でように酸の着色を示し始める、azolitmin の満足で青いカラーを与えない。

3 。Kahlbaum のアゾのlitmin の標準解決の2% を追加しなさい。リトマスかazolitmin はindi のcator としてただ追加され、十分な強さためにミルクをあらゆる範囲に薄くしないためにであるべきである。

26 概要微生物学

4 。ミルクおよびazolitmin および管完全に混合し、およそ8 c.c を使用する。各管のリトマスのミルクの。

ノート。心配はにより綿のファイバーは管に付着するのでミルクが管の上と接触して来ることを防ぐために取られるべきである。これは"満ちる漏斗の使用によって避けるかもしれない。"

5 つは4 つの連続的な日の20 分の流れる蒸気で熱することによって、殺菌する。ミルクは頻繁にある抵抗力がある胞子のために、殺菌しにくい。管のより大きい大きさを殺菌することを望めば暖房の時は延びるべきである。

注意: 過熱することは(caramelize) 乳糖を変更しがちである。azolitmin のカラーはまた破壊されるかもしれない。これらの変更は好ましくない。

練習5 。グリセリンの�&テトの準備

いくつかのchromogenic 及び病原性のある有機体はグリセリンを含んでいる媒体で特によく繁栄する。グリセリンがこれらの器官のisms の成長を支持する方法は直接脂肪(Bact. Tubercu のlosis) の構築のために利用されるようであるある例で、知られないが。

器具。大きく健全な�&テト; 円柱�&テトのナイフ、かコルクの穴あけ器; 通常のナイフ; タンブラー; ナトリウム車のbonate 、1: 1000 年の解決; グリセリン、5% の解決; 大きい生殖不能の試験管、またはRoux の�&テトの管; 吸収性綿か不足分のガラス棒; 1 つのc.c. のピペット; 蒸溜された水; 蒸気の殺菌のための器具。

方法。1 。注意深く1 個か2 個の大きい�&テトをきれいにしなさい。

2 。円柱�&テトのナイフかコルクの穴あけ器によって、�&テトの切られたシリンダー、4 への6 cm 。長くそして1.5 への1.8 cm 。直径。通常のナイフによって、各部分が形で寒天傾斜に類似しているように斜め切口によって各シリンダーを2 等分しなさい。これらの部分の皮の部分を取除きなさい。

3 。タンブラーの場所はdilute で浸り、(1: 1000) 炭酸ナトリウムの解決* 唯一の24 時間…。

* �&テトの自然な酸を中和するのに炭酸ナトリウムが使用されている。

グリセリンの�&テトの準備

27

4 。それ以上の24 時間だけ水のグリセリンの5% の解決に部分を転送しなさい。

5 。次の通りことを準備される生殖不能の管の場所: 余分大きい試験管1.5 に2 cm を選びなさい。直径及びきれい、乾燥したそれら。吸収性綿またはガラス棒0.5 cm の小さい部分を置きなさい。X2.5 cm 。それぞれの底。綿と差し込み、通常の方法で殺菌しなさい。(Roux の管は。きれいになり、殺菌するただ必要がある)

�&テトの部分をもたらす直前に、約1 c.c を追加しなさい。pi のpette を使用して各管への蒸溜された水の。�&テトは水に触れるべきでない。

6 。連続的な4 の100 時G. で熱することによって殺菌しなさい

20 分の幾日毎日。

図8 。�&テトの管。(Orig. Northrup 。)

注意: 3 及び4 で示される時間は他に�&テト抵抗力があるspore-forming 有機体とのcontamina のtion のために廃棄されなければならない厳しくに付着しなければならない。

参照

SMIRNOW 、M. R.: 値はの�&養基として�&テトをglycerinated 。セント。F. Bakt. 、II Abt. 、Bd 。41 、p. 303 。

28 概要微生物学

練習6 。肉注入の準備

肉注入は、流体�&養基、ゼラチンおよび寒天のように通常の栄養媒体と砂糖の流体�&養基、等としてまた多数の特別な栄養媒体の基礎、である。

これらの方向の下で栄養流体�&養基、ゼラチンおよび寒天の1 リットルをそれぞれ作るために十分な肉注入は前に皮をむかれる。

器具。1.5 キログラム(3 Ibs 。) 精巧に切り刻まれた新しく細いビーフ; 1500 c.c. の蛇口水; 3.5 リットルのagateware のバケツ; 大きい漏斗; リングの立場; 布をきれいにしなさい; 1 リットルの計量カップ; 3 個の生殖不能の1 リットルのエルレンマイヤーフラスコ; 冷却装置; 蒸気の殺菌(望ましいautoclav) のための器具。

方法。1 。3.5 リットルのagateware のバケツの精巧に切り刻まれた、新しく細いビーフの1.5 キログラムに、1500 c.c を追加しなさい。蛇口水の、* 完全に混合し、16 から24 時間だけ涼しい場所(好まれる冷却装置) に立つことを許しなさい。

2 。リングの立場の大きい漏斗をセットアップし、漏斗にきれいな布の部分を置きなさい。漏斗の下に計量カップを置きなさい。

3 。完全にすべてのジュースから押すきれいな寒冷紗を通して肉注入を、こしなさい。1.5 リットルは回復されるべきである。どの損失でも起こったら蛇口水を使用して1500 までc.c. を、作りなさい。

この生じるsanguineous 液体は肉、溶ける塩、extractives および着色の問題の主にヘモグロビンの溶けるアルブミンを含んでいる。

4 。場所500 c.c 。3 個の生殖不能の1 リットルのエルレンマイヤーフラスコのそれぞれの肉注入の。プラグを取り替え、autoclav で30 分の間120 C. で熱しなさい。これは流れる蒸気の長い時間の暖房より安全なプロシージャである。

この暖房の間に熱によってcoagulable アルブミンは沈殿する。

_ それ持あ見つけ必要及びまたもっと便利準備及び殺菌肉注入の前進と準備の別媒体それあ使用、

* およそ500 c.c 。肉の各�&ンドへの水の。

栄養流体�&養基29 の準備

切り刻まれた肉にほとんど一般にある抵抗力があるspore-forming 有機体のため; 時間の経済はまた考察である。殺菌してimmedi は多量そして多様性の市場のための準備の様々なプロセスの間に得られるmicroflora のためにately 、肉注入すぐに分解しない。

新たに切り刻まれた細いビーフからなされた注入は+15 及び+25 より完全なスケールの間で酸味で変わる。反作用が著しく低くまたはより高ければ、ある、とられたりまたは肉注入が使用される媒体の食糧値に有害そうかもしれない微生物処置は。

注入は少しだけ蛋白性の問題を含み、筋肉、あるextractives 、および熱によって凝固しない蛋白質のわずかなトレースと共に変えられた着色の問題の溶ける塩から主に成っている。

練習7 。栄養流体�&養基の準備

栄養流体�&養基はcul のtivating 微生物のために用いられる標準液体である。それは実用的にビーフ茶騙すtaining ペプトンをである。肉注入がいつ殺菌するか沈殿させる凝固させた蛋白性の物質を取り替えるためにペプトン、熱によってcoagulable 溶ける蛋白質は追加される。一部がナトリウム水酸化物によって媒体の酸味の調節で沈殿する炭酸塩取るために塩は追加されるおよび隣酸塩の場所を。

通常の栄養媒体の反作用は表示器としてフェノールフタレインとの約+15 にほとんどの微生物はリトマスに中型の中立でかわずかにアルカリ最もよく育つことが分られるので、合わせられる。

栄養媒体は明確であることが必要となるとき、水が付いているスムーズなのりに減る卵の卵白(か卵の井戸によって打たれる白は) 追加される。凝固によって、卵の卵白は機械的に小さい粒子すべてをsuspen フィルターペーパーを他では通るsion を除去する。

30 概要微生物学

このプロセスは最も有効時卵の卵白のcoagu のlates ゆっくりである。

卵の卵白は約57 C. で凝固し始めるので中型が卵の卵白の付加の前の40-50 C. に冷却されるよいよ結果のために絶対に命令的である。

卵の卵白が、砂糖のようにcoagulable SOL のuble 問題の少量を熱extractives によって含み、微生物食糧として機能するミネラル問題が、栄養媒体の目的はclari のfying 処置のため本質的にである。

器具。500 c.c. 生殖不能肉注入; 500 c.c. の蛇口水; 10 のgms 。ペプトン、Witte; 5 つのgms 。塩; 10 のgms 。卵の卵白(または1 個の卵); 3.5 リットル瑪瑙製品のバケツ; 滴定の器具; N/20 NaOH; N/l のNaOH; フェノールフタレイン(表示器); 蒸溜された水; 5 c.c. のピペット; 大きいかき混ぜる棒; 粗いバランス; 大きいガス・バーナー; 大きい漏斗; 編まれたフィルターペーパー; 満ちる漏斗; 生殖不能の試験管; 生殖不能の1 リットルのフラスコ; 蒸気の殺菌のための器具- 。

方法。1 。置きなさい肉注入(500 c.c は。) のフラスコの内容を瑪瑙のバケツで500 c.c を追加すれば。蛇口水の。

2 。Witte のペプトンの1% 及び塩の0.5% を追加しなさい。

3 。10 のgms を追加しなさい。100 c.c とよく混合された卵の卵白の。蛇口水の。(卵の卵白タンブラーに置かれてのりを形作るために十分な水を追加すれば。スムーズまでかき混ぜなさい。それから残りの水を追加しなさい。1 個の卵* 打たれる健康。代わりになるかもしれない) すべてを完全に混合しなさい。

4 。四十五分の流れる蒸気または30 分の間120 C. のautoclav の熱。

5 。N/20 NaOH とTitrate 。

6 。正常なNaOH か正常なHC1 との+15 に媒体の反作用を合わせなさい。Retitrate は必要ならば再度調節し。

7 。平衡力は重量に注意し。

8 。沸騰はかき混ぜる自由な炎上の15 分stantly 騙す。

* 卵に水を追加することは必要でない。

ゼラチン31

9 。蒸溜された水との蒸発によって損失を釣り合わせ、復元しなさい。

10 。沸騰の熱い直通の編まれたフィルターペーパーが沸騰水の1/2 のリットルとちょうど前に洗浄する間、フィルタに�&けなさい。

11 。明るく、明確であるまで同じペーパーを通して濾液を渡しなさい。

12 。30 の生殖不能の試験管を満たし、およそ8 c.c を使用する。各管のためのこの媒体の。大きい、生殖不能のフラスコに残りの流体�&養基を置きなさい。

13 。流れる蒸気の試験管そして内容を3 つの連続的な日の20 分熱しなさい。

14 。流体�&養基の大きいフラスコを殺菌するためには、4 日20 分の間連続の熱しなさい。

ゼラチン

ゼラチンは細菌学者のツールの1 つである。それ自体、それは2 つのかなう: 微生物の単一種の分離が可能になる蛋白質分解酵素を分泌するそれらの有機体への固体�&養基、技術的な装置、および、それとして窒素の食糧材料として役立つ。

ゼラチンは固体�&養基に使用する最初の物質であることの区別に耐える。この媒体はロバートKoch によって1882 年にorigi nated 、持っている以来革命化した微生物学の科学をだった。固体媒体の導入前に、微生物の単一種の分離は不確実性の多くの難しさそしてある測定をほとんどの場合含んだ。ヨルダンから引用するため: "それは細菌学の大きい発見がこの重要な技術的な改善のかかとで速く続いた、多分現代生物的科学の位置への重要な観察がこのピリオド(1882 年) について。" さかのぼられるべきであるがからの細菌学の上昇不完全のcongeries ことを主張するないあまりであることただの同時発生であることができなく

溶けたKoch の最初版は注ぐによってなされた

32 概要微生物学

ガラスの生殖不能、平らな部分に栄養ゼラチン。前に"ペトリ皿" の使用を用いる満足な版の皮をむくことの難しさに馴染むことの学生はKoch の最初ゼラチン版でに会われたそれらを認める。

ゼラチンは蛋白質、すなわち、窒素の食糧材料である。それはと同時に必要な要素カーボン、水素、酸素、および窒素含んでいる(しかし他の要素は硫黄、リン、等のような、あるかもしれない) 。Schiitzenberger 及びBourgeois に従うその経験的な方式はC7eHi24N24.O29 であるが、そのような方式は主な要素の情報しか与え、1 つが分子の膨大なサイズの考えを形作るようにする; 分子の構造の考えは与えられない。但し、dilute 硫酸との消化によって、ゼラチンはと同様にglycin 、leucin および他の脂肪質のアミノ酸をもたらす蛋白質破壊する。

ゼラチンは動物組織のゼラチンとして動物蛋白質であるが、熱い起こるする。それは繊維状の結合組織の主な固体要素である、しかし軟骨、骨および靭帯のより小さいパーセントにまた見つけられる、albu のminoid のコラーゲンとして、そこにある。これらの様々なソースからのコラーゲンは構成で同一でないし、ゼラチンは相応じて変わる、軟骨からの例えば窒素のより低いパーセントを含んでいること、ゼラチンは他のソースのそれと異なる。

ゼラチン、ボディはコラーゲンの加水分解に起因して、蛋白質またである。(Hofmeister はみなし同等化に従って進むとこの加水分解を:

コラーゲン+ 水= ゼラチン

しかしそのような可変的な構成の物質をあつかう上で、

この種類の経験的な方式にすばらしい重大さがない) 。

商業的に、それはある種類の骨から準備される

そして皮の一部分。これらは選ばれ、洗浄され、そして得られる

ゼラチン33

水によってそして(塩化水素) tively rela のdilute 酸と在庫の流動崩壊プロダクトのわずか可能及び結果として生じる解決のjellying 力形作られるように、熱への少し露出は、破壊されない。

タームゼラチンはラテン系の動詞gelare から凝結するために、得られこの物質の主な属性を、堅くなるか、またはjellying 特性のそれ気にするために呼出す。

ゼラチンはコロイドと呼出される物質のその興味深いクラスに属する。それはクラスの典型的な例、クラスの独特の特性を表わす。クリスタロイドへのマーク付きの対照のコロイドは、互いに不浸透性容易に結晶しないし、拡散しないし、そしてである。コロイドの最終的な粒子は私達が通常物理的な下位区分と名づける、幾分主としてより化学分子何を大いに小さいより; 超マイクロスコープによって数えられたコロイド解決、例えば、赤いコロイド金の小さい粒子の直径はミクロンの6 つのmillimicrons または6,000 である。ミクロンはミリメートルの1 第1000 である。(細菌は大いにより大きいの直径の0.3 から1.0 ミクロンからである通常の顕微鏡によって最も小さい目に見えるの。) 従って反作用は問題の身体検査そして化学変化の中間にゼラチンの特性の考慮によって見られるかもしれないように、立つ。

ゼラチンはかなりの量の暖かい水(冷水でほとんど不溶解性であり) を吸収し、膨れ、熱のアプリケーションに、冷却した上で再度gelatinizes 粘性、粘着性がある解決に、溶けるゼリーをもたらす。ヒドロゲルの名前はこの特性を示すコロイドに適用される。微生物学的な作業のための通常のゼラチン媒体は12% から15% ゼラチンを含んでいる。中型のtem のperatures で乾燥されたとき、ゼラチンは再度redissolved でき、確定的にredried 。この特性からそれは物理的な状態が一度変更されるとき、不溶解性、例えば、カゼイン及びケイ酸酸である他のコロイドとそれを区別する可逆コロイドと呼出される。

34 概要微生物学

100 C. の上の温度、または長い間内側のmittent 殺菌のように100 時C. のゼラチン状の州に少しの間、ゼラチンが従ってある時約130 C. で、かsuperheated superdried それぞれredissolving か、またはresolidifying 力が失われること修正される。superdrying で、redissolving 特性の損失は構成粒子の余りに近い接触、物理的な州の変更に置かれる; superheated ゼラチンでは、resolidifying 力の損失はゼラチンの分子のdisintegra のtion 、化学現象のために全くおそらくそうなったものである。gelatinizing 特性のこの損失はまた多くの微生物のenzymic 作業によって引き起こされ、崩壊プロセスまたである。

ゼラチンはしかし異なった条件の下でかなり変わる液化�&イントを所有している。通常、12% から15% ゼラチンを含んでいる媒体は溶けるまたは24 に26 C. の近辺の温度で溶けるために、ing は明確な、透過ゼリーに8 に10 C. 時で再度凝固する。結果として、ゼラチン媒体は開発のために22 から24 C. より高い温度を必要としない有機体のためだけに用いられるかもしれない。媒体が室温(20 への21 C で液体。) であるほど準備または殺菌のプロセスで過熱するにより液化�&イントのかなりの低下を、多分最終的に低く引き起こすそれは容易に後のゼラチン媒体が有機体のisola のtion に手近にどのように使用できなかったか見られる。少数のデータは心のこれの固定で助ける。

ゼラチンの凝固の特性は殺菌のプロセスの間に熱することの時の反対の割合で変わる; その溶解�&イントは100 時C で熱することの毎時間の間2 C. の平均で下がる。これはそのような心配が流出の蒸気のこの媒体の僅かの殺菌のゼラチン媒体の準備で、なぜ取られなければならない、そしてなぜ即時の冷却が必要なaftei であるか明らかに作る; 準備のプロセスの各分別。

ゼラチン35

100 C. の上の温度が100 C. のそれより凝固の特性にはるかに有害であるが、112 に20 分の間113 C. または固体�&養基として実用性を損なわないで15 Ibs. Pressure (5 分の間120 C.) でautoclav (7 への8 Ibs. Pressure) で12% からゼラチンの15% 含んでいる媒体を殺菌することは可能である。

圧力(乾燥した蒸気) の下の蒸気のこの使用がsterili のzation を、のでゼラチン、準備のもと、方法、およびより遅い責任からの汚染にもたらしてゼラチン媒体の場合にはほとんど必要表面に多数の非常に抵抗力がある胞子を含むか、または耐えることはほとんど確かである。3 の30 分の間100 時C. の暖房はまたは4 つを均等にしまたはlique の派閥�&イントの低下が断続的な殺菌のプロセスで僅かように考慮されるべきでないこと5 つの連続した日はこれらの胞子が常に暖房及び発芽しないので常に有効、でなく、それの後の24 時間以内に容易に見られるデータを上参照する。

ゼラチンはそれを細菌学作業のために貴重する別の特性を所有している: すなわち、ゼラチンの平板�&養で凝縮の水はペトリ皿のカバーでゼラチンの表面で落ち、こうしてコロニーの形式を抹消し、隔離されたコロニーを近隣の物と汚染されるようにならせる通常(寒天と同じように) 後で集まらない。試験管または版のこの媒体の保存は、生殖不能か再接種されて、こうして寒天とよりはるかに簡単される。

参照

ヴァンDERHEIDE 、C.C.: Gelatinose Losungen のund のVerflussigungspunkt のder Nahrgelatine のアーチ。F. Hyg. 、Bd 。30 1897 年、PP 82-115 。

36 概要微生物学

練習8 。栄養ゼラチンの準備

器具。500 c.c. 生殖不能肉注入; 500 c.c. の蛇口水; 150 のgms 。ゼラチン; 10 のgms 。ペプトン、Witte; 5 つのgms 。塩; 10 のgms 。卵の卵白(または1 個の卵); 水浴室; 温度計; 3.5 リットルの瑪瑙製品のバケツ; 長く重いかき混ぜる棒; 滴定の器具; N/20 NaOH; N/l のNaOH; フェノールフタレイン(表示器); 蒸溜された水; 粗いbal のances; 大きいガス・バーナー; 大きい漏斗; 編まれたフィルターペーパー; 満ちる漏斗; 生殖不能の試験管; 生殖不能の500 c.c 。エルレンマイヤーフラスコ; 蒸気の殺菌のための器具; ラン水浴室か冷却装置。

方法。1 。置きなさい肉注入(500 c.c は。) のフラスコの内容を瑪瑙のバケツで500 c.c を追加すれば。蛇口水の。

2 。混合物に15% ゼラチン、1% Witte のペプトン、および0.5% の塩を追加しなさい。

3 。時折かき混ぜるゼラチン、ペプトンおよび塩を分解するために水浴室のこの混合物を熱しなさい。

4 。40-50 C に冷却しなさい。これは命令的である。

5 。それから10 のgms を追加しなさい。100 c.c とよく混合された卵の卵白の。蛇口水の。スムーズまで(卵の卵白タンブラーに置かれて、のりを形作り、かき混ぜるために十分な水を追加しなさい; それから残りの水を追加しなさい。よく打たれる1 個の卵は。代わりになるかもしれない) すべてを完全に混合しなさい。

6 。四十五分の流れる蒸気または30 分の間105 C. のautoclav の熱。

7 。N/20 NaOH とTitrate 。

8 。正常なNaOH か正常なHC1 との+15 に媒体の反作用を合わせなさい。再再度titrate 、必要ならば調節しなさい。

9 。平衡力は重量に注意し。

10 。沸騰はかき混ぜる自由な炎上の15 分stantly 騙す。

11 。蒸溜された水との蒸発によって損失を釣り合わせ、復元しなさい。

12 。熱い直通の編まれたフィルターペーパーを沸かしている間フィルタに�&けなさい

寒天37

ちょうど1/2 のリットルの沸騰水と前に洗浄されて。明るく、明確になるまで同じペーパーを通して濾液を渡しなさい。

13 。30 の生殖不能の試験管を満たし、およそ8 c.c を使用する。各管のための媒体の。余りを2 つの等しい部分に分け、生殖不能の1/2 のリットルのエルレンマイヤーフラスコに置きなさい。

14 。流れる蒸気で3 つの連続的な日の20 分熱しなさい。

15 。各暖房の直後のラン水浴室のゼラチンを、冷却しなさい。できるだけ少しゼラチンの凝固力の一部分が熱の各アプリケーションと失われるのでゼラチンを熱するために心配は取られなければならない。

16 。栄養ゼラチンの大きいフラスコを殺菌するため、連続の4 日の20 分の熱。

寒天

寒天か寒天(Malay ワード意味"vege テーブルから") 、細菌学作業のために1 種類の固体�&養基を準備することで使用される物質は、インド洋の近くでそして中国及び日本水で見つけられる様々な海藻から準備されるプロダクトである。このタイプの海藻にセイロン島またはJaffna のコケ、ベンガルのisinglass 、等として複数の共通の名前が、ある。様々な種類は食糧のために使用され、貿易はかなりである。

Payen のフランスの化学者の-(about 1859) は、海藻、fol のlowing 方法のGelidium のcorneum からの寒天のゼリーを、得た: 海藻が塩化水素酸の冷たい希釈液のしばらく立つ; 酸は水と数回の洗浄によって取除かれた、そして海藻はアンモナルの冷たい希釈液に置かれた; 次にアンモナルは冷水と繰り返された洗浄によって取除かれた。このプロセスの間に、海藻はミネラル塩、着色の問題、および有機性要素の重量の53% を失った。残りの部分は水で沸いた、

38 概要微生物学

どのプロセスをの間野菜ゼリーが得られたか。無用の沈殿物を後ろ去る解決は従って得られて注がれた。このゼリーは構成が同じとあり野菜ティッシュに存在している; それはゼラチンの準備のコラーゲンがあるように、化学的に変更されなかった。商業寒天は異なった平均による乾燥へのこの解決の蒸発によっておそらく準備される。

寒天は通常長く、細く、灰色がか白いストリップとしてbacteriologist の手に、またはブロックとしてヨーロッパの製造の灰色白い捕虜のder の形で、または特に近年、入って来る。

寒天は、ゼラチンに対して、炭水化物である、すなわち、カーボン、水素および酸素だけの組合せから成っている。窒素のトレースは不純物としてある。基本的なconstit のuents の上記の質的な決定はPayen 、Parumbaru および異なったソースから寒天で決定をしたHueppe によってなされた。確認されるできる限りでは経験的な方式はあらゆる範囲にまだ調査されていない。

しかしゼラチンのような寒天は可逆コロイドである。それは冷水で浸ったり、長い沸騰の後の熱湯、及び上でもっと冷却したまたはより少ない不透明なゼリーに固体ifies で味がなく、無臭の明確な解決に分解する。その水を含んだ解決はフェノールのフタレインに中立またはほぼ中立である; まだ、第20 正常なナトリウムの水和物の低下か2 つはピンクカラーを目で見えるようにして十分である。

寒天のコロイド特性は高温の長続けられた暖房によって、通常の微生物の処置によってゼラチンのそれらがあるように破壊されない。しかし上記の特性は影響を及ぼされ、寒天が分解する液体の反作用によって完全に損なわれるかもしれない。

酸またはアルカリであるどうか、液体の反作用は、すなわちcondensa のtion 水の容解性、固体性、カラー、過透性、濾過性および量に関して寒天に影響を及ぼす。寒天が酸味の液体で分解すれば

寒天39

0.1% HC1 への等量は、寒天、すぐにフィルタに�&ける、冷却した上で凝固しない軽く黄色く、透過、滑り易い、水を含んだ解決である結果として生じる濾液非常に容易に分解する。ハイドロ塩素酸のより小さいパーセントが使用されれば、怯固は起こる(40 C の下で。) しかし従ってゼリーは"" 立たなかったりし、寒天傾斜か平板�&養のために無用にである。多量densation 水をあるまた現在が騙しなさい。

寒天が赤茶色弱いアルカリか中立流体�&養基分解すれば、厚いのゆっくりフィルタに�&け、40 C. で、非常に固体に、不透明すぐに凝固する粘性液体で、乾燥するゼリー、持っていること少し凝縮水を得られる; それは傾斜と版で形をよく保つ。従って固体�&養基として寒天の値はアルカリ性または酸味のcjegree に従って上がるか、または下がる。

しかしアルカリとの中和によって一度寒天の凝固の特性が解決の酸の超過分の存在によって破壊されるとき、この特性決して取り戻すことができないそれは注目されなければならないさらに; 1 manently につき酸はコロイドの可逆性を破壊する。

(中立解決の1.5% 年) の寒天のmelting-point はそれ凝固したら50 C の温度でサーモスタットで立つ時、凝固�&イントが40 C. にあるが97 C. であり。細菌学の目的の場合、使用のための流動状態でこの�&イントの上の温度で流動にしか余りに熱いとき残らないから38 まで40 C. Agar で流動に残る寒天のその形式しか使用することができない; もたらされた有機体の活力は高温によって損なわれるか、または破壊された。

難しさは遅い容解性、気力のcosity および必然的で遅い濾過性のために寒天からの固体�&養基の準備で、見つけられる。その解決(消化力) はの上で、water-bath 、蒸気の滅菌装置、autoclav 、または余分の長い暖房によって述べられるように、自由な炎もたらされる。完全な消化力に必要な時間は3 つの事に左右される: の反作用

40 概要微生物学

寒天が分解する液体、寒天のパーセントの内容、および分解の方法。寒天の解決の反作用の影響は上扱われた。しかし汎用文化使用のために通常の寒天は+15 より完全なスケールになされる(寒天は+30 より完全なスケールの上の難しさと凝固する) 。

1 パーセントの寒天は等しい条件の下により高いパーセントよりsoluble はるかに容易にである。1 のそして1 の半分のパーセントは通常の寒天媒体で使用される量であり幾分より堅く、こうしてより好ましいゼリーを与える。

寒天は自由な炎に最も急速に消化される。、断続的な方法によって寒天のろ過そして殺菌の後で十分に熱されなくて、綿状のprecip のitate は前に明確な媒体で頻繁に現われる。これはautoclav (120 C の温度への服従によってほとんどの場合消えるために作ることができる。15 Ibs.) 。

�&養基のための寒天は時液体、同質に不透明半透明時固体完全に明確な; それは版の深いコロニーを許可するか、または容易に観察されるべき文化を刺すこと十分なtranslucence を有するべきである; それは綿状材料、沈殿物を含むべきでないまたは微生物の後部の典型的なコロニーの開発及び、経験の浅いのにこれらのとして綿またはフィルターペーパーの一枚は、コロニーと、ある時間誤解されるかもしれない。

フィルターペーパー、吸収性綿、またはアスベストスを通して熱い寒天をフィルタに�&けるかわりに底に解決する沈殿物を処理する寒天の�&養基を作る為に、使用された最初の方法ではdur のing 冷却することを; 固体が沈殿物断ち切れた時。この方法は結果として生じる寒天の清らかさが冷却の率に左右されるので、好ましくなかった; より遅い冷却、より完全に沈降起こる。

ゼラチンがあるように、寒天は一般に微生物のための食糧でない、すなわち、ほとんどの細菌の消化が良い酵素によって影響されない。但し、B がある、溶解の寒天の力がある少数の細菌は知られている。

栄養寒天41 の準備

期待されるように、海水にあるBad. Nenckii 及びgelaticus n. SP. (gran) 。寒天のこのcompara のtive inertness はそれを、値がによってhanced どのプロセスを服従させること効力の有能な食糧物質のどのトレースでも現在の微生物によって使い果されるかの間の自然な発酵へ商業寒天をen であるかもしれない固体総合的な媒体の準備のために貴重する。(Beijerinck 。)

寒天は微生物の耕作がゼラチンのmelting-point の上の温度で行なわれなければならない細菌学作業の特別な使用である。この機能はボディのそれの下のtempera のtures の難しさと可能医学の細菌学で取られたすばらしい大またを、同様に多くの病原性のある細菌しか隔離され、育つことができない作った。

参照

スミス、ERWIN F.: プラント病気に関連する細菌。Vol.. I,

PP 31-36 。複数の実例。SCHULTZ 、N. K.: Zur Frage フォンder Bereitung のeiniger Nahrsubstrate 。

セント。F. Bakt 。I. Orig. 、Bd 。10 1891 年、p. 57 。

練習9 。栄養寒天の準備

器具。3.5 リットル瑪瑙製品のバケツ; 15 のgms 。寒天; 10 のgms 。ペプトン; 5 つのgms 。塩; 10 のgms 。卵の卵白(または1 個の卵); 500 c.c. 生殖不能肉注入; 500 c.c. の蛇口水; 滴定の器具; N/20 NaOH; N/l のNaOH; フェノールのフタレイン(表示器); 蒸溜された水; 大きい漏斗; 編まれたフィルターペーパー; 満ちる漏斗; 生殖不能の試験管; 生殖不能のリットルのフラスコ; 粗いバランス; 大きいガス・バーナー; 1 リットルの計量カップ; 蒸気の殺菌のための器具。

方法。1 。3 リットルの瑪瑙製品のバケツの場所15 のgms 。500 c.c の寒天の。蛇口水の。

2 。寒天をよく洗浄し、断片およびsqueez のing をそれ手を通して分ける。

3 。注がれる量を測定する汚れた水をデカントしなさい

42

概要の微生物学

を離れて; きれいな蛇口水の同量と取り替えなさい。

繰り返し。

4 。絶えずかき混ぜる5 分の自由な炎そして沸騰に分解しなさい。solu のtion は寒天の固まりから完全に自由でなければならない。

5 。沸騰の寒天に1% Witte のペプトン及び0.5% の塩を追加しなさい。

6 。500 c.c に。融合の肉の10 のgms を追加しなさい。100 c.c とよく混合された卵のAl のbumen 。蛇口水の。(卵の卵白タンブラーに置かれてのりを形作るために十分な水を追加すれば。スムーズまでかき混ぜ、次に残のing 水を追加しなさい。1 個の卵; 打たれる井戸

図9 。。代わりになるかもしれないのための熱湯の漏斗は) フィルタに�&ける寒天かゼラチンすべてを混合しなさい。完全に

7 。絶えずかき混ぜる肉注入に溶かされた寒天の混合物をゆっくり注ぎなさい。四十五分または流れる蒸気の1 時間120 C. のautoclav の熱。

ノート。この暖房の時間は利点に延びる、決して短くされるかもしれない。寒天がろ過の前に十分に熱されなかったら、綿状の沈殿物は流れる蒸気の熱した上で管で形作る。消えることをほとんどの場合これはautoclav で少しの間熱するによりによって15 Ibs で引き起こすことができる。

8 。N/20 NaOH とTitrate 。

9 。正常なNaOH か正常なHC1 との+15 に媒体の反作用を合わせなさい。Retitrate は反作用を必要ならば再調整し。

10 。平衡力は重量に注意し。

11 。沸騰はかき混ぜる自由な炎上の15 分stantly 騙す、

DUNHAM のペプトンの解決43

12 。蒸溜された水の沸騰の重量の損失を釣り合わせ、埋め合せなさい。

13 。前に沸騰水と洗浄される沸騰の熱い直通の編まれたフィルターペーパーをちょうどフィルタに�&けなさい。明確まで同じペーパーを通して濾液を渡しなさい。

14 。盛り土60 から70 の生殖不能の試験管、およそ8 c.c を使用する。各管のための媒体の。

15 。流れる蒸気で3 つのsuc cessive 日の20 分熱しなさい。

16 。最終的な暖房の端に、大きい表面が微生物の耕作のために前にsented あるように凝固するために傾向がある位置に寒天の管を置きなさい(媒体がプラグに触れない注意してはいけない) 。これらは寒天傾斜と呼出される。

ノート。寒天の管が寒天傾斜のためただ使用されるべきなら媒体のより少しは管でめっきに使用するときより必要とされる。

17 。寒天の大きいフラスコを殺菌するため、4 つの連続的な日の30 分の熱。