cDNAライブラリ

cDNAライブラリについて学びなさい。

cDNAライブラリ

cDNAライブラリかcomplemantary DNAライブラリはクローンとして作られたcDNAのフラグメントのコレクションである。 cDNAライブラリはある特定のセル人口からのすべてのコーディング情報(蛋白質を作り出す遺伝コード)を含めるので強力な、役に立つツールである。

cDNAライブラリ生成

それらを生成する方法のcDNAライブラリ図表

cDNAの統合映像

cDNAライブラリ

RNAは最初にセル人口から隔離される必要がある。複数の方法は広く使われているRNAを浄化するためであるこれらはtrizolの抽出のようなキットによって基づくpolyAのカラム法そして他の化学方法を含んでいる。多(A) (アデニンヌクレオチドの長い繰り返すシーケンスから成っている)テールは逆のトランスクリプションのためにプライマーサイトとしてeukaryoticセルで使用される。 cDNAはRNAからの補足DNAを生成する逆のtranscriptaseの酵素を使用して成長したmRNAから作成される。 mRNAsが3でpoly-Aテールを'端含んでいると同時にこれmRNAsからの特定の起爆剤をおよびまた他のRNAsが可能にしない。 mRNAが隔離されればcDNAのテンプレートを作成するのに、oligodTか任意プライマーは逆のtranscriptaseと使用することができる。制限のendonucleasesがおよびDNAのリガーゼはそれから細菌のプラスミッドにcDNAシーケンスをクローンとして作るのに使用されている。

cDNAは総合された後、表現のベクトルかプラスミッドにクローンとして作られる。これらのプラスミッドは細菌の有能なセルに各々の含んでいる1つのcDNA変形する(それらがcDNAが付いているプラスミッドをとるようにいろいろな化学薬品か他の方法によって有能になされる)。これらのプラスミッドは成長する細菌でそれから増幅される。細菌のクローンはそれからプラスミッドを含んでいる細菌だけ存続するように選ばれる。これは抗生の抵抗の選択によって一般にされる。

細菌が選ばれれば、cDNAライブラリをコンパイルするために後で育ち、配列することができる細菌の在庫は作成される。