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流れCytometry

cytometry 流れで基礎的な情報を見つけ、すべての細胞生物学のための流れcytometry 方法、詳しいプロトコル、bioinformatic 分析のツールおよび流れのcytometry フォーラムの記事は質問及び議論を研究する。

流れのCytometry の背景

cytometry 流れは(またFCM と呼出される) 数えるために一般的の分子生物学方法、すぐにセルか顕微鏡の粒子検査し、液体で中断される分析し、そしてソート。流れのcytometers はレーザー光線のビームを使用して流動ストリームで光学および/または電子検出の器具を過ぎて、流れる単一のセルまたは粒子の物理的なおよび/または化学特性の同時multiparametric 分析を可能にする。

cytometry タームは(metry) 測定のためのギリシャワード、および"cytometry" に流れ単一のセルの測定を与えるセル(cyto) からそれらが探知器を過ぎて流れると同時に得る。

ユーザーがセットする一つ以上の物理的なか化学薬品の特性のセルの人口を集める流れかセルソートはcytometry 流れのそれ以上の機能でありタイプのセルの分離を電気か機械力の使用によって許可する。

流れのCytometry アプリケーション

cytometry 流れはapoptosis の細胞周期の分析で一般的、検出および分析か壊死、免疫学のためのセルソート、セル表面の抗原の検出、および茎セル分析である。

流れのCytometry の測定

流れCytomers が機械、fluorophore および他によって次のパラメータを、測定するのに使用することができる:

• セルのボリューム
• セルの形態学上の特性
• セル表面の抗原(微分の(CD) マーカー) のクラスタ
• セル顔料の検出(すなわちクロロフィルかフィコエリトリン)
• apoptosis (定量化、DNA の劣化、mitochondrial 膜の潜在性、透磁率の測定はのcaspase の作業変更する)
• セル実行可能性の試金
• DNA を査定しなさい(例えば細胞周期の分析、セル動力学、拡散で)
• RNA を査定しなさい
• 染色体の分析およびソート(DNA ライブラリ構築か染色体の絵画のために)
• 蛋白質の表現及びローカリゼーションのために査定しなさい
• 生体内でtransgenic プロダクト、特に緑の蛍光蛋白質関連蛍光
• 酵素の作業
• そして多くの他のパラメータ

どのように流れのCytometers 作業か。

単一の波長の(通常レーザー光線) 一条の光線は液体の流体力学的に集中されたストリームに指示される。いくつかの探知器はストリームが光ビームを通る�&イントに向けられる; 光ビームと一直線の1 つ(前方分散かFSC) 及び垂直それに複数(側面分散(SSC) 及び一つ以上の蛍光探知器) 。ビームを通る各々の中断された粒子は方法でライトを分散させ、粒子で見つけられるか、または粒子に接続する蛍光化学薬品は光源より低い頻度でライトを出すことに興奮するかもしれない。分散させた及び蛍光ライトのこの組合せは探知器によって選ばれ、各探知器(各々の蛍光放出ピークのための1) の明るさの変動の分析によって様々なタイプの各々の個々の粒子の物理的な及び化学構造についての情報を外挿法で推定することはそれから可能行う。FSC はセルボリュームに関連し、SSC は細胞質微粒または膜の荒さの核、量およびタイプの粒子(すなわち形) の内部の複雑さに左右される。一部はcytometers 市場の除去し、蛍光性のための必要性を測定のために使用する軽い分散だけを流れる。他は画像各セルの蛍光性、分散させたライト、および透過光のcytometers 形式の流れる。