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セル- 細胞�&養…をSubculturing

細胞�&養

セル二次�&養のプロトコル

セルをSUBCULTURING

 

DMEM 媒体4C を得なさい; トリプシン20C; BSA-20C;

円錐管のプラスチックにDMEM の36mL で入れられる

36mL DMEM にBSA 媒体の4mL を追加しなさい;

ス�&イト及びフィルターを得なさい;

ス�&イトとの媒体の上で吸いなさい。  フィルターを追加しなさい。 

ス�&イトのフィルターを通って媒体から押しなさい。

ボリュームのすべてを得るために二度繰り返しなさい。 

円錐新しいプラスチック管に入れなさい。 

ビーカーにダンプによって古い媒体を除去しなさい; 吸引器を使用してはいけない(汚染を!! 得なさい)

文化に3mL typsin を追加しなさい。  文化容器を離れた引きのセルが付いているトリプシン。

定温器に容器を入れなさい。  2 分を待ちなさい; 取りなさい;  顕微鏡に見なさい。 

より少ない群生を得ることを試みなさい。  個々のセル。

ビーカーにダンプによってトリプシンのほとんどを取除きなさい。

定温器  に入れなさい。頻繁の点検。

より少ない群生があるように底を確認する側面の非難の容器; 顕微鏡に見なさい。

多くの個々のセルを浮かぶことを見なさい時; 大きい!

より大きい容器に媒体を追加しなさい; より大きい1:5/ 年の1:3 の希薄(3-5 の容器) 。

10mL をに追加しなさい(T75)large の容器、5mL への(T25)small の容器。

ほとんどから吸いなさい(T25 からのセルの5mL) 。T75 に追加しなさい。

小さい容器にあるセルを残しなさい。  小さい容器に媒体を追加しなさい。  単一のセルがあるように顕微鏡を確認しなさい;  37C 定温器でIncubate 。 

 

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