DNA 著PCR の阻止

[Dionisia]

こんにちはすべて!

私は大きいpcr 問題を有する。私は私がQiagen ミディキットを使用して浄化したプラスミッドのDNA を使用してpcr を行なうことを試みている。

qRT-PCR のための標準カーブを作るのに私はこのDNA を使用している。

qRT-PCR のための私の標準カーブは10ng から25.uL 反作用ボリュームのDNA の0.01ng まで及ぶ5 �&イント連続希薄から成っている。

私の問題は私が10ng 及び1ng であるカーブの最も高い2 �&イントとの拡大を点見ないことである。

私は私が私のカーブの物より高い集中でPCR の反作用を最適化したので私の試薬が限定していることを考えない。何かはより高いDNA の集中の私のPCR の拡大を禁じて、私のDNA がPCR を禁じるかもしれないQiagen の代表は提案した。
だれでも考えがあるか。
everyones をありがとうは前もって助ける
喝采

[postdock]

ちょっとそこに、

どんな溶出バッファを、Qiagen EB バッファ使用したか。

PCR の問題を引き起こすかもしれないQiagen EB に塩そしてEDTA がある。

PCR の反作用の効率を禁じるかもしれないminiprep から残りのエタノールがあることができることをまた忘れてはいけない。