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寒天版の細菌文化

寒天の�&養皿を使用して細菌文化の成長の情報

目録:

寒天版および修理する寒天媒体およびフォーラムのトピック

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寒天- 定義…は何であるか。

寒天か寒天(Malay ワード意味"野菜から") 、細菌学作業のために1 種類の固体�&養基を準備することで使用される物質は、インド洋の近くでそして中国及び日本水で見つけられる様々な海藻から準備されるプロダクトである。このタイプの海藻にセイロン島またはJaffna のコケ、ベンガルのisinglass 、等として複数の共通の名前が、ある。様々な種類は食糧のために使用され、貿易はかなりである。

寒天の栄養流体�&養基および版を使用して微生物学の背景そして歴史

Payen のフランスの化学者の-(about 1859) は、海藻、次の方法のGelidium のcorneum からの寒天のゼリーを、得た: 海藻が塩化水素酸の冷たい希釈液のしばらく立つ; 酸は水と数回の洗浄によって取除かれた、そして海藻はアンモナルの冷たい希釈液に置かれた; 次にアンモナルは冷水と繰り返された洗浄によって取除かれた。このプロセスの間に、海藻はミネラル塩、着色の問題、および有機性要素の重量の53% を失った。残りの部分はプロセスの間に野菜ゼリーが得られた水で沸いた。無用の沈殿物を後ろ去る解決は従って得られて注がれた。このゼリーは構成が同じとあり野菜ティッシュに存在している; それはゼラチンの準備のコラーゲンがあるように、化学的に変更されなかった。商業寒天は異なった平均による乾燥へのこの解決の蒸発によっておそらく準備される。

寒天は通常長く、細く、灰色がか白いストリップとしてbacteriologist の手に、またはブロックとしてヨーロッパの製造の灰色白い捕虜のder の形で、または特に近年、入って来る。

寒天は、ゼラチンに対して、炭水化物である、すなわち、カーボン、水素および酸素だけの組合せから成っている。窒素のトレースは不純物としてある。基本的なconstit のuents の上記の質的な決定はPayen 、Parumbaru および異なったソースから寒天で決定をしたHueppe によってなされた。確認されるできる限りでは経験的な方式はあらゆる範囲にまだ調査されていない。

しかしゼラチンのような寒天は可逆コロイドである。それは冷水で浸ったり、長い沸騰の後の熱湯、及び上でもっと冷却したまたはより少ない不透明なゼリーに固体ifies で味がなく、無臭の明確な解決に分解する。その水を含んだ解決はフェノールのフタレインに中立またはほぼ中立である; まだ、第20 正常なナトリウムの水和物の低下か2 つはピンクカラーを目で見えるようにして十分である。

寒天のコロイド特性は高温の長続けられた暖房によって、通常の微生物の処置によってゼラチンのそれらがあるように破壊されない。しかし上記の特性は影響を及ぼされ、寒天が分解する液体の反作用によって完全に損なわれるかもしれない。

酸またはアルカリであるどうか、液体の反作用は、すなわちcondensa のtion 水の容解性、固体性、カラー、過透性、濾過性および量に関して寒天に影響を及ぼす。寒天が0.1% HC1 と同等の酸味の液体で分解すれば寒天は、すぐにフィルタに�&ける、冷却した上で凝固しない軽く黄色く、透過、滑り易い、水を含んだ解決である結果として生じる濾液非常に容易に分解する。ハイドロ塩素酸のより小さいパーセントが使用されれば、怯固は起こる(40 C の下で。) しかし従ってゼリーは"" 立たなかったりし、寒天傾斜か平板�&養のために無用にである。多量densation 水をあるまた現在が騙しなさい。

寒天が赤茶色弱いアルカリか中立流体�&養基分解すれば、厚いのゆっくりフィルタに�&け、40 C. で、非常に固体に、不透明すぐに凝固する粘性液体で、乾燥するゼリー、持っていること少し凝縮水を得られる; それは傾斜と版で形をよく保つ。従って固体�&養基として寒天の値はアルカリ性または酸味のcjegree に従って上がるか、または下がる。

しかしアルカリとの中和によって一度寒天の凝固の特性が解決の酸の超過分の存在によって破壊されるとき、この特性決して取り戻すことができないそれは注目されなければならないさらに; 1 manently につき酸はコロイドの可逆性を破壊する。

(中立解決の1.5% 年) の寒天のmelting-point はそれ凝固したら50 C の温度でサーモスタットで立つ時、凝固�&イントが40 C. にあるが97 C. であり。細菌学の目的の場合、使用のための流動状態でこの�&イントの上の温度で流動にしか余りに熱いとき残らないから38 まで40 C. Agar で流動に残る寒天のその形式しか使用することができない; もたらされた有機体の活力は高温によって損なわれるか、または破壊された。

として寒天として利点そして不利な点栄養媒体

難しさは遅い容解性、粘着性および必然的で遅い濾過性のために寒天からの固体�&養基の準備で、見つけられる。その解決(消化力) はの上で、water-bath 、蒸気の滅菌装置、autoclav 、または余分の長い暖房によって述べられるように、自由な炎もたらされる。完全な消化力に必要な時間は3 つの事に左右される: 寒天が分解する液体の反作用、寒天のパーセントの内容、および分解の方法。寒天の解決の反作用の影響は上扱われた。しかし汎用文化使用のために通常の寒天は+15 より完全なスケールになされる(寒天は+30 より完全なスケールの上の難しさと凝固する) 。

1 パーセントの寒天は等しい条件の下により高いパーセントよりsoluble はるかに容易にである。1 のそして1 の半分のパーセントは通常の寒天媒体で使用される量であり幾分より堅く、こうしてより好ましいゼリーを与える。

寒天は自由な炎に最も急速に消化される。、断続的な方法によって寒天のろ過そして殺菌の後で十分に熱されなくて、綿状のprecip のitate は前に明確な媒体で頻繁に現われる。これはautoclav (120 C の温度への服従によってほとんどの場合消えるために作ることができる。15 Ibs.) 。

�&養基のための寒天は時液体、同質に不透明半透明時固体完全に明確な; それは版の深いコロニーを許可するか、または容易に観察されるべき文化を刺すこと十分なtranslucence を有するべきである; それは綿状材料、沈殿物を含むべきでないまたは微生物の後部の典型的なコロニーの開発及び、経験の浅いのにこれらのとして綿またはフィルターペーパーの一枚は、コロニーと、ある時間誤解されるかもしれない。

フィルターペーパー、吸収性綿、またはアスベストスを通して熱い寒天をフィルタに�&けるかわりに寒天の�&養基を作る為に、使用された最初の方法ではプロセスの間に底に解決する沈殿物冷却することを; 固体が沈殿物断ち切れた時。この方法は結果として生じる寒天の清らかさが冷却の率に左右されるので、好ましくなかった; より遅い冷却、より完全に沈降起こる。

 

ゼラチンがあるように、寒天は一般に微生物のための食糧でない、すなわち、ほとんどの細菌の消化が良い酵素によって影響されない。但し、海水である、及びB. のgelaticus n. SP. (gran) Bad. Nenckii ある、溶解の寒天の力がある少数の細菌は、ように期待される知られている。寒天のこのcompara のtive inertness はそれを、値がによってhanced どのプロセスを服従させること効力の有能な食糧物質のどのトレースでも現在の微生物によって使い果されるかの間の自然な発酵へ商業寒天をen であるかもしれない固体総合的な媒体の準備のために貴重する。(Beijerinck 。)

寒天は微生物の耕作がゼラチンのmelting-point の上の温度で行なわれなければならない細菌学作業の特別な使用である。この機能はボディのそれの下のtempera のtures の難しさと可能医学の細菌学で取られたすばらしい大またを、同様に多くの病原性のある細菌しか隔離され、育つことができない作った。

 

 

練習9 。栄養寒天の準備

器具。3.5 リットル瑪瑙製品のバケツ; 15 のgms 。寒天; 10 のgms 。ペプトン; 5 つのgms 。塩; 10 のgms 。卵の卵白(または1 個の卵); 500 c.c. 生殖不能肉注入; 500 c.c. の蛇口水; 滴定の器具; N/20 NaOH; N/l のNaOH; フェノールのフタレイン(表示器); 蒸溜された水; 大きい漏斗; 編まれたフィルターペーパー; 満ちる漏斗; 生殖不能の試験管; 生殖不能のリットルのフラスコ; 粗いバランス; 大きいガス・バーナー; 1 リットルの計量カップ; 蒸気の殺菌のための器具。

方法。1 。3 リットルの瑪瑙製品のバケツの場所15 のgms 。500 c.c の寒天の。蛇口水の。

2 。寒天をよく洗浄し、断片およびsqueez のing をそれ手を通して分ける。

3 。注がれる量を測定する汚れた水をデカントしなさい

42

概要の微生物学

を離れて; きれいな蛇口水の同量と取り替えなさい。

繰り返し。

4 。絶えずかき混ぜる5 分の自由な炎そして沸騰に分解しなさい。solu のtion は寒天の固まりから完全に自由でなければならない。

5 。沸騰の寒天に1% Witte のペプトン及び0.5% の塩を追加しなさい。

6 。500 c.c に。融合の肉の10 のgms を追加しなさい。100 c.c とよく混合された卵のAl のbumen 。蛇口水の。(卵の卵白タンブラーに置かれてのりを形作るために十分な水を追加すれば。スムーズまでかき混ぜ、次に残のing 水を追加しなさい。1 個の卵; 打たれる井戸

図9 。。代わりになるかもしれないのための熱湯の漏斗は) フィルタに�&ける寒天かゼラチンすべてを混合しなさい。完全に

7 。絶えずかき混ぜる肉注入に溶かされた寒天の混合物をゆっくり注ぎなさい。四十五分または流れる蒸気の1 時間120 C. のautoclav の熱。

ノート。この暖房の時間は利点に延びる、決して短くされるかもしれない。寒天がろ過の前に十分に熱されなかったら、綿状の沈殿物は流れる蒸気の熱した上で管で形作る。消えることをほとんどの場合これはautoclav で少しの間熱するによりによって15 Ibs で引き起こすことができる。

8 。N/20 NaOH とTitrate 。

9 。正常なNaOH か正常なHC1 との+15 に媒体の反作用を合わせなさい。Retitrate は反作用を必要ならば再調整し。

10 。平衡力は重量に注意し。

11 。沸騰はかき混ぜる自由な炎上の15 分stantly 騙す、

DUNHAM のペプトンの解決43

12 。蒸溜された水の沸騰の重量の損失を釣り合わせ、埋め合せなさい。

13 。前に沸騰水と洗浄される沸騰の熱い直通の編まれたフィルターペーパーをちょうどフィルタに�&けなさい。明確まで同じペーパーを通して濾液を渡しなさい。

14 。盛り土60 から70 の生殖不能の試験管、およそ8 c.c を使用する。各管のための媒体の。

15 。流れる蒸気で3 つのsuc cessive 日の20 分熱しなさい。

16 。最終的な暖房の端に、大きい表面が微生物の耕作のために前にsented あるように凝固するために傾向がある位置に寒天の管を置きなさい(媒体がプラグに触れない注意してはいけない) 。これらは寒天傾斜と呼出される。

ノート。寒天の管が寒天傾斜のためただ使用されるべきなら媒体のより少しは管でめっきに使用するときより必要とされる。

17 。寒天の大きいフラスコを殺菌するため、4 つの連続的な日の30 分の熱。

 

 

 

寒天の細菌文化のための参照

スミス、ERWIN F.: プラント病気に関連する細菌。Vol.. I,

PP 31-36 。複数の実例。SCHULTZ 、N. K.: Zur Frage フォンder Bereitung のeiniger Nahrsubstrate 。

セント。F. Bakt 。I. Orig. 、Bd 。10 1891 年、p. 57 。