cDNAの統合

cDNAの統合について学びなさい。

cDNAsは酵素の逆のtranscriptase (RTase)を使用して触媒反応の成長したmRNAのテンプレートを使用して総合される。

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cDNAの統合

逆のtranscriptaseはmRNAの単一繊維を使用して動作し、RNAベースペアの組み合わせることに基づいて補足DNAを生成する(A、U、GおよびC)はDNAの補数(T、A、CおよびそれぞれG変換する)におよびそれらを。

intronsが接続されたeukaryotic cDNAを得るため:

EukaryoticセルはRNA (前mRNA)にDNAを(遺伝子から) -これであるトランスクリプションのプロセス転写する。
前mRNA繊維はintronsを接続することによってそれから処理される
poly-Aテールおよび5 'メチルグアニンの帽子はまたmRNAに追加される。
成長したmRNAの繊維のAmixtureはセルから得られる。
多Tオリゴヌクレオチドのプライマーは成長したmRNAのテンプレートのpoly-Aテールに交配させられる、または従ってDNAのあらゆる可能な6基礎単一繊維を追加し、含んでいるRNAでどこでも交配させることができる任意hexamerのプライマーは(逆のtranscriptaseは二重これを必要とする
操作を開始するプライマーとして残されたセグメント。)
逆のtranscriptaseはdeoxynucleotideの三リン酸塩(A、T、GのC)と共に、追加される。
RNAの繊維はRNAseHを使用して消化される
PCRが単一の残されたcDNAをdouble-stranded作るのに使用されている