Protocolli Della Preparazione Delle Cellule Di Alimentatore

Protocollo per MEF d'irradiazione e di placcaggio. - [irradiazione colta e placcare del protocollo del MEF]

Questo protocollo descrive l'isolamento dei fibroblasti dagli embrioni del mouse. Le cellule embrionali del fibroblasto del mouse (MEF) sono usate come strato dell'alimentatore per la coltura delle cellule embrionali del gambo del mouse (es) per contribuire ad effettuarle come cellule formative pluripotent. L'inibizione di differenziazione della Es-cellula fornita dagli alimentatori di MEF sembra essere dovuto la loro produzione del fattore inibitorio di leucemia (LIF). - [isolamento e congelamento colti dei fibroblasti embrionali del mouse primario (MEF) per le piastre dell'alimentatore]

Protocollo per la preparazione degli strati dell'alimentatore dai fibroblasti embrionali primari. - [preparazione colta degli strati dell'alimentatore dal protocollo embrionale primario dei fibroblasti]

Gli alimentatori di MEF sono preparati settimanalmente per fornire un substrato per undifferentiated le cellule embrionali del gambo (es). Le cellule primarie di MEF sono sciolte, stabilito nella coltura, hanno trattato con il mitomycin C per fermare la loro proliferazione in modo da non possono invadere le colture di es ed allora ricoperto sui piatti convenienti per la coltura delle cellule di es. Questo protocollo può anche essere usato per preparare le cellule di alimentatore dalle righe delle cellule del fibroblasto di STO. - [la preparazione colta dell'alimentatore embrionale del fibroblasto del mouse (MEF) placca il protocollo]

Protocolli per la preparazione del fibroblasto embrionale murino di NeoR. - [preparazione colta del protocollo embrionale murino dei fibroblasti di NeoR]

Questo protocollo descrive la preparazione delle cellule di alimentatore dalle cellule di MEF o dalla riga delle cellule del fibroblasto del mouse di STO. Le cellule sono rese mitotically inattive dal trattamento con {gamma}-irradiazione. Gli strati dell'alimentatore possono allora essere usati per effettuare le cellule embrionali del gambo (es) in undifferentiated dichiarano. - [colto preparando gli strati delle cellule di alimentatore da STO o dal protocollo delle cellule del fibroblasto dell'embrione del mouse (MEF)]

Questo protocollo descrive la preparazione degli strati delle cellule di alimentatore dalle cellule di MEF o dalla riga delle cellule del fibroblasto del mouse di STO. Le cellule sono rese mitotically inattive dal trattamento con il mitomycin C. Gli strati dell'alimentatore possono allora essere usati per effettuare le cellule embrionali del gambo (es) in undifferentiated dichiarano. - [colto preparando gli strati delle cellule di alimentatore da STO o dalle cellule del fibroblasto dell'embrione del mouse (MEF): Trattamento con Mitomyc]

Questo protocollo descrive la preparazione dei fibroblasti dell'embrione del mouse (MEFs), che possono allora essere usati mentre le cellule di alimentatore per effettuare le cellule embrionali del gambo (es) in undifferentiated dichiarano. - [Colto Preparando Protocollo Dei Fibroblasti Dell'Embrione Del Mouse]

Questo protocollo descrive la coltura delle cellule embrionali del gambo (es) usando mitotically l'inattivazione delle cellule embrionali del fibroblasto del mouse primario (MEF) come uno strato dell'alimentatore (preparazione descritta in preparazione delle piastre embrionali dell'alimentatore del fibroblasto del mouse (MEF)). Il terreno di coltura di es è completato con il fattore inibitorio di leucemia recombinant (LIF) per contribuire ad effettuare le cellule come cellule formative pluripotent. Questo protocollo è stato ottimizzato per la riga delle cellule ES-D3. - [propagazione colta del protocollo embrionale delle cellule del gambo del mouse di Pluripotent (es)]

Include i protocolli: Preparazione Embrionale Dei Fibroblasti Del Mouse (MEF); Raccolta Del MEFs; Cryopreservation di MEFs; MEFs di scioglimento ed effettuante; Irradiando & Placcando MEFs; Coltura delle cellule umane di es con Matrigel® ed il media condizionato; Preparazione del media condizionato (CM); Preparazione di Matrigel® - piastre rivestite; Passaggio delle cellule umane di es su Matrigel®; Mantenimento quotidiano di coltura alimentatore-libera; Cellule Umane Gelide di Es; Cellule umane di scioglimento es; Formazione dei corpi di Embryoid; - [protocolli colti per il mantenimento delle cellule formative embrionali umane negli stati dell'alimentatore liberamente]